HPLC法测定蔓荆子黄素的含量
作者：王坤* 管玉民
单位：王 坤 管玉民山东省药品检验所(济南250012)
关键词：蔓荆子；蔓荆子黄素；HPLC；含量测定
中草药/990113 摘 要 以蔓荆子黄素为指标，用反相HPLC法测定了蔓荆子中的含量，实验采用C18柱，以甲醇-0.4%磷酸溶液(60∶40)为流动相，检测波长258 nm，用外标法测定，回收率为98.18%，RSD1.46%，线性范围0.15～0.75 μg。本法快速简便，重现性好，为蔓荆子质量控制提供了可靠的依据。
蔓荆子为单叶蔓荆Vitex trifolia L. var.simplicifolia Cham或蔓荆V.trifolia L.的干燥成熟果实，具有疏散风热，清利头目之功效〔1〕，是用于风热感冒头痛的常用药。至今为止，各版药典蔓荆子项下，均没有含量测定指标。蔓荆子黄素是蔓荆子的主要化学成分〔2〕，目前尚未见用HPLC测定蔓荆子黄素的含量报道。我们以蔓荆子黄素为指标对蔓荆子进行了含量测定，方法快速简便，重现性好，回收率为98.18%。
, 百拇医药
1 仪器与试药
SP-8800高效液相色谱仪，SP-200型紫外检测，10 μL标准定量进样环。蔓荆子黄素自提，经光谱鉴定，并经HPLC分析为单一峰，纯度为98.46%。所用试剂为色谱纯或分析纯，蔓荆子购于本地药店。
2 方法与结果
2.1 色谱条件：色谱柱4.6 mm×250 mm C18，流动相甲醇-0.4%磷酸溶液(60∶40)，检测波长258 nm，流速1.0 mL/min，进样量10 μL，柱温32℃，CS 0.25，衰减64。在此条件下蔓荆子黄素与样品中其它成分达到较好的分离。
2.2 标准曲线的制备：精密称取干燥至恒重的蔓荆子黄素对照品15 mg，置100 mL量瓶中，甲醇溶解定容，作为对照品溶液。分别精密吸取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL置10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，照上述条件测定，以蔓荆子黄素的峰面积积分值为纵坐标，蔓荆子黄素对照品的量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：C＝2.225×10-7A-4.72×10-4，r＝0.9999。峰面积值与进样量的线性范围为0.15～0.75 μg。
, 百拇医药
2.3 样品的测定：取蔓荆子(中粉，过4号筛)2 g，置索氏提取器中，加石油醚(60℃～90℃)适量，回流提取3 h，弃去石油醚液，挥干，加甲醇适量置水浴上回流提取4 h，甲醇提取液浓缩至约25 mL，定量转移至50 mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，摇匀用0.45 μm滤膜过滤，分别吸取此液和对照品溶液(30 mg/mL)进样测定。计算含量为0.075%(n＝5)，RSD＝1.63%，结果见表1。
表1 样品测定结果 序号
样品中蔓荆子黄素的含量(%)
(%)
RSD(%)
1
0.074
, 百拇医药 2
0.075
0.075
1.63
3
0.076
4
0.073
5
0.075
2.4 回收率试验：精密称取已知含量的蔓荆子粉末约1 g(含0.075%蔓荆子黄素)，加入蔓荆子黄素对照品0.75 mg，按照样品测定项下进行处理，测定，计算回收率，结果平均回收率：98.18%，RSD＝1.46%。2.5 精密度试验：在上述色谱条件下，对同一浓度的对照品溶液连续6次进样，得峰面积为1 392 487.5，RSD为0.945%。
, 百拇医药
2.6 重现性试验：按照样品测定方法，对同一批号样品进行5次平行试验，蔓荆子黄素的含量RSD为1.72%。
2.6 稳定性试验：在室温条件下，将样品溶液在1、2、3、4、12、24 h进样测定，含量不变，说明样品溶液在24 h内稳定。
3 讨论
3.1 蔓荆子含有较多的油脂，蔓荆子黄素又不溶于石油醚，因此，用石油醚脱脂后有利于提取测定，石油醚提取液进样无蔓荆子黄素。
3.2 我们曾对超声、冷浸、加热回流等提取方法进行比较，结果，以索氏提取器加热回流提取测得的蔓荆子黄素含量最高。
*Address:Wang Kun,Shandong Provincial Institute for Drug Control ,Jinan
参 考 文 献
[1] 中华人民共和国药典(一部).1995：322
[2] Goma C S, et al. Planta Med,1978，33(3):277
(1998-03-03 收稿), 百拇医药(王坤* 管玉民)
单位：王 坤 管玉民山东省药品检验所(济南250012)
关键词：蔓荆子；蔓荆子黄素；HPLC；含量测定
中草药/990113 摘 要 以蔓荆子黄素为指标，用反相HPLC法测定了蔓荆子中的含量，实验采用C18柱，以甲醇-0.4%磷酸溶液(60∶40)为流动相，检测波长258 nm，用外标法测定，回收率为98.18%，RSD1.46%，线性范围0.15～0.75 μg。本法快速简便，重现性好，为蔓荆子质量控制提供了可靠的依据。
蔓荆子为单叶蔓荆Vitex trifolia L. var.simplicifolia Cham或蔓荆V.trifolia L.的干燥成熟果实，具有疏散风热，清利头目之功效〔1〕，是用于风热感冒头痛的常用药。至今为止，各版药典蔓荆子项下，均没有含量测定指标。蔓荆子黄素是蔓荆子的主要化学成分〔2〕，目前尚未见用HPLC测定蔓荆子黄素的含量报道。我们以蔓荆子黄素为指标对蔓荆子进行了含量测定，方法快速简便，重现性好，回收率为98.18%。
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1 仪器与试药
SP-8800高效液相色谱仪，SP-200型紫外检测，10 μL标准定量进样环。蔓荆子黄素自提，经光谱鉴定，并经HPLC分析为单一峰，纯度为98.46%。所用试剂为色谱纯或分析纯，蔓荆子购于本地药店。
2 方法与结果
2.1 色谱条件：色谱柱4.6 mm×250 mm C18，流动相甲醇-0.4%磷酸溶液(60∶40)，检测波长258 nm，流速1.0 mL/min，进样量10 μL，柱温32℃，CS 0.25，衰减64。在此条件下蔓荆子黄素与样品中其它成分达到较好的分离。
2.2 标准曲线的制备：精密称取干燥至恒重的蔓荆子黄素对照品15 mg，置100 mL量瓶中，甲醇溶解定容，作为对照品溶液。分别精密吸取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL置10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，照上述条件测定，以蔓荆子黄素的峰面积积分值为纵坐标，蔓荆子黄素对照品的量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：C＝2.225×10-7A-4.72×10-4，r＝0.9999。峰面积值与进样量的线性范围为0.15～0.75 μg。
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2.3 样品的测定：取蔓荆子(中粉，过4号筛)2 g，置索氏提取器中，加石油醚(60℃～90℃)适量，回流提取3 h，弃去石油醚液，挥干，加甲醇适量置水浴上回流提取4 h，甲醇提取液浓缩至约25 mL，定量转移至50 mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，摇匀用0.45 μm滤膜过滤，分别吸取此液和对照品溶液(30 mg/mL)进样测定。计算含量为0.075%(n＝5)，RSD＝1.63%，结果见表1。
表1 样品测定结果 序号
样品中蔓荆子黄素的含量(%)
(%)RSD(%)
1
0.074
, 百拇医药 2
0.075
0.075
1.63
3
0.076
4
0.073
5
0.075
2.4 回收率试验：精密称取已知含量的蔓荆子粉末约1 g(含0.075%蔓荆子黄素)，加入蔓荆子黄素对照品0.75 mg，按照样品测定项下进行处理，测定，计算回收率，结果平均回收率：98.18%，RSD＝1.46%。2.5 精密度试验：在上述色谱条件下，对同一浓度的对照品溶液连续6次进样，得峰面积
为1 392 487.5，RSD为0.945%。, 百拇医药
2.6 重现性试验：按照样品测定方法，对同一批号样品进行5次平行试验，蔓荆子黄素的含量RSD为1.72%。
2.6 稳定性试验：在室温条件下，将样品溶液在1、2、3、4、12、24 h进样测定，含量不变，说明样品溶液在24 h内稳定。
3 讨论
3.1 蔓荆子含有较多的油脂，蔓荆子黄素又不溶于石油醚，因此，用石油醚脱脂后有利于提取测定，石油醚提取液进样无蔓荆子黄素。
3.2 我们曾对超声、冷浸、加热回流等提取方法进行比较，结果，以索氏提取器加热回流提取测得的蔓荆子黄素含量最高。
*Address:Wang Kun,Shandong Provincial Institute for Drug Control ,Jinan
参 考 文 献
[1] 中华人民共和国药典(一部).1995：322
[2] Goma C S, et al. Planta Med,1978，33(3):277
(1998-03-03 收稿), 百拇医药(王坤* 管玉民)
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