胰腺癌；BRAF；实时定量聚合酶链反应；Western

胰腺癌组织中BRAF表达的初步研究

http://www.100md.com 《东南大学学报(医学版)》 2006年第5期

胰腺癌；BRAF；实时定量聚合酶链反应；Western,blot,,],胰腺癌；BRAF；实时定量聚合酶链反应；Western,blot,1材料和方法,2结果

     [摘要]目的：了解BRAF基因在正常胰腺和胰腺癌组织中的表达水平。方法：6例胰腺癌标本取自胰腺癌手术患者，3例正常胰腺组织取自外伤性胰腺损伤需切除部分胰腺者。用Trizol法抽提每份组织的总RNA，分别进行紫外分光光度计测定、琼脂糖凝胶电泳及Lab on chip检测，对总RNA进行质控；应用实时定量PCR技术检测正常胰腺和胰腺癌组织BRAF的mRNA水平；应用Western blot 检测BRAF的蛋白表达水平。结果：BRAF mRNA水平在正常胰腺组织中为0.001 016 7±0.000 25，胰腺癌组织中为0.002 606 2±0.001 09，上调2.56倍；Western blot显示，正常胰腺组织BRAF蛋白表达为6.70±2.50，胰腺癌组织为21.23±5.60，上调3.17倍。结论：胰腺癌组织中BRAF mRNA和蛋白表达水平均明显上调，其可能的调控机制及生物学效应还有待进一步研究。

    [关键词] 胰腺癌；BRAF；实时定量聚合酶链反应；Western blot

    BRAF(vraf murine sarcoma viral oncogene homolog B1)基因是RAF家族成员之一，能诱导禽原代细胞增殖和NIH3T3细胞分化，是一种癌基因。自Davies 等[1]报道约66%的恶性黑色素瘤和15%的结肠癌中BRAF基因存在体细胞错义突变后，该基因与肿瘤关系的研究渐成热点，但其在胰腺癌中的表达尚不清楚。本研究应用实时定量PCR及Western blot技术检测正常胰腺和胰腺癌组织中BRAF的表达水平，以探讨该基因在胰腺癌发生、发展中可能的作用。

    1 材料和方法

    1.1 标本来源与病人签署知情同意书后，收集东南大学附属中大医院2004年6～12月胰腺癌手术切除标本7例(C1～C7，其中C5号标本降解弃用) ......

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