1例α2-HS-糖蛋白变异型的报导
作者：张 颖 丁 梅 李春梅
单位：中国医科大学法医学系，沈阳110001
关键词：
1例α2 α2-HS-糖蛋白(α2-HS-glycoprotein,简称AHSG)，是存在于正常人血清中的一种电泳迁移率为α2，具有高度遗传多态性的糖蛋白。1979年Anderson等应用双向电泳的方法首先发现了AHSG的遗传多态性，1983年Cox等将等电聚焦技术成功地应用于AHSG分型[1，2]。到目前为止，在已调查过的群体中，AHSG均具有遗传多态性，三种常表现型(AHSG 1型、AHSG 2型和AHSG 2-1型)分别由一对共显性等位基因AHSG*1和AHSG*2所编码。此外，在对AHSG型进行深入研究的过程中，有20余种AHSG变异型相继被发现[3]，但国内尚无有关AHSG变异型的报道。本文报道了在辽宁汉族人群AHSG型频率分布调查中发现的一种AHSG变异型及其家系调查的结果。
, 百拇医药
材料和方法
血样来源：常规静脉采集经聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦结合免疫印迹方法检测确定为AHSG变异型的个体及其家庭成员(3代共9人)的血液，室温静置2h，分离血清。
血清处理：血清加4倍量的神经氨酸酶溶液处理(1μ1 /ml Sigma,type v,0.1mol/L醋酸缓冲液 PH5.0)混匀，室温放置过夜备检。
检测方法：制备总浓度为4%，交联度为3%，两性电解质浓度为2.5%(PH 5-6：PH 4.5-5.4＝4：1)，且含有11.5%尿素(V/V)的聚丙烯酰胺凝胶。阳极电极液为1mol/L H3PO4，阴极电极液为1 mol/L NaOH。样品加于距阴极1.5cm胶面上，最大电压2500V，最大功率3W，10℃条件下聚焦3h。电泳结束后用免疫印迹方法显谱，一次抗体为兔抗人AHSG血清，二次抗体为碱性磷酸酶标记猪抗兔Ig血清。酶免疫分析全过程在室温下进行。
, 百拇医药
结果和讨论
本文作者应用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦结合免疫印迹的方法调查辽宁汉族人群AHSG型频率分布时，检出了一例AHSG变异型，经与已知标准参考血清电泳谱型比较，确定该变异型为AHSG*2和一罕见基因的杂合产物，其等电聚焦谱型特点是：该变异型由两条谱带组成，其中之一与AHSG 2型谱带的泳动位置相同，另一条谱带则较AHSG 1型谱带更靠近阳极侧(图1)。本研究对中国首次发现的AHSG变异型个体进行了家系调查，其检验结果如图2所示。在被调查的3代9名成员中，其次女血清中检出了与该变异型个体相同的罕见基因，证明该基因具遗传性，符合孟德尔遗传。
V-2 V-2 2 2-1 1
, 百拇医药
图1 AHSG的PAGIEF谱型
图2 AHSG型变异型的家系调查
AHSG是一种急性时相负反应物，由肝脏合成后贮存于骨组织中。AHSG的生物学功能至今尚不完全明了，但根据胎儿和新生儿骨中AHSG含量明显高于成人，故认为AHSG与骨骼形成，胚胎与婴儿发育有关。本研究报道的2名携带AHSG变异型基因的个体发育正常，身体健康，故推测此结果与他们均为常见等位基因同变异基因的杂合体有关。导致该变异型产生的分子学基础尚不清楚，有待于进一步研究加以阐明。
参考文献
1.Anderson N L, Anderson. NG. Bilchem Biophys Res Commun,1979,88:256～265
2.Cox D W. Andrews B J. Electrophoresis. Berlin:Walter de Gruyter 243～247
3.Yuasa I,Umetsu X.Electrophoresis.1988,9:404～410
(收稿：1999-01-12), 百拇医药
单位：中国医科大学法医学系，沈阳110001
关键词：
1例α2 α2-HS-糖蛋白(α2-HS-glycoprotein,简称AHSG)，是存在于正常人血清中的一种电泳迁移率为α2，具有高度遗传多态性的糖蛋白。1979年Anderson等应用双向电泳的方法首先发现了AHSG的遗传多态性，1983年Cox等将等电聚焦技术成功地应用于AHSG分型[1，2]。到目前为止，在已调查过的群体中，AHSG均具有遗传多态性，三种常表现型(AHSG 1型、AHSG 2型和AHSG 2-1型)分别由一对共显性等位基因AHSG*1和AHSG*2所编码。此外，在对AHSG型进行深入研究的过程中，有20余种AHSG变异型相继被发现[3]，但国内尚无有关AHSG变异型的报道。本文报道了在辽宁汉族人群AHSG型频率分布调查中发现的一种AHSG变异型及其家系调查的结果。
, 百拇医药
材料和方法
血样来源：常规静脉采集经聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦结合免疫印迹方法检测确定为AHSG变异型的个体及其家庭成员(3代共9人)的血液，室温静置2h，分离血清。
血清处理：血清加4倍量的神经氨酸酶溶液处理(1μ1 /ml Sigma,type v,0.1mol/L醋酸缓冲液 PH5.0)混匀，室温放置过夜备检。
检测方法：制备总浓度为4%，交联度为3%，两性电解质浓度为2.5%(PH 5-6：PH 4.5-5.4＝4：1)，且含有11.5%尿素(V/V)的聚丙烯酰胺凝胶。阳极电极液为1mol/L H3PO4，阴极电极液为1 mol/L NaOH。样品加于距阴极1.5cm胶面上，最大电压2500V，最大功率3W，10℃条件下聚焦3h。电泳结束后用免疫印迹方法显谱，一次抗体为兔抗人AHSG血清，二次抗体为碱性磷酸酶标记猪抗兔Ig血清。酶免疫分析全过程在室温下进行。
, 百拇医药
结果和讨论
本文作者应用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦结合免疫印迹的方法调查辽宁汉族人群AHSG型频率分布时，检出了一例AHSG变异型，经与已知标准参考血清电泳谱型比较，确定该变异型为AHSG*2和一罕见基因的杂合产物，其等电聚焦谱型特点是：该变异型由两条谱带组成，其中之一与AHSG 2型谱带的泳动位置相同，另一条谱带则较AHSG 1型谱带更靠近阳极侧(图1)。本研究对中国首次发现的AHSG变异型个体进行了家系调查，其检验结果如图2所示。在被调查的3代9名成员中，其次女血清中检出了与该变异型个体相同的罕见基因，证明该基因具遗传性，符合孟德尔遗传。
V-2 V-2 2 2-1 1
, 百拇医药
图1 AHSG的PAGIEF谱型
图2 AHSG型变异型的家系调查
AHSG是一种急性时相负反应物，由肝脏合成后贮存于骨组织中。AHSG的生物学功能至今尚不完全明了，但根据胎儿和新生儿骨中AHSG含量明显高于成人，故认为AHSG与骨骼形成，胚胎与婴儿发育有关。本研究报道的2名携带AHSG变异型基因的个体发育正常，身体健康，故推测此结果与他们均为常见等位基因同变异基因的杂合体有关。导致该变异型产生的分子学基础尚不清楚，有待于进一步研究加以阐明。
参考文献
1.Anderson N L, Anderson. NG. Bilchem Biophys Res Commun,1979,88:256～265
2.Cox D W. Andrews B J. Electrophoresis. Berlin:Walter de Gruyter 243～247
3.Yuasa I,Umetsu X.Electrophoresis.1988,9:404～410
(收稿：1999-01-12), 百拇医药