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编号:11410244
蛋白质组学中基质辅助激光解吸电离的基质研究进展
http://www.100md.com 《分析化学》医学期刊 2007年第3期
基质辅助激光解吸电离,质谱,基质,蛋白质,多肽,评述,,基质辅助激光解吸电离,质谱,基质,蛋白质,多肽,评述,1引言,2MALDI基质的特征,3MALDI基质的分类,4展望
     摘要 基质辅助激光解吸电离(MALDI)技术是近年来发展起来的新的质谱离子化技术。本文较为系统地综述了应用于蛋白质组学中的MALDI基质的最新进展以及不同的基质的优缺点及应用范围,并且归纳了其发展趋势。

    关键词 : 基质辅助激光解吸电离, 质谱, 基质, 蛋白质,多肽,评述

     1 引言

    激光解析离子化质谱(laser desorption ionization mass spectroscopy, LDIMS)曾经是一种重要的分析非挥发性有机物的方法。然而LDI要求样品分子对激发光有强的吸收,否则对弱吸收的样品分子则需要增强激光能量才能使其离子化,这同时也导致了大分子量的样品分子容易发生碎裂,限制了LDI应用于分子量大于2.98 ku、热不稳定的样品分子的分析[1~3]。1988年,Karas等[4]提出了基质辅助激光解吸电离(matrix assisted laser desorption ionization, MALDI)技术,解决了高质量数生物分子的离子化问题。MALDI是一个非常复杂的过程,其中涉及到光学、力学现象及相变和电离的热力学、物理化学过程[5]。由于MALDI技术采用紫外区的激光作激发光源得到了更好的灵敏度,而且可以显著增加对盐[6]和常用缓冲液[7]的包容性,使得样品的处理步骤能够更加简单快捷。而最早使用的连续照射激光器会导致大量的基质和样品分子迅速解吸,使速度、能量都比较分散,降低了质谱的分辨率。随后采用的脉冲激光、离子镜、反射式质谱及时间延迟聚焦技术都显著地提高了分辨率。作为一种生物大分子的电离技术,MALDI通常与无质量检测上限飞行时间质谱(TOFMS)联用,直到现在MALDITOFMS仍然广泛用于对蛋白质的分析、鉴定。随后,MALDI与FTMS联用也被用于对大分子的研究[8]。MALDIFTMS不仅能够获得更好的分辨率与质量准确度,而且还可以得到更多样品分子的结构信息。此后不久,MALDI与离子阱也得以成功地联用,并应用于生物大分子的分析[9]。

     2 MALDI基质的特征

    MALDI离子化的过程可简单地归纳为待分析物分散于过量的MALDI基质中,在脉冲激光的照射下,基质分子气化并离子化,并且传递能量和电荷给样品分子使得样品分子也发生气化和离子化。一种好的基质要具备下列几种特点:(1)基质最重要的功能就是吸收脉冲激光的能量,既可以通过电离吸收紫外区激光的能量,也可以通过分子的化学键振动吸收红外区激光的能量,这由所采用的激光波长来决定 ......

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