止血环酸对酪氨酸代谢影响的临床与实验研究
作者：杨希惠 魏骏 徐菱 李文 刘海卫 庄慧娣 黄蕾
单位：200021 上海中医药大学附属曙光医院(杨希惠)；上海建工医院皮肤科(魏骏)；上海第二医科大学测试点(李文，刘海卫，庄慧娣，黄蕾)
关键词：黄褐斑；止血环酸；干扰；酪氨酸代谢
【摘要】 目的 用实验证实口服止血环酸治疗黄褐斑有效的机理是该药能干扰酪氨酸
代谢。方法 采用氨基酸自动分析法和高压液相法。结果 临床上口服止血环酸0.25 g每日3次，6～8周后皮损明显消退，总有效率82.03 %，与对照组有显著差别(P<0.05～0.001)，未见明显副反应。实验用氨基酸自动分析仪测试发现，当酪氨酸和酪氨酸酶均为等量时，止血环酸量达到或超过40 ml时，酪氨酸的消耗明显增加。高压液相证实，只有当有酪氨酸酶存在时，止血环酸才能干扰酪氨酸代谢。结论 止血环酸除具有止血功能外，还有干扰酪氨酸代谢的功能，因而有破坏黑色素产生的功能。
, 百拇医药
The clinical and experimental study on the influence of acidum tranexa
micum(AMCA) to the metabolism of tyrosine Yang Xihui, Wei Jun,Xu Ling,et,al. The Affiliated Hospital of Shanghai Traditional Chinese Medicine University 200021
【Abstract】 Objective To investigate the effective mechanism with which Melasma is treated by oral AMCA is that the drug can interfere the metabolism of tyrosinase.Methods Clinical tests and laboratory studies were used. Results In 128 cases with melasma by oral AMCA, the lesions of all patients subsided significantly after 6～8 weeks，the total effective rate is 82.03 %.There were significant differences between the treatment and control group (P<0.05～.001).No important side reaction during the treatment period. The measures with High Pressure Liquid Chrometer (HPLC)and Auto Acid Analysis System showed the cataly
, 百拇医药
tic reaction of tyrosinase to tyrosine was interfered as the concentration of strengthened.Conclusion The data indicates that AMCA has the function of interfering the metabolism of tyrosine and destroying the production of melanin.
【Key words】 Melasma Acidum tranexamicum Interference
Metabolism of tyrosine
黄褐斑是一种常见的色素沉着性皮肤病，多见于中青年妇女脸部，影响容貌。其发病机理尚未弄清楚，一般认为与遗传因素、妊娠、口服避孕药、某些慢性病、化妆品中的光敏物质及紫外线等有关[1]。传统的各种治疗方法效果均不理想，给患者带来身心障碍和痛苦。徐永等认为[2]，止血环酸治疗黄褐斑有效。我们1993～1997年用口服止血环酸加维生素C和维生素E治疗400余例，取其中治疗2个月以上随访的128例作疗效统计，进而对止血环酸的作用机理进行实验，临床观察和实验结果报告如下：
, http://www.100md.com
资料与方法
一、病例来源
本组病例均选自曙光医院美容专科门诊部，随机分组观察2个月以上，所有病例停止一切与色素代谢有关的治疗。病例中有35例(27.34 %)曾用过各种药物治疗色素2～6个月，均无效果；有20例(15.6 %)有家族史(表1)。
〖〗2〖〗28〖〗4〖〗16〖〗8〖〗2〖〗〓6〖〗〖〗12〖〗5〖〗7〖〗〖〗27〖〗3〖
〗〖〗2〖〗3〖〗9〖〗5〖〗1〖〗3〖〗7〖BG)F〗
表1 病例一般情况
组别
男性
, 百拇医药
女性
年龄(岁)
病程(年)
分型
可能加剧的诱因
18～29
30～39
40～49
≥50
<1
2～5
6～9
≥10
, 百拇医药
斑片
点滴
日晒
化妆品
月经来潮
妊娠
避孕药
妇科肿瘤
其他
治疗
5
123
16
, http://www.100md.com 70
36
6
27
48
24
29
116
12
7
20
42
20
2
, http://www.100md.com
5
32
对照
2
28
4
16
8
2
6
12
5
7
27
, http://www.100md.com
3
2
3
9
5
1
3
7
表2病情及评分情况
组别
病例
平均年龄
平均病程(年)
, http://www.100md.com 皮损平均面积cm
皮损色度
综合评分
淡褐
深褐
黑褐
轻度
中度
重度
治疗
128
37.05
6.28
, 百拇医药
37.65
25
82
21
0
64
64
对照
30
35.4
7.2
35.75
5
, 百拇医药 20
5
0
17
13
表3临床疗效分析
组别
例数
痊愈或基本痊愈
显效(%)
有效(%)
无效(%)
总有效率
, http://www.100md.com
显效率(%)
治疗
128
25(19.53)
38(29.68)
42(32.81)
23(17.8)
82.03
49.21
对照
30
0
1(3.33)
, 百拇医药
7(23.31)
22(73.33)
26.6
3.33
从表1可见：①两组均以女性为主；②年龄均以中年(30～49)为主，分别占84 %和80 %；
③病程构成相似，2年以上分别占78.9 %和80 %；④皮损分型相似，均以斑片型为主；⑤由内
分泌因素(月经、避孕药、妊娠、妇科肿瘤等)引起皮损加剧者分别占53.9 %和60 %(P>.05)。可见两组有可比性。
二、服药方法
1.治疗组：止血环酸每日3次，每次250 mg，维生素C 200 mg，维生素E 20 mg。
, 百拇医药
2.对照组：维生素C 200 mg，维生素E 20 mg，每日3次。
三、诊断标准
以王氏[3]的标准诊断，患者颜面部发生浅褐色、深褐色或黑褐色斑片，表面光滑无屑，无自觉症状，病程为慢性，年龄在18～60岁之间。
四、皮损评分标准
1.面积 1分：总面积<5 cm2；2分：总面积>5 cm2<10 cm2；3分：总面积=10 cm2。
2.色度 1分：浅褐(黄褐)色；2分：深褐色；3分：黑褐色。
3.病情 轻度：面积分+色度分≤2分；中度：>2分≤4分；重度：>4分。
, http://www.100md.com
由上表可见，两组基本病情无显著差异(P>0.05)。
五、实验室测试方法
(一)、氨基酸自动分析仪测试法
1.仪器：LKB4151型氨基酸自动分析仪(瑞典LKB公司)。
2.试剂：①酪氨酸(Tyr)，Sigma公司；②Tris液，上海西巴斯生物公司；③止血环酸，上海延安制药厂；④酪氨酸酶，Sigma公司。
3.方法：配制酪氨酸液3.93 mg/ml；Tris液6.06 mg/ml，用盐酸调到pH6.5；止血环酸液15.7 mg/ml；酪氨酸酶液15 000 Unit/ml。用10支试管分别加入5 ml Tris液、50μl Tyr液和50μl酪氨酸酶液，再分别加止血环酸液0、10、20、30、40、50、60、70、80、90 ml，混合后同放入25℃恒温水浴箱30分钟，取出后加固体磺基水杨酸终止反应，使液体pH在2～3之间，置4℃冰箱1小时以上，离心取上清液上机分析。仪器分析用缓冲系统由柠檬酸、氢氧化锂、盐酸、氯化锂配成，pH为2.80、3.0、3.45、3.55不等。显色剂为1 %茚三酮液，检测波长570 um，流速25 ml/h，温度56 ℃和81 ℃。
, 百拇医药
(二)、高压液相测试法
1.仪器：高压液相仪型号Aminosys.
2.测试条件：①技术方法：反相层析法；②标本：Aminocid 10pmol/6μl；③层析柱：Super Pac Sephasi C8 5um 4×250mm，流速125ml/min；④溶剂：A：甲酸78%100mm，pH3.3；20%醋酸锂，2%TFA。B：Acetomotrle。⑤测试时间：35分。
结 果 一、临床疗效分析
1.疗效判定标准：①痊愈或基本痊愈：皮损全部消失或基本消失，颜色呈正常或接近正常肤色，疗效指数≥95%；②显效：皮损明显缩小，颜色明显减退，疗效指数=60%；③有效：皮损缩小，颜色变淡，疗效指数20～60%；④无效：皮损无明显缩小，颜色稍淡，疗效指数<20%。
, 百拇医药
疗效指数=(疗前积分-疗后积分)/(疗前积分)×100 %
2.疗效：见表3。
表3说明，止血环酸在治疗黄褐斑中起主要作用。对照组有一定疗效，说明维生C和维生素E对色素减退有一定作用。有文献曾报告维生素C有促使黑色素转化为无色的黑素作用[4]和维生素E能对抗黑色素形成中的氧化反应[5]，其抗氧化作用可影响酪氨酸酶的活性。此外也不排除色素的自然消退。加服止血环酸后疗效显著提高，χ2=36.57，(P<0.0001)。治疗组统计表明，疗效与皮损类型有关，斑片型明显高于点滴型。
不良反应：所有病例无明显不良反应，个别病例服药早期有轻度反酸，不影响继续服药。对照组中也有个别病例有胃酸过多反应，不能排除维生素C的刺激作用。为防止长期服用止血环酸引起血液流变学的变化，曾对服药3个月以上的10名患者抽样检查了血液流变学，发现90 %均正常，有1例52岁男性患者血粘度偏高，无任何症状，加服丹参片每日3次，每次3片，1个月后复查血粘度转为正常。全部病例中，无1例发生血栓等不良反应。为减少不良反应的概率，我们在早期曾对86例患者作两种剂量的观察比较，结果显示剂量大小与疗效无明显相关。于是我们采用小剂量，即每日3次，每次250 mg治疗，以增加安全性。
, 百拇医药
表4 疗效与皮损类型比较
分型
例数
痊愈或基本痊愈
显效
有效
无效
总有效率(%)
斑片型
116
25
36
37
, http://www.100md.com
18
84.03
点滴型
12
0
2
6
4
66.66
χ2=5.61 P<0.025
二、实验室测试结果
1.氨基酸自动分析仪测试结果见表6、图1。
, 百拇医药
图1 止血环酸对格氨代谢影响的定量测定结果的示意图
结果显示：当止血环酸浓度增加到第5管时(含40μl)，酪氨酸消耗明显增加，表现为反应剩余的Tyr明显减少，仅为前一管的66～71%。
表5 剂量与疗效的关系
剂量(克/日)
例数
基本痊愈(%)
显效(%)
有效(%)
无效(%)
总有效率(%)
, 百拇医药
0.75
68
4(5.88)
34(50)
26(38.3)
4(5.98)
94.11
1.50
18
2(11)
7(38)
6(38.23)
3(16.6)
, 百拇医药
83.33
χ2=0.4525 P>0.05
表6 止血环酸对酪氨酸代谢影响的定量测定结果
编号
Trisml
Tyr酶
μl
止血环酸
μl
反应后Tyr测得值
μmol/ml
, 百拇医药
0
5.0
50
0
0.108
1
5.0
50
10
0.108
2
5.0
50
20
, 百拇医药
0.107
3
5.0
50
30
0.106
4
5.0
50
40
0.076
5
5.0
, 百拇医药 50
50
0.074
6
5.0
50
60
0.077
7
5.0
50
70
0.077
8
, 百拇医药
5.0
50
80
0.072
9
5.0
50
90
0.073
2.高压液相法测试结果(图2～5，表7)。
, 百拇医药 图2 酪氨酸 图3 酪氨酸加酶
图4 酪氨酸加止血环酸 图5 酪氨酸加酶加止血环酸
从图2～5及表7可以看出：①酪氨酸在酶的作用下分成3种物质(图3)；②酪氨酸加上止血环酸毫无反应(图4)；③当有酶参与时，止血环酸才能干扰反应(图5)，表现为第一种物质增加和第二种物质消失，即表7所示的峰值3在12秒处出现的物质消失了。根据数据和图谱综合分析，表现有4个特征峰：峰1：9.3秒，峰2：10.9秒，峰3：12秒，峰4：17秒。图2的峰1为酪氨酸，图4的峰4为止血环酸，峰2、峰3分别为加酶后的反应产物。从图5可知，添加止血环酸和酶后，峰2、3有了变化，不再是纯酪氨酸加酶后的反应物，可能是在止血环酸干扰下成了一种新的未知物质，它压抑了酶对酪氨酸代谢的影响(酶的催化作用被干扰)，至于此新物质为何物，有待进一步探讨。
, 百拇医药
由于止血环酸的干扰，使酪氨酸代谢的最终产物黑素蛋白减少，与临床基本符合
表7 高压液相中各种被测试物质所显示的峰值、时间及峰域
结果
图2
图3
图4
图5
峰值
1
1
2
3
, http://www.100md.com
1
2
1
2
3
时间(秒)
9.3
9.3
10.3
12
9.2
17.4
8.2
, 百拇医药 10.9
17
峰域
21560
12700
8750
3510
23200
9700
24310
7410
8360
讨 论
, http://www.100md.com
一、止血环酸干扰酪氨酸酶功能的机理探讨
早在80年代，就有学者[6]归纳了人体皮肤的黑色素代谢程序。从反应程序分析出酶的活性直接影响黑色素的多少，从酪氨酸和止血环酸的化学结构分析出两者部分结构相似，都有一个羧基(COOH)，容易产生竞争性抑制，即止血环酸替代了酪氨酸与酶结合，使酶失活，从而减少酪氨酸代谢的最终产物黑素蛋白的合成，因而有褪色作用。从临床和实验测试结果都证实了当止血环酸达一定量后，黄褐斑便开始明显消退，试管内也可见酪氨酸的消耗增加。而且必须要有酶的参与，止血环酸才有此作用，可见止血环酸是通过干扰了酶的催化功能才有褪色作用的。
二、止血环酸治疗黄褐斑的安全性] 如前所述，患者长期服用止血环酸(3个月以上)，未发现有血液流变学的明显改变，且剂量大小与疗效不成正相关及该药对色素消退作用是有可逆性的(即部分病例治疗有效后，停药数月有色素复出之可能，再服药仍然有效)；随访400余例，均未见有色素脱失的不良反应。因此，止血环酸治疗黄褐斑是相当安全的。
, 百拇医药
三、止血环酸治疗黄褐斑的疗程与疗效关系
统计发现，疗程越长显效率越高(P<0.025)，见表8。
表8 疗程与疗效的关系
疗程(月)
病例
痊愈或
基本痊愈
显效
有效
无效
总有效率
(%)
, 百拇医药
显效率
(%)
1～2
41
1
11
19
10
75.16
29.3
2～3
44
10
, 百拇医药 14
12
8
81.8
54.5
>3
43
14
13
11
5
88.4
62.8
χ2=5.61 P<0.025
, 百拇医药
此结果也佐证了袁氏的观点[7]：色素从表皮基底层产生并随着角化脱落的过程约需4周，为脱去原有色素，抑制色素细胞产生更多黑色素，治疗应在8周以上。疗程越长，显效率越高。为保持长期疗效，可采用0.25 mg/日的维持量。
四、对点滴型黄褐斑的再认识
我们曾根据皮损的形态分成斑片型和点滴型黄褐斑，且发现后者的疗效明显不如前者。其原因是这两种类型的色斑本不属同一种疾病。卫氏的观点[8]支持了这种推测。卫氏以组织病理检查结果证实，这种常表现在中年妇女颧部的针头大小青褐色斑点实为一种色痣，其表皮正常，真皮浅层胶原纤维间散布细长的梭形色素细胞，长轴与表面平行，多巴染色阳性揭示为色素细胞，而黄褐斑主要表现为表皮色素过度沉着，真皮内吞噬细胞有较多色素而无梭形色素细胞。因此有必要将所谓的点滴型黄褐斑从黄褐斑中鉴别出来，以便采取恰当的治疗方法。以上观点是否恰当，有待进一步探讨。
, 百拇医药
参考文献1Lutfi RJ,et al. Association of melasma with thyroid autoimmunity and other thyroidal abnomalitics and these relationship to the origin of meiadma. J Clin Endocrinol Metab,1985,68:2831.
2徐永,李淑萍,刘传富.止血环酸治疗黄褐斑54例.中华皮肤杂志,1992,6：404-405.
3 王光超,等.高等医学院校教材·皮肤科学.第二版.北京：人民卫生出版社,1991.182.
4徐桂香,朱明鳌,江伟英,等.两种疗法治疗黄褐斑疗效观察.中国中西结合第二届全国色素病学术交流汇编.25-26.
, 百拇医药 5张锐,空勤灶,李长平,等.中西医结合治疗黄褐斑42例疗效观察.中国中西结合第二届全国色素病学术交流汇编.26-27.
6赵辨主编.临床皮肤病学.第二版.南京：江苏科技出版社,1988.922-923.
7袁兆庄,苑勰,顾正勇,等.黄褐斑的综合美容疗法141例疗效分析.医学美容杂志,1993，1：7-9.
8卫连坤,汪治中,等.颧部褐青色痣68例.中华皮肤科杂志,1997,1：24-25.
9万苗坚,张其亮,蔡瑞康.微生态制剂治疗黄褐斑的临床研究.中华医学美容杂志,1997,3：
169-172.
(收稿：1998-02-06 修回：1998-05-11), 百拇医药
单位：200021 上海中医药大学附属曙光医院(杨希惠)；上海建工医院皮肤科(魏骏)；上海第二医科大学测试点(李文，刘海卫，庄慧娣，黄蕾)
关键词：黄褐斑；止血环酸；干扰；酪氨酸代谢
【摘要】 目的 用实验证实口服止血环酸治疗黄褐斑有效的机理是该药能干扰酪氨酸
代谢。方法 采用氨基酸自动分析法和高压液相法。结果 临床上口服止血环酸0.25 g每日3次，6～8周后皮损明显消退，总有效率82.03 %，与对照组有显著差别(P<0.05～0.001)，未见明显副反应。实验用氨基酸自动分析仪测试发现，当酪氨酸和酪氨酸酶均为等量时，止血环酸量达到或超过40 ml时，酪氨酸的消耗明显增加。高压液相证实，只有当有酪氨酸酶存在时，止血环酸才能干扰酪氨酸代谢。结论 止血环酸除具有止血功能外，还有干扰酪氨酸代谢的功能，因而有破坏黑色素产生的功能。
, 百拇医药
The clinical and experimental study on the influence of acidum tranexa
micum(AMCA) to the metabolism of tyrosine Yang Xihui, Wei Jun,Xu Ling,et,al. The Affiliated Hospital of Shanghai Traditional Chinese Medicine University 200021
【Abstract】 Objective To investigate the effective mechanism with which Melasma is treated by oral AMCA is that the drug can interfere the metabolism of tyrosinase.Methods Clinical tests and laboratory studies were used. Results In 128 cases with melasma by oral AMCA, the lesions of all patients subsided significantly after 6～8 weeks，the total effective rate is 82.03 %.There were significant differences between the treatment and control group (P<0.05～.001).No important side reaction during the treatment period. The measures with High Pressure Liquid Chrometer (HPLC)and Auto Acid Analysis System showed the cataly
, 百拇医药
tic reaction of tyrosinase to tyrosine was interfered as the concentration of strengthened.Conclusion The data indicates that AMCA has the function of interfering the metabolism of tyrosine and destroying the production of melanin.
【Key words】 Melasma Acidum tranexamicum Interference
Metabolism of tyrosine
黄褐斑是一种常见的色素沉着性皮肤病，多见于中青年妇女脸部，影响容貌。其发病机理尚未弄清楚，一般认为与遗传因素、妊娠、口服避孕药、某些慢性病、化妆品中的光敏物质及紫外线等有关[1]。传统的各种治疗方法效果均不理想，给患者带来身心障碍和痛苦。徐永等认为[2]，止血环酸治疗黄褐斑有效。我们1993～1997年用口服止血环酸加维生素C和维生素E治疗400余例，取其中治疗2个月以上随访的128例作疗效统计，进而对止血环酸的作用机理进行实验，临床观察和实验结果报告如下：
, http://www.100md.com
资料与方法
一、病例来源
本组病例均选自曙光医院美容专科门诊部，随机分组观察2个月以上，所有病例停止一切与色素代谢有关的治疗。病例中有35例(27.34 %)曾用过各种药物治疗色素2～6个月，均无效果；有20例(15.6 %)有家族史(表1)。
〖〗2〖〗28〖〗4〖〗16〖〗8〖〗2〖〗〓6〖〗〖〗12〖〗5〖〗7〖〗〖〗27〖〗3〖
〗〖〗2〖〗3〖〗9〖〗5〖〗1〖〗3〖〗7〖BG)F〗
表1 病例一般情况
组别
男性
, 百拇医药
女性
年龄(岁)
病程(年)
分型
可能加剧的诱因
18～29
30～39
40～49
≥50
<1
2～5
6～9
≥10
, 百拇医药
斑片
点滴
日晒
化妆品
月经来潮
妊娠
避孕药
妇科肿瘤
其他
治疗
5
123
16
, http://www.100md.com 70
36
6
27
48
24
29
116
12
7
20
42
20
2
, http://www.100md.com
5
32
对照
2
28
4
16
8
2
6
12
5
7
27
, http://www.100md.com
3
2
3
9
5
1
3
7
表2病情及评分情况
组别
病例
平均年龄
平均病程(年)
, http://www.100md.com 皮损平均面积cm
皮损色度
综合评分
淡褐
深褐
黑褐
轻度
中度
重度
治疗
128
37.05
6.28
, 百拇医药
37.65
25
82
21
0
64
64
对照
30
35.4
7.2
35.75
5
, 百拇医药 20
5
0
17
13
表3临床疗效分析
组别
例数
痊愈或基本痊愈
显效(%)
有效(%)
无效(%)
总有效率
, http://www.100md.com
显效率(%)
治疗
128
25(19.53)
38(29.68)
42(32.81)
23(17.8)
82.03
49.21
对照
30
0
1(3.33)
, 百拇医药
7(23.31)
22(73.33)
26.6
3.33
从表1可见：①两组均以女性为主；②年龄均以中年(30～49)为主，分别占84 %和80 %；
③病程构成相似，2年以上分别占78.9 %和80 %；④皮损分型相似，均以斑片型为主；⑤由内
分泌因素(月经、避孕药、妊娠、妇科肿瘤等)引起皮损加剧者分别占53.9 %和60 %(P>.05)。可见两组有可比性。
二、服药方法
1.治疗组：止血环酸每日3次，每次250 mg，维生素C 200 mg，维生素E 20 mg。
, 百拇医药
2.对照组：维生素C 200 mg，维生素E 20 mg，每日3次。
三、诊断标准
以王氏[3]的标准诊断，患者颜面部发生浅褐色、深褐色或黑褐色斑片，表面光滑无屑，无自觉症状，病程为慢性，年龄在18～60岁之间。
四、皮损评分标准
1.面积 1分：总面积<5 cm2；2分：总面积>5 cm2<10 cm2；3分：总面积=10 cm2。
2.色度 1分：浅褐(黄褐)色；2分：深褐色；3分：黑褐色。
3.病情 轻度：面积分+色度分≤2分；中度：>2分≤4分；重度：>4分。
, http://www.100md.com
由上表可见，两组基本病情无显著差异(P>0.05)。
五、实验室测试方法
(一)、氨基酸自动分析仪测试法
1.仪器：LKB4151型氨基酸自动分析仪(瑞典LKB公司)。
2.试剂：①酪氨酸(Tyr)，Sigma公司；②Tris液，上海西巴斯生物公司；③止血环酸，上海延安制药厂；④酪氨酸酶，Sigma公司。
3.方法：配制酪氨酸液3.93 mg/ml；Tris液6.06 mg/ml，用盐酸调到pH6.5；止血环酸液15.7 mg/ml；酪氨酸酶液15 000 Unit/ml。用10支试管分别加入5 ml Tris液、50μl Tyr液和50μl酪氨酸酶液，再分别加止血环酸液0、10、20、30、40、50、60、70、80、90 ml，混合后同放入25℃恒温水浴箱30分钟，取出后加固体磺基水杨酸终止反应，使液体pH在2～3之间，置4℃冰箱1小时以上，离心取上清液上机分析。仪器分析用缓冲系统由柠檬酸、氢氧化锂、盐酸、氯化锂配成，pH为2.80、3.0、3.45、3.55不等。显色剂为1 %茚三酮液，检测波长570 um，流速25 ml/h，温度56 ℃和81 ℃。
, 百拇医药
(二)、高压液相测试法
1.仪器：高压液相仪型号Aminosys.
2.测试条件：①技术方法：反相层析法；②标本：Aminocid 10pmol/6μl；③层析柱：Super Pac Sephasi C8 5um 4×250mm，流速125ml/min；④溶剂：A：甲酸78%100mm，pH3.3；20%醋酸锂，2%TFA。B：Acetomotrle。⑤测试时间：35分。
结 果 一、临床疗效分析
1.疗效判定标准：①痊愈或基本痊愈：皮损全部消失或基本消失，颜色呈正常或接近正常肤色，疗效指数≥95%；②显效：皮损明显缩小，颜色明显减退，疗效指数=60%；③有效：皮损缩小，颜色变淡，疗效指数20～60%；④无效：皮损无明显缩小，颜色稍淡，疗效指数<20%。
, 百拇医药
疗效指数=(疗前积分-疗后积分)/(疗前积分)×100 %
2.疗效：见表3。
表3说明，止血环酸在治疗黄褐斑中起主要作用。对照组有一定疗效，说明维生C和维生素E对色素减退有一定作用。有文献曾报告维生素C有促使黑色素转化为无色的黑素作用[4]和维生素E能对抗黑色素形成中的氧化反应[5]，其抗氧化作用可影响酪氨酸酶的活性。此外也不排除色素的自然消退。加服止血环酸后疗效显著提高，χ2=36.57，(P<0.0001)。治疗组统计表明，疗效与皮损类型有关，斑片型明显高于点滴型。
不良反应：所有病例无明显不良反应，个别病例服药早期有轻度反酸，不影响继续服药。对照组中也有个别病例有胃酸过多反应，不能排除维生素C的刺激作用。为防止长期服用止血环酸引起血液流变学的变化，曾对服药3个月以上的10名患者抽样检查了血液流变学，发现90 %均正常，有1例52岁男性患者血粘度偏高，无任何症状，加服丹参片每日3次，每次3片，1个月后复查血粘度转为正常。全部病例中，无1例发生血栓等不良反应。为减少不良反应的概率，我们在早期曾对86例患者作两种剂量的观察比较，结果显示剂量大小与疗效无明显相关。于是我们采用小剂量，即每日3次，每次250 mg治疗，以增加安全性。
, 百拇医药
表4 疗效与皮损类型比较
分型
例数
痊愈或基本痊愈
显效
有效
无效
总有效率(%)
斑片型
116
25
36
37
, http://www.100md.com
18
84.03
点滴型
12
0
2
6
4
66.66
χ2=5.61 P<0.025
二、实验室测试结果
1.氨基酸自动分析仪测试结果见表6、图1。
, 百拇医药
图1 止血环酸对格氨代谢影响的定量测定结果的示意图
结果显示：当止血环酸浓度增加到第5管时(含40μl)，酪氨酸消耗明显增加，表现为反应剩余的Tyr明显减少，仅为前一管的66～71%。
表5 剂量与疗效的关系
剂量(克/日)
例数
基本痊愈(%)
显效(%)
有效(%)
无效(%)
总有效率(%)
, 百拇医药
0.75
68
4(5.88)
34(50)
26(38.3)
4(5.98)
94.11
1.50
18
2(11)
7(38)
6(38.23)
3(16.6)
, 百拇医药
83.33
χ2=0.4525 P>0.05
表6 止血环酸对酪氨酸代谢影响的定量测定结果
编号
Trisml
Tyr酶
μl
止血环酸
μl
反应后Tyr测得值
μmol/ml
, 百拇医药
0
5.0
50
0
0.108
1
5.0
50
10
0.108
2
5.0
50
20
, 百拇医药
0.107
3
5.0
50
30
0.106
4
5.0
50
40
0.076
5
5.0
, 百拇医药 50
50
0.074
6
5.0
50
60
0.077
7
5.0
50
70
0.077
8
, 百拇医药
5.0
50
80
0.072
9
5.0
50
90
0.073
2.高压液相法测试结果(图2～5，表7)。
, 百拇医药 图2 酪氨酸 图3 酪氨酸加酶
图4 酪氨酸加止血环酸 图5 酪氨酸加酶加止血环酸
从图2～5及表7可以看出：①酪氨酸在酶的作用下分成3种物质(图3)；②酪氨酸加上止血环酸毫无反应(图4)；③当有酶参与时，止血环酸才能干扰反应(图5)，表现为第一种物质增加和第二种物质消失，即表7所示的峰值3在12秒处出现的物质消失了。根据数据和图谱综合分析，表现有4个特征峰：峰1：9.3秒，峰2：10.9秒，峰3：12秒，峰4：17秒。图2的峰1为酪氨酸，图4的峰4为止血环酸，峰2、峰3分别为加酶后的反应产物。从图5可知，添加止血环酸和酶后，峰2、3有了变化，不再是纯酪氨酸加酶后的反应物，可能是在止血环酸干扰下成了一种新的未知物质，它压抑了酶对酪氨酸代谢的影响(酶的催化作用被干扰)，至于此新物质为何物，有待进一步探讨。
, 百拇医药
由于止血环酸的干扰，使酪氨酸代谢的最终产物黑素蛋白减少，与临床基本符合
表7 高压液相中各种被测试物质所显示的峰值、时间及峰域
结果
图2
图3
图4
图5
峰值
1
1
2
3
, http://www.100md.com
1
2
1
2
3
时间(秒)
9.3
9.3
10.3
12
9.2
17.4
8.2
, 百拇医药 10.9
17
峰域
21560
12700
8750
3510
23200
9700
24310
7410
8360
讨 论
, http://www.100md.com
一、止血环酸干扰酪氨酸酶功能的机理探讨
早在80年代，就有学者[6]归纳了人体皮肤的黑色素代谢程序。从反应程序分析出酶的活性直接影响黑色素的多少，从酪氨酸和止血环酸的化学结构分析出两者部分结构相似，都有一个羧基(COOH)，容易产生竞争性抑制，即止血环酸替代了酪氨酸与酶结合，使酶失活，从而减少酪氨酸代谢的最终产物黑素蛋白的合成，因而有褪色作用。从临床和实验测试结果都证实了当止血环酸达一定量后，黄褐斑便开始明显消退，试管内也可见酪氨酸的消耗增加。而且必须要有酶的参与，止血环酸才有此作用，可见止血环酸是通过干扰了酶的催化功能才有褪色作用的。
二、止血环酸治疗黄褐斑的安全性] 如前所述，患者长期服用止血环酸(3个月以上)，未发现有血液流变学的明显改变，且剂量大小与疗效不成正相关及该药对色素消退作用是有可逆性的(即部分病例治疗有效后，停药数月有色素复出之可能，再服药仍然有效)；随访400余例，均未见有色素脱失的不良反应。因此，止血环酸治疗黄褐斑是相当安全的。
, 百拇医药
三、止血环酸治疗黄褐斑的疗程与疗效关系
统计发现，疗程越长显效率越高(P<0.025)，见表8。
表8 疗程与疗效的关系
疗程(月)
病例
痊愈或
基本痊愈
显效
有效
无效
总有效率
(%)
, 百拇医药
显效率
(%)
1～2
41
1
11
19
10
75.16
29.3
2～3
44
10
, 百拇医药 14
12
8
81.8
54.5
>3
43
14
13
11
5
88.4
62.8
χ2=5.61 P<0.025
, 百拇医药
此结果也佐证了袁氏的观点[7]：色素从表皮基底层产生并随着角化脱落的过程约需4周，为脱去原有色素，抑制色素细胞产生更多黑色素，治疗应在8周以上。疗程越长，显效率越高。为保持长期疗效，可采用0.25 mg/日的维持量。
四、对点滴型黄褐斑的再认识
我们曾根据皮损的形态分成斑片型和点滴型黄褐斑，且发现后者的疗效明显不如前者。其原因是这两种类型的色斑本不属同一种疾病。卫氏的观点[8]支持了这种推测。卫氏以组织病理检查结果证实，这种常表现在中年妇女颧部的针头大小青褐色斑点实为一种色痣，其表皮正常，真皮浅层胶原纤维间散布细长的梭形色素细胞，长轴与表面平行，多巴染色阳性揭示为色素细胞，而黄褐斑主要表现为表皮色素过度沉着，真皮内吞噬细胞有较多色素而无梭形色素细胞。因此有必要将所谓的点滴型黄褐斑从黄褐斑中鉴别出来，以便采取恰当的治疗方法。以上观点是否恰当，有待进一步探讨。
, 百拇医药
参考文献1Lutfi RJ,et al. Association of melasma with thyroid autoimmunity and other thyroidal abnomalitics and these relationship to the origin of meiadma. J Clin Endocrinol Metab,1985,68:2831.
2徐永,李淑萍,刘传富.止血环酸治疗黄褐斑54例.中华皮肤杂志,1992,6：404-405.
3 王光超,等.高等医学院校教材·皮肤科学.第二版.北京：人民卫生出版社,1991.182.
4徐桂香,朱明鳌,江伟英,等.两种疗法治疗黄褐斑疗效观察.中国中西结合第二届全国色素病学术交流汇编.25-26.
, 百拇医药 5张锐,空勤灶,李长平,等.中西医结合治疗黄褐斑42例疗效观察.中国中西结合第二届全国色素病学术交流汇编.26-27.
6赵辨主编.临床皮肤病学.第二版.南京：江苏科技出版社,1988.922-923.
7袁兆庄,苑勰,顾正勇,等.黄褐斑的综合美容疗法141例疗效分析.医学美容杂志,1993，1：7-9.
8卫连坤,汪治中,等.颧部褐青色痣68例.中华皮肤科杂志,1997,1：24-25.
9万苗坚,张其亮,蔡瑞康.微生态制剂治疗黄褐斑的临床研究.中华医学美容杂志,1997,3：
169-172.
(收稿：1998-02-06 修回：1998-05-11), 百拇医药