人乳头瘤病毒阳性食管鳞癌E6癌基因蛋白免疫组化检测及超微结构观察
作者：邹赛英 刘旭明 唐新萍 王萍
单位：兰州军区乌鲁木齐总医院病理科 乌鲁木齐 830000
关键词：
华人消化杂志/研究原著/980120Immunohistochemical and electron microscopic observation on positive
HPV16-E6 protein in esophageal cancer
Zou SY, Liu XM, Tang XP, Wang P
Immunohistochemical and electron microscopic observation on
, http://www.100md.com
positive HPV16-E6 protein in esophagealcancer
ZOU Sai-Ying, LIU Xu-Ming, TANG Xin-Ping and WANG Ping
Department Pathology, Chinese PLA Urumqi General Hospital of
Lanzhou Command Area, Urumqi 830000, Xinjiang Autonomous
Region, China
Subject headings oncogene proteins, viral/metabolism; esophageal
, http://www.100md.com
neoplasms/metabolism; carcinoma, squamous cell/metabolism; esophageal
neoplasms/ultrastructure; carcinoma, squamous cell/ultrastructure
Abstract
AIM To study the expression of HPV16-E6 protein and ultrastructure
in human esophageal cancer.
METHODS By using immunohistochemical method, 45 patients with
, http://www.100md.com
positive HPV16-E6 protein were studied and microscopic observation was made.
RESULTS Nuclear HPV16-E6 protein was present in 45 (84.9%) cases
of esophageal squamous cell cancer specimens in HPV DNA positive patients
by immunohistochemical method. Under the electron microscope, the inter- and
peri-chromatin granules as well as nuclear bodies were increased in the nuclei in
, http://www.100md.com
all biopsies with positive HPV16-E6 protein, but no HPV particle was found in
cancer cells.
CONCLUSION HPV16DNA-E6 was integrated into the cellular genome.
The E6 early genes of HPV16DNA were closely related to the inter- and
peri-chromatin granules as well as nuclear bodies hyperplasia in the nuclei
, 百拇医药
of esophageal cancer.
主题词 癌基因蛋白质类，病毒性/代谢；食管肿瘤/超微结构；食管肿瘤/代谢；
癌，鳞状细胞/超微结构；癌，鳞状细胞/代谢
中国图书资料分类号 R 735.1
摘 要
目的 观察人乳头瘤病毒(HPV)E6癌基因蛋白阳性食管鳞癌的超微结构特性，探
讨食管鳞状细胞癌与E6癌基因蛋白的关系。
方法 采用微波免疫组化技术，对53例食管鳞癌HPV阳性病例进行HPVE6蛋白检测，同时进行电镜观察.
, http://www.100md.com
结果 45例阳性的食管鳞癌中，高分化鳞癌2例(4.4%)，中分化鳞癌18例(40.0%)，低分化鳞癌25例(55.6%). 电镜观察：HPV阳性的食管鳞癌主要呈低度分化. 除显示
核质比例增加，核外形不规则以外，核小体及染色质间、染色质周围颗粒显著增加。
超微结构中未见病毒颗粒.
结论 食管鳞状细胞癌中HPVE6蛋白与食管癌细胞的异常增生、代谢旺盛有一定的
关系。
0 引言
在近年乳头瘤病毒与人类鳞状细胞癌的研究中，高危HPV-16/18-DNA的早期转
化基因E6蛋白与鳞癌的密切关系已开始得到证明[1，2]，食管鳞状细胞癌中HPVE6
, http://www.100md.com
的表达及超微结构变化尚未见报道. 我们采用免疫组化技术，对53例经多重PCR检
测人乳头瘤病毒阳性的食管鳞癌标本进行HPVE6蛋白检测，同时进行电镜观察，结
合资料特点予以探讨分析。
1 对象和方法
1.1 对象 HPV阳性食管鳞癌53例，将手术切除的食管鳞状细胞癌标本肿瘤区域组
织10%福尔马林固定，常规石蜡切片2张，一张HE染色，病理诊断分型. 另一张进行
免疫组化E6蛋白检测.
, 百拇医药 1.2 方法 ①免疫组化检测：使用浙江产YWY781型医用微波炉. 先进行抗原修复，然后进行微波ABC免疫组化法. 光镜观察：以胞核内出现棕黄色颗粒计为阳性，设正
常胎儿食管粘膜和非癌食管组织为阴性对照. ②电镜观察：食管鳞癌标本经3.75%戊
二醛及1%锇酸双重固定，梯度丙酮脱水，低粘度包埋剂浸透并包埋。半薄切片定位于
鳞状细胞癌组织，超薄切片经铅铀双重染色，用JEM-1010电镜观察。
2 结果
多重引物PCR检测HPV阳性的53例食管鳞癌中，HPVE6癌基因蛋白免疫组化检测
阳性45例，其中高分化鳞癌2例(4.4%)，中分化鳞癌18例(40.0%)，低分化鳞癌25
, 百拇医药
例(55.6%)；其表达特征为：阳性颗粒位于胞核内，呈点灶状或片状、全层性分布，以低分化鳞癌的表达强度最高. 正常胎儿和非癌食管鳞状上皮呈阴性。
食管鳞癌的电镜样品10例中，HPVE6阳性6例，电镜观察：癌巢外层的基底膜基
本消失，细胞间隙变窄，部分出现微突及绒毛样结构并出现假腺腔；桥粒明显减少
甚至消失. 胞浆内张力原纤维束减少，杂乱排列，偶见桥粒；游离核糖体及糖元颗
粒呈片状湖状区域性分布；滑面内质网及粗面内质网或明显减少或明显增多，分布
不均匀；线粒体较少者胞浆呈空泡状，多者则呈明显畸形、拥挤肿胀状态. 胞核增
大，畸形、核突起明显增多，核浆比例明显失调；常染色质及异染色质增多、分布
, 百拇医药
异常；核小体及染色质间、染色质周围颗粒增多；核仁增多、增大，常见核内包含
体. 核内未见到病毒颗粒；间质内淋巴细胞及浆细胞浸润显著。
3 讨论
人乳头瘤病毒是一种具有异质性的致瘤病毒，在高危HPV16/18DNA读码框架早
期区列的亚基因片段中，E6属于早期转化基因，编码一种158个氨基酸的核蛋白。
近年的研究证实，HPV16及18E6基因所编码的E6蛋白属于肿瘤早期特异转化蛋白，是具有生物活性的病毒癌蛋白，表达于与HPV有关的癌细胞中；88.9%的HPV-16DNA
阳性宫颈癌病例中可以检出E6基因. 在HPV-16导致宫颈癌的过程 中，E6基因多位
, http://www.100md.com
点整合在宿主细胞基因组DNA上，始终完整保留并活跃转录，从而构成宫颈鳞状细
胞转化为癌的关键因素[1-3]. 本组资料检测结果表明在HPV阳性的食管鳞癌标本
中，HPVE6有明显的表达，HPVE6基因存在于食管鳞癌细胞核内，进行转录编码，生
成E6蛋白表达，并参与食管鳞癌的发生发展过程.
我们在HPVE6蛋白阳性的食管鳞癌电镜观察中，未查见病毒颗粒，其主要的超
微结构变化为核常染色质明显增多，核内小体及染色质间、染色质周围颗粒增多等
核物质代谢旺盛的表现；核内小体的出现在HPV16DNAE6阳性表达者中多见，二者呈
, http://www.100md.com
正相关的关系；各细胞器的变化表现为低分化鳞癌的特征. 提示HPV16感染宿主的
鳞状细胞后，E6基因在核内整合、复制，从而干扰细胞的正常代谢，核物质异常增
殖，导致细胞发生恶性转化，尤其与低分化鳞癌的发生发展可能有密切的关系，有
待于深入研究。
邹赛英，女，1954-06-30生，陕西人，汉族. 1983年兰州军区高等医学 专科
学校乌鲁木齐分校医疗大专毕业，副主任医师，从事肿瘤病理的诊断及研究，发表论文30篇，获军队优秀科技成果三等奖一项，四等奖三项.
通讯作者 邹赛英，830000，乌鲁木齐兰州军区乌鲁木齐总医院病理科，新
, 百拇医药
疆乌鲁木齐友好北路41号.
Correspondence to: ZOU Sai-Ying, Department of Pathology, Chinese PLA
Urumqi General Hospital of Lanzhou Command Area, 41 Youhao Beilu, Urumqi
830000, Xinjiang Autonomous Region, China
Tel. +86·991·4842256-376
4 参考文献
1Chang FJ, Syrianen S, Shen Q, Ji HX, Syrjianen K. Human papilloma virus
, 百拇医药
(HPV) DNA in the esophageal precancer lesions and squamous cell carcinomas
from China. Int J Cancer, 1990;45(1):21-25
2Si JY, Lee K, Han R, Zhang W, Tan BB, Song GX et al. A research for the
relationship between human papillomavirus and human uterine cervical carcinoma.
I. The identification of viral genome and subgenomic sequences in biopsies of
Chinese patients. J Cancer Res Clin Oncol, 1991;117(5):454-459
3司静懿，李昆. 宫颈癌病毒病因癌变原理的研究. 中华病理学杂志，1993；22(6)：373-375
收稿日期 1997-07-17 修回日期 1997-11-02, http://www.100md.com
单位：兰州军区乌鲁木齐总医院病理科 乌鲁木齐 830000
关键词：
华人消化杂志/研究原著/980120Immunohistochemical and electron microscopic observation on positive
HPV16-E6 protein in esophageal cancer
Zou SY, Liu XM, Tang XP, Wang P
Immunohistochemical and electron microscopic observation on
, http://www.100md.com
positive HPV16-E6 protein in esophagealcancer
ZOU Sai-Ying, LIU Xu-Ming, TANG Xin-Ping and WANG Ping
Department Pathology, Chinese PLA Urumqi General Hospital of
Lanzhou Command Area, Urumqi 830000, Xinjiang Autonomous
Region, China
Subject headings oncogene proteins, viral/metabolism; esophageal
, http://www.100md.com
neoplasms/metabolism; carcinoma, squamous cell/metabolism; esophageal
neoplasms/ultrastructure; carcinoma, squamous cell/ultrastructure
Abstract
AIM To study the expression of HPV16-E6 protein and ultrastructure
in human esophageal cancer.
METHODS By using immunohistochemical method, 45 patients with
, http://www.100md.com
positive HPV16-E6 protein were studied and microscopic observation was made.
RESULTS Nuclear HPV16-E6 protein was present in 45 (84.9%) cases
of esophageal squamous cell cancer specimens in HPV DNA positive patients
by immunohistochemical method. Under the electron microscope, the inter- and
peri-chromatin granules as well as nuclear bodies were increased in the nuclei in
, http://www.100md.com
all biopsies with positive HPV16-E6 protein, but no HPV particle was found in
cancer cells.
CONCLUSION HPV16DNA-E6 was integrated into the cellular genome.
The E6 early genes of HPV16DNA were closely related to the inter- and
peri-chromatin granules as well as nuclear bodies hyperplasia in the nuclei
, 百拇医药
of esophageal cancer.
主题词 癌基因蛋白质类，病毒性/代谢；食管肿瘤/超微结构；食管肿瘤/代谢；
癌，鳞状细胞/超微结构；癌，鳞状细胞/代谢
中国图书资料分类号 R 735.1
摘 要
目的 观察人乳头瘤病毒(HPV)E6癌基因蛋白阳性食管鳞癌的超微结构特性，探
讨食管鳞状细胞癌与E6癌基因蛋白的关系。
方法 采用微波免疫组化技术，对53例食管鳞癌HPV阳性病例进行HPVE6蛋白检测，同时进行电镜观察.
, http://www.100md.com
结果 45例阳性的食管鳞癌中，高分化鳞癌2例(4.4%)，中分化鳞癌18例(40.0%)，低分化鳞癌25例(55.6%). 电镜观察：HPV阳性的食管鳞癌主要呈低度分化. 除显示
核质比例增加，核外形不规则以外，核小体及染色质间、染色质周围颗粒显著增加。
超微结构中未见病毒颗粒.
结论 食管鳞状细胞癌中HPVE6蛋白与食管癌细胞的异常增生、代谢旺盛有一定的
关系。
0 引言
在近年乳头瘤病毒与人类鳞状细胞癌的研究中，高危HPV-16/18-DNA的早期转
化基因E6蛋白与鳞癌的密切关系已开始得到证明[1，2]，食管鳞状细胞癌中HPVE6
, http://www.100md.com
的表达及超微结构变化尚未见报道. 我们采用免疫组化技术，对53例经多重PCR检
测人乳头瘤病毒阳性的食管鳞癌标本进行HPVE6蛋白检测，同时进行电镜观察，结
合资料特点予以探讨分析。
1 对象和方法
1.1 对象 HPV阳性食管鳞癌53例，将手术切除的食管鳞状细胞癌标本肿瘤区域组
织10%福尔马林固定，常规石蜡切片2张，一张HE染色，病理诊断分型. 另一张进行
免疫组化E6蛋白检测.
, 百拇医药 1.2 方法 ①免疫组化检测：使用浙江产YWY781型医用微波炉. 先进行抗原修复，然后进行微波ABC免疫组化法. 光镜观察：以胞核内出现棕黄色颗粒计为阳性，设正
常胎儿食管粘膜和非癌食管组织为阴性对照. ②电镜观察：食管鳞癌标本经3.75%戊
二醛及1%锇酸双重固定，梯度丙酮脱水，低粘度包埋剂浸透并包埋。半薄切片定位于
鳞状细胞癌组织，超薄切片经铅铀双重染色，用JEM-1010电镜观察。
2 结果
多重引物PCR检测HPV阳性的53例食管鳞癌中，HPVE6癌基因蛋白免疫组化检测
阳性45例，其中高分化鳞癌2例(4.4%)，中分化鳞癌18例(40.0%)，低分化鳞癌25
, 百拇医药
例(55.6%)；其表达特征为：阳性颗粒位于胞核内，呈点灶状或片状、全层性分布，以低分化鳞癌的表达强度最高. 正常胎儿和非癌食管鳞状上皮呈阴性。
食管鳞癌的电镜样品10例中，HPVE6阳性6例，电镜观察：癌巢外层的基底膜基
本消失，细胞间隙变窄，部分出现微突及绒毛样结构并出现假腺腔；桥粒明显减少
甚至消失. 胞浆内张力原纤维束减少，杂乱排列，偶见桥粒；游离核糖体及糖元颗
粒呈片状湖状区域性分布；滑面内质网及粗面内质网或明显减少或明显增多，分布
不均匀；线粒体较少者胞浆呈空泡状，多者则呈明显畸形、拥挤肿胀状态. 胞核增
大，畸形、核突起明显增多，核浆比例明显失调；常染色质及异染色质增多、分布
, 百拇医药
异常；核小体及染色质间、染色质周围颗粒增多；核仁增多、增大，常见核内包含
体. 核内未见到病毒颗粒；间质内淋巴细胞及浆细胞浸润显著。
3 讨论
人乳头瘤病毒是一种具有异质性的致瘤病毒，在高危HPV16/18DNA读码框架早
期区列的亚基因片段中，E6属于早期转化基因，编码一种158个氨基酸的核蛋白。
近年的研究证实，HPV16及18E6基因所编码的E6蛋白属于肿瘤早期特异转化蛋白，是具有生物活性的病毒癌蛋白，表达于与HPV有关的癌细胞中；88.9%的HPV-16DNA
阳性宫颈癌病例中可以检出E6基因. 在HPV-16导致宫颈癌的过程 中，E6基因多位
, http://www.100md.com
点整合在宿主细胞基因组DNA上，始终完整保留并活跃转录，从而构成宫颈鳞状细
胞转化为癌的关键因素[1-3]. 本组资料检测结果表明在HPV阳性的食管鳞癌标本
中，HPVE6有明显的表达，HPVE6基因存在于食管鳞癌细胞核内，进行转录编码，生
成E6蛋白表达，并参与食管鳞癌的发生发展过程.
我们在HPVE6蛋白阳性的食管鳞癌电镜观察中，未查见病毒颗粒，其主要的超
微结构变化为核常染色质明显增多，核内小体及染色质间、染色质周围颗粒增多等
核物质代谢旺盛的表现；核内小体的出现在HPV16DNAE6阳性表达者中多见，二者呈
, http://www.100md.com
正相关的关系；各细胞器的变化表现为低分化鳞癌的特征. 提示HPV16感染宿主的
鳞状细胞后，E6基因在核内整合、复制，从而干扰细胞的正常代谢，核物质异常增
殖，导致细胞发生恶性转化，尤其与低分化鳞癌的发生发展可能有密切的关系，有
待于深入研究。
邹赛英，女，1954-06-30生，陕西人，汉族. 1983年兰州军区高等医学 专科
学校乌鲁木齐分校医疗大专毕业，副主任医师，从事肿瘤病理的诊断及研究，发表论文30篇，获军队优秀科技成果三等奖一项，四等奖三项.
通讯作者 邹赛英，830000，乌鲁木齐兰州军区乌鲁木齐总医院病理科，新
, 百拇医药
疆乌鲁木齐友好北路41号.
Correspondence to: ZOU Sai-Ying, Department of Pathology, Chinese PLA
Urumqi General Hospital of Lanzhou Command Area, 41 Youhao Beilu, Urumqi
830000, Xinjiang Autonomous Region, China
Tel. +86·991·4842256-376
4 参考文献
1Chang FJ, Syrianen S, Shen Q, Ji HX, Syrjianen K. Human papilloma virus
, 百拇医药
(HPV) DNA in the esophageal precancer lesions and squamous cell carcinomas
from China. Int J Cancer, 1990;45(1):21-25
2Si JY, Lee K, Han R, Zhang W, Tan BB, Song GX et al. A research for the
relationship between human papillomavirus and human uterine cervical carcinoma.
I. The identification of viral genome and subgenomic sequences in biopsies of
Chinese patients. J Cancer Res Clin Oncol, 1991;117(5):454-459
3司静懿，李昆. 宫颈癌病毒病因癌变原理的研究. 中华病理学杂志，1993；22(6)：373-375
收稿日期 1997-07-17 修回日期 1997-11-02, http://www.100md.com