安体欣对130 dB次声作用后大鼠脑、肺组织SOD活性及MDA含量的影响
Effect of ANTIXIN on SOD activity and MDA content in lung and brain of rats exposed to 130 dB infrasound
ZHAO ZhiGang, HU DeHua, ZHANG LiYan,CHEN JingZao
Department of Radiation Medicine, School of Preventive Medicine, Fourth Military Medical University, Xian 710033, China, Department of Medical Affairs, PLA 264 Hospital, Taiyuan 030001, China
【Abstract】 AIM: To observe the effect of ANTIXIN on the serum SOD activity and MDA content in the tissues of lung and brain of the rats exposed to the continuous infrasound of 130 dB (16 Hz). METHODS: Taking different doses of ANTIXIN orally in advance, the rats were exposed to the continuous 130 dB (16 Hz) infrasound for 14 d (2 h/d). Half an hour after each exposure, the serum SOD activity and MDA content of the rats were observed respectively. RESULTS: The SOD activity and MDA content in tissues of lung and brain of the animals exposed to the infrasound increased (P<0.01). When the rats took ANTIXIN orally in advance, the SOD activity and MDA content in tissues of lung and brain decreased. CONCLUSION: Infrasound can surely affect the metabolism of the free radicles in organism. ANTIXIN can extenuate the harmful free radical reactions.
【Keywords】 infrasound; superoxide dismutase; malondialdehgde; ANTIXIN
【摘要】 目的： 观察安体欣对16 Hz，130 dB次声连续作用后，大鼠脑、肺组织SOD活性及MDA含量的影响. 方法： 预服不同剂量的安体欣后，用16 Hz，130 dB次声连续作用2 h/(次·d)×14次，分别于作用后0.5 h观察大鼠脑、肺组织SOD活性及MDA含量. 结果： 次声作用后，动物脑、肺组织SOD活性和MDA含量升高(P<0.01)，预服安体欣后使脑、肺组织SOD和MDA含量下降. 结论： 次声确可影响体内自由基代谢，安体欣可以减轻有害的自由基反应.
【关键词】 次声;超氧化物歧化酶;丙二醛;安体欣
0引言
近年研究提示，受次声作用的小鼠大脑皮质的神经细胞内脂质氧化过程加快，有大量脂褐素，细胞萎缩老化，同时机体不同组织对次声作用后产生各类自由基的情况存在差别，表明次声可通过激活氧化系统产生大量自由基而损害脑细胞功能[1-2]，如果采用自由基清除制剂就可防止次声的损害，本研究我们对中成药安体欣的次声损伤防护作用进行了观察.
1材料和方法
1.1材料成年健康雌性SD大鼠30只，体质量180~220 g(第四军医大学实验动物中心提供). 实验前1 wk.领回，分笼饲养于安静环境中，自由饮水，标准饲料喂养，避免各种刺激，随机分为5组：对照组；次声组；30 g/L安体欣组；300 g/L安体欣组；600 g/L安体欣组，每组6只动物. 对照组动物放入次声压力仓内不施加次声作用，2 h/(次·d)×14次；次声组动物放入次声压力仓内接受16 Hz，130 dB次声连续作用2 h/(次·d)×14次；其余3组采用灌胃法每日8:00时分别给与动物0.2 mL的30 g/L，300 g/L，600 g/L安体欣，1次/d×6 d，然后将动物放入次声压力仓内接受16 Hz，130 dB次声连续作用2 h/(次·d) × 14次. 次声压力仓系统采用电激励方式产生次声，为第四军医大学与中国科学院声学研究所、航天工业总公司41所合作研制. 动物于次声作用结束后0.5 h以20 g/L戊巴比妥钠腹腔麻醉，断头处死取全脑、肺入-80℃冰箱保存待测.
1.2方法脑、肺组织SOD活性及MDA含量测定[3]所用试剂为15 mmol/L盐酸羟胺；75 mmol/L Na2CO3/NaHCO3 (V/V=7/3), pH 10.2, 含EDTANa2 0.15 mmol/L; 30 g/L Triton·X100液；0.98 mmol/L NBT；pH 7.3的PBS液. 81 g/L十二烷基璜酸钠液；pH 3.5的200 g/L醋酸缓冲液；10 g/L硫代巴比妥酸. 组织称质量→以生理盐水为溶剂制成100 g/L匀浆液→3000 r/min×10 min→取上清0.2 mL入10 mL玻璃试管待测SOD和MDA. 采用721型分光光度计分别于590 nm波长测SOD和570 nm波长测MDA A值.
统计学处理： 实验数据以x±s表示，用SPLM统计软件进行析因分析并作两两比较.
2结果
与对照组比较，次声组动物脑、肺组织SOD活性和MDA含量升高(P<0.01)，这表明次声可影响体内自由基代谢. 与次声组比较，各安体欣组动物脑、肺组织的SOD活性和MDA含量均下降(P<0.01，表1)，这表明安体欣可以减轻次声引起的有害自由基反应.
表1安体欣对大鼠脑、肺SOD活性及MDA含量的影响(略)
bP<0.01 vs对照; dP<0.01 vs次声.
3讨论
次声作用机体后产生过量活性氧自由基是次声损害作用的途径之一. 据报道：采用维生素E和维生素C及2，3二巯基丙醇磺酸钠复合物，在8 Hz, 100 dB次声作用雌性白鼠前5 d至作用中10 d腹腔注射，结果显示该复合物能提高脑毛细血管和微毛细胞血管壁对次声损伤的抵抗力，较好地防止出血[4].
O2-具有较强的生物学活性，参与机体内多种生理、病理过程[5]. O2-在有机体内的作用比较复杂，它们在一定范围内通过一定途径可以被细胞利用，如中性粒细胞对细菌及肿瘤细胞的杀伤作用即涉及O2-等活性氧的作用，但是，过量的自由基则可能对组织或细胞产生损伤效应. 体内SOD活性和MDA含量升高意味着体内氧自由基生成增加，机体内脂质过氧化程度加重，自由基对组织细胞的损害加重. 本研究发现，与对照组比较，次声组脑、肺组织SOD活性及MDA含量均比对照组明显升高，显然16 Hz，130 dB次声可使大鼠脑、肺组织细胞产生过量的自由基从而损害细胞功能. 国外学者也从形态学角度证实次声可使肺泡破坏，肺血管断裂[6].
中药“安体欣”系采用丹参、当归等天然植物提取的活性效素制备而成，能促进抗氧化防御系统功能，清除多种自由基和抑制脂褐素生成，具有改善机体微循环、调节机体内分泌系统，升高红细胞数、增强体质、延缓衰老作用，是高效的自由基消除剂和抗氧化剂. 本研究发现，与次声组比较，各安体欣组动物脑、肺组织SOD活性和MDA含量均低于次声组，这表明安体欣能有效清除脑、肺组织产生的过量自由基，降低脂质过氧化程度，从而降低了脑、肺组织的SOD活性和MDA含量，对保护脑、肺组织细胞的正常功能，具有重要意义(表1).
本研究我们观察了安体欣对16 Hz，130 dB次声连续作用14次后，大鼠脑、肺组织SOD活性及MDA含量的变化规律，提示安体欣对次声损伤具有防护效果，为研究次声的防护、治疗奠定了一定的基础.
【参考文献】
[1] 崔芳,任雨笙,李玲,等. 不同声强8 Hz次声作用对大鼠GSHPX,SOD活性及MDA含量的影响[J].第四军医大学学报，1999,20(9):743-744.
[2] 王斌,陈景藻,易南. 不同声强8 Hz次声对小鼠学习能力的影响[J]. 第四军医大学学报，1997,18(5):442-445.
[3] 庞战军,周玫,陈瑗. 自由基医学研究方法[M].北京:人民卫生出版社,2000：14,119.
[4] Свидовый ВИ,Глинчков ВВ.Реакция клеток нервной системы на воздействие инфразвука[J].Гиг Труда и профессиональных заболеваний，1991,(6):37-38.
[5] 莫简. 医用自由基生物学导论[M].北京:人民卫生出版社,1989：81-83.
[6] Свидовый ВИ. Действие инфразвука на структуру лёгкого[J]. Гиг Труда， 1986,(1):34-37.
编辑井晓梅
基金项目：全军十五指令课题(01L071)
(第四军医大学预防医学系放射医学教研室，陕西 西安 710033，解放军第264医院医务处，山西 太原 030001), 百拇医药(赵志刚，胡德华，张李燕，陈景藻)
ZHAO ZhiGang, HU DeHua, ZHANG LiYan,CHEN JingZao
Department of Radiation Medicine, School of Preventive Medicine, Fourth Military Medical University, Xian 710033, China, Department of Medical Affairs, PLA 264 Hospital, Taiyuan 030001, China
【Abstract】 AIM: To observe the effect of ANTIXIN on the serum SOD activity and MDA content in the tissues of lung and brain of the rats exposed to the continuous infrasound of 130 dB (16 Hz). METHODS: Taking different doses of ANTIXIN orally in advance, the rats were exposed to the continuous 130 dB (16 Hz) infrasound for 14 d (2 h/d). Half an hour after each exposure, the serum SOD activity and MDA content of the rats were observed respectively. RESULTS: The SOD activity and MDA content in tissues of lung and brain of the animals exposed to the infrasound increased (P<0.01). When the rats took ANTIXIN orally in advance, the SOD activity and MDA content in tissues of lung and brain decreased. CONCLUSION: Infrasound can surely affect the metabolism of the free radicles in organism. ANTIXIN can extenuate the harmful free radical reactions.
【Keywords】 infrasound; superoxide dismutase; malondialdehgde; ANTIXIN
【摘要】 目的： 观察安体欣对16 Hz，130 dB次声连续作用后，大鼠脑、肺组织SOD活性及MDA含量的影响. 方法： 预服不同剂量的安体欣后，用16 Hz，130 dB次声连续作用2 h/(次·d)×14次，分别于作用后0.5 h观察大鼠脑、肺组织SOD活性及MDA含量. 结果： 次声作用后，动物脑、肺组织SOD活性和MDA含量升高(P<0.01)，预服安体欣后使脑、肺组织SOD和MDA含量下降. 结论： 次声确可影响体内自由基代谢，安体欣可以减轻有害的自由基反应.
【关键词】 次声;超氧化物歧化酶;丙二醛;安体欣
0引言
近年研究提示，受次声作用的小鼠大脑皮质的神经细胞内脂质氧化过程加快，有大量脂褐素，细胞萎缩老化，同时机体不同组织对次声作用后产生各类自由基的情况存在差别，表明次声可通过激活氧化系统产生大量自由基而损害脑细胞功能[1-2]，如果采用自由基清除制剂就可防止次声的损害，本研究我们对中成药安体欣的次声损伤防护作用进行了观察.
1材料和方法
1.1材料成年健康雌性SD大鼠30只，体质量180~220 g(第四军医大学实验动物中心提供). 实验前1 wk.领回，分笼饲养于安静环境中，自由饮水，标准饲料喂养，避免各种刺激，随机分为5组：对照组；次声组；30 g/L安体欣组；300 g/L安体欣组；600 g/L安体欣组，每组6只动物. 对照组动物放入次声压力仓内不施加次声作用，2 h/(次·d)×14次；次声组动物放入次声压力仓内接受16 Hz，130 dB次声连续作用2 h/(次·d)×14次；其余3组采用灌胃法每日8:00时分别给与动物0.2 mL的30 g/L，300 g/L，600 g/L安体欣，1次/d×6 d，然后将动物放入次声压力仓内接受16 Hz，130 dB次声连续作用2 h/(次·d) × 14次. 次声压力仓系统采用电激励方式产生次声，为第四军医大学与中国科学院声学研究所、航天工业总公司41所合作研制. 动物于次声作用结束后0.5 h以20 g/L戊巴比妥钠腹腔麻醉，断头处死取全脑、肺入-80℃冰箱保存待测.
1.2方法脑、肺组织SOD活性及MDA含量测定[3]所用试剂为15 mmol/L盐酸羟胺；75 mmol/L Na2CO3/NaHCO3 (V/V=7/3), pH 10.2, 含EDTANa2 0.15 mmol/L; 30 g/L Triton·X100液；0.98 mmol/L NBT；pH 7.3的PBS液. 81 g/L十二烷基璜酸钠液；pH 3.5的200 g/L醋酸缓冲液；10 g/L硫代巴比妥酸. 组织称质量→以生理盐水为溶剂制成100 g/L匀浆液→3000 r/min×10 min→取上清0.2 mL入10 mL玻璃试管待测SOD和MDA. 采用721型分光光度计分别于590 nm波长测SOD和570 nm波长测MDA A值.
统计学处理： 实验数据以x±s表示，用SPLM统计软件进行析因分析并作两两比较.
2结果
与对照组比较，次声组动物脑、肺组织SOD活性和MDA含量升高(P<0.01)，这表明次声可影响体内自由基代谢. 与次声组比较，各安体欣组动物脑、肺组织的SOD活性和MDA含量均下降(P<0.01，表1)，这表明安体欣可以减轻次声引起的有害自由基反应.
表1安体欣对大鼠脑、肺SOD活性及MDA含量的影响(略)
bP<0.01 vs对照; dP<0.01 vs次声.
3讨论
次声作用机体后产生过量活性氧自由基是次声损害作用的途径之一. 据报道：采用维生素E和维生素C及2，3二巯基丙醇磺酸钠复合物，在8 Hz, 100 dB次声作用雌性白鼠前5 d至作用中10 d腹腔注射，结果显示该复合物能提高脑毛细血管和微毛细胞血管壁对次声损伤的抵抗力，较好地防止出血[4].
O2-具有较强的生物学活性，参与机体内多种生理、病理过程[5]. O2-在有机体内的作用比较复杂，它们在一定范围内通过一定途径可以被细胞利用，如中性粒细胞对细菌及肿瘤细胞的杀伤作用即涉及O2-等活性氧的作用，但是，过量的自由基则可能对组织或细胞产生损伤效应. 体内SOD活性和MDA含量升高意味着体内氧自由基生成增加，机体内脂质过氧化程度加重，自由基对组织细胞的损害加重. 本研究发现，与对照组比较，次声组脑、肺组织SOD活性及MDA含量均比对照组明显升高，显然16 Hz，130 dB次声可使大鼠脑、肺组织细胞产生过量的自由基从而损害细胞功能. 国外学者也从形态学角度证实次声可使肺泡破坏，肺血管断裂[6].
中药“安体欣”系采用丹参、当归等天然植物提取的活性效素制备而成，能促进抗氧化防御系统功能，清除多种自由基和抑制脂褐素生成，具有改善机体微循环、调节机体内分泌系统，升高红细胞数、增强体质、延缓衰老作用，是高效的自由基消除剂和抗氧化剂. 本研究发现，与次声组比较，各安体欣组动物脑、肺组织SOD活性和MDA含量均低于次声组，这表明安体欣能有效清除脑、肺组织产生的过量自由基，降低脂质过氧化程度，从而降低了脑、肺组织的SOD活性和MDA含量，对保护脑、肺组织细胞的正常功能，具有重要意义(表1).
本研究我们观察了安体欣对16 Hz，130 dB次声连续作用14次后，大鼠脑、肺组织SOD活性及MDA含量的变化规律，提示安体欣对次声损伤具有防护效果，为研究次声的防护、治疗奠定了一定的基础.
【参考文献】
[1] 崔芳,任雨笙,李玲,等. 不同声强8 Hz次声作用对大鼠GSHPX,SOD活性及MDA含量的影响[J].第四军医大学学报，1999,20(9):743-744.
[2] 王斌,陈景藻,易南. 不同声强8 Hz次声对小鼠学习能力的影响[J]. 第四军医大学学报，1997,18(5):442-445.
[3] 庞战军,周玫,陈瑗. 自由基医学研究方法[M].北京:人民卫生出版社,2000：14,119.
[4] Свидовый ВИ,Глинчков ВВ.Реакция клеток нервной системы на воздействие инфразвука[J].Гиг Труда и профессиональных заболеваний，1991,(6):37-38.
[5] 莫简. 医用自由基生物学导论[M].北京:人民卫生出版社,1989：81-83.
[6] Свидовый ВИ. Действие инфразвука на структуру лёгкого[J]. Гиг Труда， 1986,(1):34-37.
编辑井晓梅
基金项目：全军十五指令课题(01L071)
(第四军医大学预防医学系放射医学教研室，陕西 西安 710033，解放军第264医院医务处，山西 太原 030001), 百拇医药(赵志刚，胡德华，张李燕，陈景藻)