全反式维生素A酸；_转化生长因子β1(TGFβ1)；

维生素A酸对小鼠囊胚TGFβ1蛋白表达的影响

http://www.100md.com 《数理医药学》 2006年第5期

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     摘要：目的：探讨TGFβ1细胞因子对着床前胚胎发育的作用，从而探讨ATRA对着床前期胚胎发育毒性作用，为其致畸机理提供实验依据。方法：通过促超排卵，获取妊娠3.5d小鼠囊胚，随机分成三组，即对照组(空白)、实验1组(含1μmol/L的ATRA)和实验2组(含10μmol/L的ATRA)，分别培养在含0、1μmol/L 和10μmol/L的ATRA的M199培养基中，培养24h，然后再吸出囊胚。用免疫组织化学SP法，分别检测不同剂量组ATRA对小鼠囊胚TGF—β1蛋白表达的状况，利用HPIAS2000图像分析系统测定TGFβ1蛋白在以上三组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果： TGFβ1蛋白在囊胚细胞中的表达，实验1组与对照组囊胚TGFβ1蛋白表达的阳性面积率及平均光密度有显著性差异(P<0.01)；实验2组与空白组和实验1组相比均存在显著性差异(P<0.01)。结论：细胞因子TGFβ1在胚胎发育的调节中发挥了重要作用。

    关键词：全反式维生素A酸；转化生长因子β1(TGFβ1)；囊胚；小鼠

    维生素A酸(Retinoic acid,RA)即视黄酸，是维生素A即视黄醇(retinal，ROL)在体内氧化代谢的一类具有生物活性的产物。此外，维生素A酸在临床上也是用来治疗痤疮和其他许多皮肤病的重要药物。同时它也是用于一些恶性肿瘤联合治疗的药物之一，如卵巢癌、乳腺癌、白血病及肺癌等。但维生素A酸也是公认的致畸因子，许多动物实验已经证实在妊娠期间服用维生素A酸对胎儿的发育可产生重要的影响。RA对囊胚的这种致畸效应可能由于其诱导ICM和TE细胞过渡凋亡所致。而RA诱导囊胚细胞凋亡目前尚未见报道。本研究通过免疫组织化学方法研究TGFβ1蛋白在囊胚细胞中的表达。

     1 材料与方法

    11 材料

    111 试验动物一级健康昆明种小白鼠(SPF级)，由武汉大学医学院动物试验中心提供。

    112 主要试剂和仪器孕马血清(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)为天津生物制品厂产品；ATRA购自上海第六制药厂；propodium iodide(PI)和bisbenzimide(Hoechst 33258)以及Triton100均系美国Sigma公司产品；M199培养基为美国Hyclone公司的产品；浓缩型兔抗人TGFβ1多克隆抗体DAB显色试剂盒及多聚赖氨酸均购自北京中山技术公司；超敏即用型SP通用型免疫组织化学试剂盒系福州迈新公司产品 ......

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