复方三姐妹片护肝作用研究
作者：王勤 李淑平 李爱媛 谢沛珊 张杰 尹雪曼 赵一
单位：王 勤 李淑平 李爱媛 谢沛珊 张 杰 尹雪曼 赵 一广西中医学院；530001 南宁市明秀东路21号
关键词：复方三姐妹片；护肝作用；药理实验
990127 复方三姐妹片是由三姐妹(Rabdosia ternifold)和黄根(Primafomeris terandra) 等中草药组成的中药制剂，对肝炎有较好的临床疗效，可降低CCl4肝损伤小鼠血 清谷丙转氨酶(ALT) 的活力，增强免疫功能，而且毒性低〔1～4〕。为了进一步探讨该药的护肝作用而设 计本实验，现将实验研究结果报告如下。
1 实验材料
复方三姐妹片由广西中医学院制药厂提供，每片含生药4g，批号900204；实验时将药片研粉 (过80目筛)，加水配成混悬液备用。联苯双酯片由无锡市第四制药厂出品，每片含联苯双 酯25mg，批号890501.其他试剂均为市售化学纯或分析纯化学试剂。
, 百拇医药
昆明种小白鼠，体重18～22g，雌雄兼用，由广西中医学院实验动物中心提供。
2 实验方法和结果
2.1 对硫代乙酰胺(TAA)肝损伤小鼠的影响〔5〕取小鼠83只随机分6组，连续灌胃给药或水5天，每天2次。末次给药后1h，除正常对照 组外，其余5组小鼠均腹腔注射TAA100mg/kg 1次，禁食16h后拔眼取血测血清ALT活力，数据作t检验，结果见表1.
表1 对TAA肝损伤小鼠的影响 (
±s) 组 别
剂量
(片.千克-1)
, 百拇医药
n
血清ALT活力
(U.100ml-1)
正常对照组
9
141±75
肝损伤对照组
16
950±163
复方三姐妹片1组
9
16
, http://www.100md.com
895±203
复方三姐妹片2组
18
16
751±339①
复方三姐妹片3组
36
16
449±272①
联苯双酯组
24
10
, http://www.100md.com
542±202②
t检验，与肝损伤对照组比较，①P<0.05，②P<0.01；下同 结果表明：复方三姐妹片可降低TAA肝损伤小鼠血清ALT，与肝损伤对照组比较有显著差异(P<0.05)，而且降酶作用随给药剂量增大而增强。
2.2 对CCl4肝损伤小鼠肝脏组织学的影响〔5〕取小鼠18只随机分2组，每组9只，连续灌胃给药或水5天，每天2次。末次药后1h各 鼠均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10ml/kg 1次， 禁食16h，取肝脏作组织学检查。实验结果表明，复方三姐妹片连续给药5天，每天给药剂量 36片/千克，可明显改善CCl4所致肝损伤小鼠的肝组织图像，有减轻CCl4诱发肝细胞病 理损伤的作用。
2.3 对CCl4肝损伤小鼠死亡率的影响 取小鼠20只 随机分2组，每组10只。给药组连续 灌胃复方三姐妹片(18片/千克)28天，每天1次。对照组给予等体积水。给药的第1，7，14 ，21和28天下午各鼠均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10ml/kg各1次，共注射5次。结果 ：对照组10只小鼠全部死亡，死亡率100%;给药组仅死亡2只，死亡率20%.解剖对照组小鼠 ，观察可见肝脏缩小硬化，腹水白色浑浊，量较多；而给药组末次药后48h将小鼠全部处死 解剖，观察可见肝脏病变程度轻，腹水较少。
, 百拇医药
2.4 对体外温孵血清ALT活力的影响 取小鼠20只随机 分2组，每组10只。给药组连续灌胃 复方三姐妹片(30片/千克)5天，对照组给等体积水。于实验第5天下午另取20只小鼠腹腔注 射0.1% CCl4花生油10ml/kg 1次。各鼠均禁食16h，于第6天上午取血分离出血清。对照组和给药 组小鼠各取0.1ml血清与注射CCl4组小鼠血清0.1ml混合，37℃水浴保温60min后测血清A LT活力(U/100ml)。结果：对照组870±182，给药组939±114，两组比较无显著性差异(P >0.05)。提示复方三姐妹片对体外温孵血清ALT活力无明显影响。
2.5 对正常小鼠血清ALT活力的影响 取小鼠18只随机 分2组，每组9只，给药方法和剂量同“2.2”项下。血清ALT活力测定结果(U/100ml)：对照 组83±25，给药组93±43，两组比较 无显著性差异(P>0.05)。提示复方三姐妹片对正常小鼠血清ALT活力无明显影响。
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2.6 对肝糖原生成的影响 取小鼠30只随机分3组。连 续灌胃给药或水4天，每天2次。第4 天下午药后禁食18h，第5天上午给药或水1次，药后1h各鼠腹腔注射10%葡萄糖20ml/kg,注 射后2h参照蒽酮法〔6〕测各鼠肝糖原含量。数据进行t检验，结果见表2.
表2 对小鼠肝糖原生成的影响 (±s) 组 别
剂量
(片.千克-1)
n
肝糖原
(g.100g -1肝)
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对照组
10
2.70±0.52
复方三姐妹片Ⅰ组
18
10
2.94±0.28
复方三姐妹片Ⅱ组
36
10
4.00±0.06②
结果表明：复方三姐妹片(36片/千克)有促进肝糖原生成的作用，与对照组比较，差异 非常显著(P<0.01)。
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3 讨 论
实验结果表明复方三姐妹片有较好的护肝作用，每天给药剂量为18片/千克(相当于成年人每 天服药12片的90倍)即有明显降酶，减少CCl4肝损伤动物死亡率等作用；剂量增大到36片/ 千克时还可减轻CCl4对肝细胞的病理损伤，促进肝糖原的生成，而且降酶作用与联苯双酯 24片/千克(相当于成年人每天服药6片的240倍)相当。所以复方三姐妹片用于防治急、慢性 肝炎是合理的。
实验结果还表明复方三姐妹片对正常小鼠和体外温孵血清ALT活力均无明显影响，提示复方 三姐妹片的降酶作用并非是直接抑制血清ALT活力的结果，而是通过护肝而起作用。其护肝 作用机制还有待深入研究。
参考文献
1 李淑平，周培郁.复方三姐妹治疗慢性乙型肝炎及乙肝病毒携带者病原免疫学 指标初步分析.广西中医药，1990，13(5)：1.
, 百拇医药
2 叶琦莉.复方三姐妹片对免疫功能、流感病毒及细菌的影响.广西中医药，1992 ，15(4)：39.
3 李淑平，周培郁，王 勤，等.复方三姐妹片治疗慢性乙型肝炎及其携带者的临 床疗效及实验研究.中国中西医结合杂志，1994，14(增刊)：34.
4 周培郁，梁文旺.复方三姐妹片治疗慢性乙型肝炎远期疗效观察.广西中医药， 1998，21(5)：6.
5 陈奇主编.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993.837～841.[ ZK)〗
6 贵阳医学院.生物化学实验.贵阳：贵州人民出版社，1988.144.
(1998-06-05收稿), http://www.100md.com
单位：王 勤 李淑平 李爱媛 谢沛珊 张 杰 尹雪曼 赵 一广西中医学院；530001 南宁市明秀东路21号
关键词：复方三姐妹片；护肝作用；药理实验
990127 复方三姐妹片是由三姐妹(Rabdosia ternifold)和黄根(Primafomeris terandra) 等中草药组成的中药制剂，对肝炎有较好的临床疗效，可降低CCl4肝损伤小鼠血 清谷丙转氨酶(ALT) 的活力，增强免疫功能，而且毒性低〔1～4〕。为了进一步探讨该药的护肝作用而设 计本实验，现将实验研究结果报告如下。
1 实验材料
复方三姐妹片由广西中医学院制药厂提供，每片含生药4g，批号900204；实验时将药片研粉 (过80目筛)，加水配成混悬液备用。联苯双酯片由无锡市第四制药厂出品，每片含联苯双 酯25mg，批号890501.其他试剂均为市售化学纯或分析纯化学试剂。
, 百拇医药
昆明种小白鼠，体重18～22g，雌雄兼用，由广西中医学院实验动物中心提供。
2 实验方法和结果
2.1 对硫代乙酰胺(TAA)肝损伤小鼠的影响〔5〕取小鼠83只随机分6组，连续灌胃给药或水5天，每天2次。末次给药后1h，除正常对照 组外，其余5组小鼠均腹腔注射TAA100mg/kg 1次，禁食16h后拔眼取血测血清ALT活力，数据作t检验，结果见表1.
表1 对TAA肝损伤小鼠的影响 (
±s) 组 别剂量
(片.千克-1)
, 百拇医药
n
血清ALT活力
(U.100ml-1)
正常对照组
9
141±75
肝损伤对照组
16
950±163
复方三姐妹片1组
9
16
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895±203
复方三姐妹片2组
18
16
751±339①
复方三姐妹片3组
36
16
449±272①
联苯双酯组
24
10
, http://www.100md.com
542±202②
t检验，与肝损伤对照组比较，①P<0.05，②P<0.01；下同 结果表明：复方三姐妹片可降低TAA肝损伤小鼠血清ALT，与肝损伤对照组比较有显著差异(P<0.05)，而且降酶作用随给药剂量增大而增强。
2.2 对CCl4肝损伤小鼠肝脏组织学的影响〔5〕取小鼠18只随机分2组，每组9只，连续灌胃给药或水5天，每天2次。末次药后1h各 鼠均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10ml/kg 1次， 禁食16h，取肝脏作组织学检查。实验结果表明，复方三姐妹片连续给药5天，每天给药剂量 36片/千克，可明显改善CCl4所致肝损伤小鼠的肝组织图像，有减轻CCl4诱发肝细胞病 理损伤的作用。
2.3 对CCl4肝损伤小鼠死亡率的影响 取小鼠20只 随机分2组，每组10只。给药组连续 灌胃复方三姐妹片(18片/千克)28天，每天1次。对照组给予等体积水。给药的第1，7，14 ，21和28天下午各鼠均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10ml/kg各1次，共注射5次。结果 ：对照组10只小鼠全部死亡，死亡率100%;给药组仅死亡2只，死亡率20%.解剖对照组小鼠 ，观察可见肝脏缩小硬化，腹水白色浑浊，量较多；而给药组末次药后48h将小鼠全部处死 解剖，观察可见肝脏病变程度轻，腹水较少。
, 百拇医药
2.4 对体外温孵血清ALT活力的影响 取小鼠20只随机 分2组，每组10只。给药组连续灌胃 复方三姐妹片(30片/千克)5天，对照组给等体积水。于实验第5天下午另取20只小鼠腹腔注 射0.1% CCl4花生油10ml/kg 1次。各鼠均禁食16h，于第6天上午取血分离出血清。对照组和给药 组小鼠各取0.1ml血清与注射CCl4组小鼠血清0.1ml混合，37℃水浴保温60min后测血清A LT活力(U/100ml)。结果：对照组870±182，给药组939±114，两组比较无显著性差异(P >0.05)。提示复方三姐妹片对体外温孵血清ALT活力无明显影响。
2.5 对正常小鼠血清ALT活力的影响 取小鼠18只随机 分2组，每组9只，给药方法和剂量同“2.2”项下。血清ALT活力测定结果(U/100ml)：对照 组83±25，给药组93±43，两组比较 无显著性差异(P>0.05)。提示复方三姐妹片对正常小鼠血清ALT活力无明显影响。
, http://www.100md.com
2.6 对肝糖原生成的影响 取小鼠30只随机分3组。连 续灌胃给药或水4天，每天2次。第4 天下午药后禁食18h，第5天上午给药或水1次，药后1h各鼠腹腔注射10%葡萄糖20ml/kg,注 射后2h参照蒽酮法〔6〕测各鼠肝糖原含量。数据进行t检验，结果见表2.
表2 对小鼠肝糖原生成的影响 (
±s) 组 别剂量
(片.千克-1)
n
肝糖原
(g.100g -1肝)
, http://www.100md.com
对照组
10
2.70±0.52
复方三姐妹片Ⅰ组
18
10
2.94±0.28
复方三姐妹片Ⅱ组
36
10
4.00±0.06②
结果表明：复方三姐妹片(36片/千克)有促进肝糖原生成的作用，与对照组比较，差异 非常显著(P<0.01)。
, http://www.100md.com
3 讨 论
实验结果表明复方三姐妹片有较好的护肝作用，每天给药剂量为18片/千克(相当于成年人每 天服药12片的90倍)即有明显降酶，减少CCl4肝损伤动物死亡率等作用；剂量增大到36片/ 千克时还可减轻CCl4对肝细胞的病理损伤，促进肝糖原的生成，而且降酶作用与联苯双酯 24片/千克(相当于成年人每天服药6片的240倍)相当。所以复方三姐妹片用于防治急、慢性 肝炎是合理的。
实验结果还表明复方三姐妹片对正常小鼠和体外温孵血清ALT活力均无明显影响，提示复方 三姐妹片的降酶作用并非是直接抑制血清ALT活力的结果，而是通过护肝而起作用。其护肝 作用机制还有待深入研究。
参考文献
1 李淑平，周培郁.复方三姐妹治疗慢性乙型肝炎及乙肝病毒携带者病原免疫学 指标初步分析.广西中医药，1990，13(5)：1.
, 百拇医药
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3 李淑平，周培郁，王 勤，等.复方三姐妹片治疗慢性乙型肝炎及其携带者的临 床疗效及实验研究.中国中西医结合杂志，1994，14(增刊)：34.
4 周培郁，梁文旺.复方三姐妹片治疗慢性乙型肝炎远期疗效观察.广西中医药， 1998，21(5)：6.
5 陈奇主编.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993.837～841.[ ZK)〗
6 贵阳医学院.生物化学实验.贵阳：贵州人民出版社，1988.144.
(1998-06-05收稿), http://www.100md.com