心包积液患者的肠道病毒病原检测
作者：谢若男 向晓光
单位：515031 广东汕头大学医学院第二附属医院
关键词：
中华传染病杂志990412 肠道病毒(EV)中的柯萨奇病毒(COXB)和埃可病毒(ECHO)的某些型可引起心脏疾病[1-3]。为了解汕头市心包积液患者的EV感染状况，收集了临床诊断为心包积液的病例，进行了EV的病原学和血清学检测，现报告如下。
材料与方法
一、病例来源
病例选自汕大医学院第一、二附属医院、汕头市中心医院和汕头市第二人民医院，1994年2月～1998年3月收治的患者。临床诊断为心包积液22例，心包炎14例，共36例，男16例，女20例；年龄9个月～14岁6例，15～65岁30例。对照组病毒分离20例，为本院同期住院结核性脑膜炎和癫痫病患者各10例；血清对照组80份血清系在本院健康体检者，年龄30～72岁。
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二、标准免疫血清、毒株及细胞株来源
EV组合血清A～H、COXB 1～6型血清及毒株、Hep-2细胞株，分别由中国医学科学院医学生物学研究所、广州市儿童医院、广东省卫生防疫站提供。
三、病毒分离与鉴定
按常规[1]采集患者的心包积液或血液标本，接种于Hep-2细胞盲传二代，出现细胞病变者，用标准免疫血清作中和试验鉴定病毒类型。
四、血清学检测
采集患者双份血清(急性期及恢复期)5例，单份血清16例，用患者自身分离的病毒株或用COXB 1～6型为抗原，按微量塑料板法进行中和抗体检测。结果判定：双份血清中和抗体滴度≥1∶80为阳性。正常人血清≥1∶10为阳性。
, 百拇医药 结果
一、病毒分离和鉴定
36例患者中26例做了病毒分离，分离出病毒5株，病毒分离阳性率为19.2%，从心包液10份分离出1株(10.0%)，从血液16份分离出4株(25.0%),计有COXB 5型4株和ECHO 7型1株。对照组20例的血液标本中未分离出病毒。
二、血清学检测
36例患者21例做了血清学检测，阳性10例(43.8%)，其中双份血清5例，中和抗体滴度≥4倍增高3例，计有COXB1型1例(S1 1∶20/S2 1∶320)及B5型2例，其中1例系从心包液中分离出病毒并有自身病毒抗体4倍增高(S1<1∶20/S2 1∶40；另1例S1 1∶10/S2 1∶160)。16例采集到单份血清阳性7例，计有COXB 1、2、5型各2例和4型1例。以上病毒分离和/或血清学阳性共14例，患者感染的病毒型分布见表1。
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表1 36例患者病毒感染检测结果 项 目
例数
阳性数
COXB
ECHO
1
2
4
5
7
病毒分离
26
5(19.2)
, 百拇医药
4
1
双份血清
5
3(60.0)
1
2*
单份血清
16
7(43.8)
2
2
1
, 百拇医药
2
* 其中1例系自身从心包液分离出病毒的抗体>4倍增长。
三、正常人与患者血清中和抗体几何平均滴度(GMT)比较
21例患者血清和80份正常人血清检测COXB 1～6型中和抗体GMT结果见表2。
表2 正常对照组与患者血清中和抗体GMT比较 病毒型
80份正常人抗体滴度(1∶)
21例患者抗体滴度(1∶)
t
P值
10
, 百拇医药
20
40
80
GMT
10
20
40
80
160
320
GMT
COXB1
3
, 百拇医药 1
0
0
5.37
3
2
1
2
0
1
104.3
21.185
<0.01
COXB2
, 百拇医药
2
0
0
0
5.09
2
1
1
1
1
0
8.48
1.769
>0.05
, 百拇医药
COXB3
3
0
1
0
5.27
2
3
0
0
0
0
6.51
2.008
, 百拇医药
>0.05
COXB4
2
0
1
0
5.23
1
2
1
1
0
0
7.41
, 百拇医药
2.283
>0.05
COXB5
24
2
2
0
6.83
2
1
2
1
1
1
, 百拇医药
105.7
19.279
<0.01
COXB6
5
0
0
0
5.23
2
2
0
0
, 百拇医药 0
0
6.10
1.894
>0.05
t 0.01(100)=2.626
可见正常人COXB1～6型抗体滴度均≤1∶40，GMT在5.09～6.83之间，阳性率在2.5%～35%之间。21例患者抗体滴度≥1∶80 9例，GMT在5.97～105.3之间，两组GMT比较，经t检验结果，其中COXB1、5型2个型差异有显著性(P<0.01)。
讨论
我们从26例心包积液的患者中分离出5株病毒，其中1例从心包积液中分离出COXB 5型病毒，并有双份血清自身病毒抗体4倍增高，参照1973年Lener等[4]提出的病毒性心肌炎的相关标准，属中度相关。另4例病毒分离阳性而未做血清学检查，但患者系从血液中分离出病毒的(COXB 5型3例和ECHO 7型1例)表明患者有病毒血症，具有病原学意义，属低度相关。
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COXB 1～6型抗体检测结果，正常人80份各型的抗体滴度均<1∶80，在1∶10～1∶40之间，据此，我们将本组患者单份血清阳性标准定为≤1∶80。21例患者抗体滴度≥1∶80者9例，占病例数的25%。两组抗体GMT比较其中COXB 1、5两个型的差异有显著性(P<0.010)。综合以上结果本组心包积液病原为COXB组病毒以5型、1型多见。2型、4型和ECHO 7型病毒感染对患者发病可能有关。由于我们所做的病例尚少，仍待进一步观察。值得提出的是正常人COXB 1～6型都有不同程度的抗体滴度，表明本地区人群中存在隐性感染，尤其是1、5型抗体比较高，说明该2个型病毒的人群中传播较广。我们曾对病毒性心肌炎的病因研究[5]，证实COXB 1、5型是主要病原之一，因此值得临床和科研工作者的重视。
参考文献
1 黄祯祥主编.医学病毒学基础及临床实验技术.北京：科学出版社，1990.782-807.
, http://www.100md.com
2 Sun G, Zbang T, Harn Y, et al. Murine myocordial cell infection induced by Coxsackie Virus B3 Rome: Serono Symposis, Raren Press,1990,59:97-99.
3 胡开华，黄开琼，邱练芬.成都地区病毒性心肌炎的病毒病因研究.中华实验和临床病毒杂志，1996，10：74-76.
4 Lermer AM， Wilson FM. Virus myocardiopathy, Prog Med Virol,1973,15:273-275.
5 谢若男，叶坤照，许永绥，等.汕头市病毒性心肌炎的病毒病因研究.中华实验和临床病毒学杂志，1994，8：379-380.
(收稿：1999-01-04 修回：1999-06-15), 百拇医药
单位：515031 广东汕头大学医学院第二附属医院
关键词：
中华传染病杂志990412 肠道病毒(EV)中的柯萨奇病毒(COXB)和埃可病毒(ECHO)的某些型可引起心脏疾病[1-3]。为了解汕头市心包积液患者的EV感染状况，收集了临床诊断为心包积液的病例，进行了EV的病原学和血清学检测，现报告如下。
材料与方法
一、病例来源
病例选自汕大医学院第一、二附属医院、汕头市中心医院和汕头市第二人民医院，1994年2月～1998年3月收治的患者。临床诊断为心包积液22例，心包炎14例，共36例，男16例，女20例；年龄9个月～14岁6例，15～65岁30例。对照组病毒分离20例，为本院同期住院结核性脑膜炎和癫痫病患者各10例；血清对照组80份血清系在本院健康体检者，年龄30～72岁。
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二、标准免疫血清、毒株及细胞株来源
EV组合血清A～H、COXB 1～6型血清及毒株、Hep-2细胞株，分别由中国医学科学院医学生物学研究所、广州市儿童医院、广东省卫生防疫站提供。
三、病毒分离与鉴定
按常规[1]采集患者的心包积液或血液标本，接种于Hep-2细胞盲传二代，出现细胞病变者，用标准免疫血清作中和试验鉴定病毒类型。
四、血清学检测
采集患者双份血清(急性期及恢复期)5例，单份血清16例，用患者自身分离的病毒株或用COXB 1～6型为抗原，按微量塑料板法进行中和抗体检测。结果判定：双份血清中和抗体滴度≥1∶80为阳性。正常人血清≥1∶10为阳性。
, 百拇医药 结果
一、病毒分离和鉴定
36例患者中26例做了病毒分离，分离出病毒5株，病毒分离阳性率为19.2%，从心包液10份分离出1株(10.0%)，从血液16份分离出4株(25.0%),计有COXB 5型4株和ECHO 7型1株。对照组20例的血液标本中未分离出病毒。
二、血清学检测
36例患者21例做了血清学检测，阳性10例(43.8%)，其中双份血清5例，中和抗体滴度≥4倍增高3例，计有COXB1型1例(S1 1∶20/S2 1∶320)及B5型2例，其中1例系从心包液中分离出病毒并有自身病毒抗体4倍增高(S1<1∶20/S2 1∶40；另1例S1 1∶10/S2 1∶160)。16例采集到单份血清阳性7例，计有COXB 1、2、5型各2例和4型1例。以上病毒分离和/或血清学阳性共14例，患者感染的病毒型分布见表1。
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表1 36例患者病毒感染检测结果 项 目
例数
阳性数
COXB
ECHO
1
2
4
5
7
病毒分离
26
5(19.2)
, 百拇医药
4
1
双份血清
5
3(60.0)
1
2*
单份血清
16
7(43.8)
2
2
1
, 百拇医药
2
* 其中1例系自身从心包液分离出病毒的抗体>4倍增长。
三、正常人与患者血清中和抗体几何平均滴度(GMT)比较
21例患者血清和80份正常人血清检测COXB 1～6型中和抗体GMT结果见表2。
表2 正常对照组与患者血清中和抗体GMT比较 病毒型
80份正常人抗体滴度(1∶)
21例患者抗体滴度(1∶)
t
P值
10
, 百拇医药
20
40
80
GMT
10
20
40
80
160
320
GMT
COXB1
3
, 百拇医药 1
0
0
5.37
3
2
1
2
0
1
104.3
21.185
<0.01
COXB2
, 百拇医药
2
0
0
0
5.09
2
1
1
1
1
0
8.48
1.769
>0.05
, 百拇医药
COXB3
3
0
1
0
5.27
2
3
0
0
0
0
6.51
2.008
, 百拇医药
>0.05
COXB4
2
0
1
0
5.23
1
2
1
1
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0
7.41
, 百拇医药
2.283
>0.05
COXB5
24
2
2
0
6.83
2
1
2
1
1
1
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105.7
19.279
<0.01
COXB6
5
0
0
0
5.23
2
2
0
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, 百拇医药 0
0
6.10
1.894
>0.05
t 0.01(100)=2.626
可见正常人COXB1～6型抗体滴度均≤1∶40，GMT在5.09～6.83之间，阳性率在2.5%～35%之间。21例患者抗体滴度≥1∶80 9例，GMT在5.97～105.3之间，两组GMT比较，经t检验结果，其中COXB1、5型2个型差异有显著性(P<0.01)。
讨论
我们从26例心包积液的患者中分离出5株病毒，其中1例从心包积液中分离出COXB 5型病毒，并有双份血清自身病毒抗体4倍增高，参照1973年Lener等[4]提出的病毒性心肌炎的相关标准，属中度相关。另4例病毒分离阳性而未做血清学检查，但患者系从血液中分离出病毒的(COXB 5型3例和ECHO 7型1例)表明患者有病毒血症，具有病原学意义，属低度相关。
, http://www.100md.com
COXB 1～6型抗体检测结果，正常人80份各型的抗体滴度均<1∶80，在1∶10～1∶40之间，据此，我们将本组患者单份血清阳性标准定为≤1∶80。21例患者抗体滴度≥1∶80者9例，占病例数的25%。两组抗体GMT比较其中COXB 1、5两个型的差异有显著性(P<0.010)。综合以上结果本组心包积液病原为COXB组病毒以5型、1型多见。2型、4型和ECHO 7型病毒感染对患者发病可能有关。由于我们所做的病例尚少，仍待进一步观察。值得提出的是正常人COXB 1～6型都有不同程度的抗体滴度，表明本地区人群中存在隐性感染，尤其是1、5型抗体比较高，说明该2个型病毒的人群中传播较广。我们曾对病毒性心肌炎的病因研究[5]，证实COXB 1、5型是主要病原之一，因此值得临床和科研工作者的重视。
参考文献
1 黄祯祥主编.医学病毒学基础及临床实验技术.北京：科学出版社，1990.782-807.
, http://www.100md.com
2 Sun G, Zbang T, Harn Y, et al. Murine myocordial cell infection induced by Coxsackie Virus B3 Rome: Serono Symposis, Raren Press,1990,59:97-99.
3 胡开华，黄开琼，邱练芬.成都地区病毒性心肌炎的病毒病因研究.中华实验和临床病毒杂志，1996，10：74-76.
4 Lermer AM， Wilson FM. Virus myocardiopathy, Prog Med Virol,1973,15:273-275.
5 谢若男，叶坤照，许永绥，等.汕头市病毒性心肌炎的病毒病因研究.中华实验和临床病毒学杂志，1994，8：379-380.
(收稿：1999-01-04 修回：1999-06-15), 百拇医药