高效液相色谱与电喷雾飞行时间质谱联用鉴定胰岛素注射液
胰岛素,高效液相色谱,电喷雾飞行时间质谱,,胰岛素，高效液相色谱，电喷雾飞行时间质谱,1引言,2实验部分,3结果与讨论,References
摘要 用反相高效液相色谱(RPHPLCUV)和电喷雾飞行时间质谱(ESITOF/MS)鉴定商品化胰岛素注射液中的胰岛素。使用反相C18微柱(2.1 mm×30 mm，3.5 μm)，1%醋酸的水/乙腈(66∶34，V/V)为流动相，胰岛素能在1 min之内实现快速分离检出。通过改变流动相流速、酸度以及质谱各参数获得胰岛素检测的最优化条件，在该条件下，胰岛素可获得最佳电离效率，样品量仅为0.174 pmol即可获得有效质谱信号。同时在ESI正离子全范围扫描中主要形成带有+3、+4、+5、+6、+7等不同电荷数的质谱峰。经去卷积计算可得胰岛素的精确分子量，与理论值的相对误差可至1.72×10-7以下。关键词 胰岛素，高效液相色谱，电喷雾飞行时间质谱
1 引言
胰岛素是一种由胰腺的β细胞合成的蛋白激素，其主要功能是控制动物体内的血糖浓度。自1921年被发现以来，胰岛素作为特效药已被广泛用于糖尿病的治疗[1]。不同生物来源的胰岛素结构大致相同，牛、猪胰岛素与人胰岛素极其相似[1，2]，因此能代替人胰岛素用于糖尿病的治疗。胰岛素鉴定方法有液相色谱紫外吸收法[3，4],荧光法[5]。但是光学法是一种间接的分析方法，分辨能力差，对化合物的鉴定强烈依赖于色谱的分离能力，并且需要标准品才能对未知化合物进行定性。近年来，质谱法得到了快速的发展，它弥补了光学法的不足，基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDITOF/MS)和电喷雾飞行时间质谱(ESITOF/MS)作为其中的代表被广泛运用于生物大分子的研究领域[6～9]。本工作以胰岛素作为模型蛋白，建立了HPLC与ESITOF/MS联用鉴定胰岛素的方法，并对2种商品化胰岛素注射液进行了快速的分离分析，对3种不同胰岛素的色谱、质谱性质进行了比较。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂1100液相色谱仪、DAD检测器、自动进样器、G1969A ESITOF/MS 电喷雾飞行时间质谱仪 (美国Agilent公司) ......
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