湖南汉族群体HLA-DR2等位基因多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究
作者：田伟 李立新 郭实士
单位：田伟(免疫研究室 长沙 410078)；李立新(免疫研究室 长沙 410078)；郭实士(免疫研究室 长沙 410078)
关键词：HLA-DR2抗原；红斑狼疮；全身性；聚合酶链式反应；单链构像多态性
湖南医科大学学报000105 摘 要：以HLA-DRB基因类扩增为参照，通过HLA-DR2组特异性扩增确定HLA-DR2携带者，PCR/ SSP作亚型分型，并用银染PCR/SSCP分析HLA-DR2等位基因第二外显子单链构像，调查湖南地区汉族群体SLE(系统性红斑狼疮)患者58例和健康对照59例HLA-DR2等位基因分布。结果示，HLA-DR2与SLE相关(RR=2.71，P<0.01)，HLA-DRB1*1501为疾病相关等位基因(RR=3.10，Pc<0.05)，该群体中检出的另外两种亚型DRB1*1502，1602在两组间频率分布差异无显著性。此外，PCR/SSCP分析表明湖南汉族HLA-DR2等位基因在第二外显子内不存在其他序列变异。
, 百拇医药
分类号：R392.2 文献标识码：A
文章编号：1000-5625(2000)01-0015-03
Correlative study on HLA-DR2 allelic polymorphism and systemic lupus
erythematosus in the Han nationality in Hunan province
TIAN Wei, LI Li-xin, GUO Shi-shi
Immunology Research Laboratory, Hunan Medical University(Changsha 41007 8)
Abstract：Fifty-eight systemic lupus erythematosus (SLE) pat ients and 59 normal controls o f the Han nationality in Hunan province were involved in this study to analyze the correlation between HLA-DR2 group specific amplification in combination wit h HLA-DRB generic amplification PCR/SSCP technique to detect the sequence variat i on within exon 2 of HLA-DR2 alleles outside the sequence specific primer matchi n g positions. The results were that HLA-DR2 was strongly correlated with SLE (RR = 2.71, P<0.01); and HLA-DRB1*1501 was the allele correlated with disease (R R = 3.01, Pc<0.05). In addition, PCR/SSCP showed that there was not any nov el sequence variation in exon 2 of HLA-DR2 alleles in the Han nationality in Huna n province.
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Key words：HLA-DR2 antigen;lupus erythematosus,systemic;polymerase chain reaction;single strand comformational polymorphism▲
人类白细胞抗原系统(HLA)是目前所知的人类最复杂的遗传多态性系统。其多态性与某些 疾病(尤其是自身免疫性疾病)的遗传易感性有关。系统红斑狼疮(SLE)属多基因疾病， 其发病被认为与HLA复合体有关。本文调查了湖南汉族群体HLA-DR2等位基因种类、频率分 布及与系统性红斑狼疮的相关性，现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 研究对象 58例诊断明确、无血缘关系的SLE患者由我校湘雅医院皮肤科提供，均符合美国风湿病学会1982年修订的诊断标准。59例健康对照系随机选择我校及附属卫校职工。病人及对照均为连续第三代湖南籍汉族人。
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1.2 主要试剂 蛋白酶K 系E merck公司产品；DNA聚合酶系sango n公司产品；琼脂糖系Promega公司产品；HLA-DR2 组扩增PCR引物和HLA-DRB基因类扩增PCR引物均 由第十一次国际HLA 协作大会(11th IHWC)提供[1]；HLA-DR2基因亚型(sequence-specific prime r/PCR，PCR/SSP)分型引物试剂盒系Dynal公司产品，由12th IHWC大会HLA-DR2协作组提供 。
1.3 外周血白细胞基因组DNA的提取按文献[1]方法。
1.4 HLA-DR2基因扩增定型 待测样本同时作HLA-DRB基因类扩增和HLA- DR2组扩增PCR反应。HLA-DRB基因类扩增体系设20 μl，含1×PCR缓冲液，0.5 U Taq聚合 酶，1.5 mmol. L-1 MgCl2, 200 μmol.L-1dNTP,100 ng基因组DNA，上游引物HLA-DRBAMPA 5 pmol，下游引物DRBAMPB 5 pmol。扩增所有HLA-DRB基因第三外显子2～93密码子区域，长274 bp。HLA-DR2组扩增PCR 以引物DRB-AMP2取代HLA-DRBAMPA，其余 同类扩增，该反应仅特异性扩增HLA-DR2编码基因第二外显子7～93密码子区域，长261 bp [1,2]。PCR扩增参数设退火为61℃，60 s，其余同文献[1]。取PCR 产物5 μl，常规2%琼脂糖电泳。结果判定标准：HLA-DR2阳性样本在HLA-DRB基因类扩增和HLA -DR2组扩增中均有明亮的特异性PCR扩增产物条带，HLA-DR2阴性样本仅在HLA-DRB基因类 扩增有明亮的特异性PCR扩增产物条带。每次筛选同时含HLA-DR2阳性(DR15，DR9)和HLA -DR2阴性(DR8，DR12)标准DNA对照。采用单盲法重复筛选每份样本。
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1.5 PCR/SSP方法作HLA-DR2等位基因分型 操作步骤参照试剂盒所附实验 手册：每份HLA- DR2阳性样本同时作12管PCR扩增反应(编号1～12)。PCR体积为10 μl,含1×PCR缓冲液，0 .5 U Taq聚合酶，1.5 mmol.L-1 MgCl2, 200 μmol.L-1 dNTP,100 ng基 因组DNA，5 μl 引物Mix(含SSP引物及一对内对照引物)。PCR管首先94℃预变性3 min，按94℃变性45 s， 64℃退火及延伸90 s，再按94℃变性45 s，61℃退火60 s，72℃延伸30 s，循环20次。 取全部PCR产物，2% 琼脂糖电泳15 min后置紫外灯下观察并记录。本文所用序列特异性引物可鉴定HLA-DRB1.15 01～DRB1.1504，及HLA-DRB1.1601～HLA-DRB1.1606等10种HLA-DR2等位基因(表1)。
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表1 PCR/SSP 引物扩增HLA-DR2 等位基因 格局表 SSP
引物序号
PCR产物 片
段大小(bp)
扩增的DRB1*15和
DRB1*16等位基因
1
210
1501～1504
2
160
1503
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3
200
1501～1503，1605～1606
4
200
1504，1601，1603～1604
5
260
1501，1503～1504
6
220
1601～1603，1605～1606
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7
210
1603，1606
8
220
1604
9
260
1502～15022，1601～1606
10
150
1501～15022
11
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200
1602
12
210
1501～1504，1601～1602，1604～1605
1.6 HLA-DR2等位基因第二外显子PCR/SSCP分析 取HLA-DR2组扩增PCR产物 10 μl，加等 体积载样缓冲液(95%甲酰胺，20 mmol.L-1 EDTA，0.1%溴酚蓝),95℃变性7 min后 迅速置 冰浴骤冷,10 min后备用。12%非变性聚丙烯酰胺胶(Acr：Bis = 29：1)于4℃，60 V恒压 电泳16～20 h。凝胶采用银染方法同文献[3]。
, http://www.100md.com 1.7 统计学处理 相对危险率(RR)按Haldane公式计算，显著性检验用 χ2检验或Fisher精 确法计算，P值均用Bonferroni法进行校正得PC值，即P值乘以实验系统所检出 的基因数[4]。
2 结 果
在59例正常个体中筛选到HLA-DR2携带者20例，检出HLA-DRB1*1501，1502，1602等3种基 因 型各12，1，8例(含一例DRB1*1501/1602杂合子)，等位基因频率分别为0.0980， 0.0085 ， 0.00703(图1，2)。在58例患者中筛选到HLA-DR2携带者34例，与对照组比较差异有显 著性(P<0.01)。显示HLA-DR2 与湖南地区汉族群体SLE相关。等位基因分型 证实HLA-DRB 1*1501是疾病相关基因 (PC<0.05),DRB1*1502，1602在两组间分布差异无显著性( P>0.05)(表2)。PCR/SSCP分析显示，由不同样本(含病人组)携带的、PCR/SSP检定 的同种等位基因具有完全一致的单链构型，提示湖南汉族群体HLA-DR2等位基因在第二外显 子内不存在其它序列变异(图3)。
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图1 HLA-DRB类和HLA-DR2组扩增PCR产物2%琼脂糖电 泳图。 A：HLA-DRB类扩增全部标本(1～8均有HLA-DRB类扩增PCR产物条带，274 bp；M： Ф174/HaeⅢ)。 B：阳性对照HLA-DRB2组扩增(DR15，DR9)及标本。3，4，6 ，7，有HLA-DR2组特异性PCR 产物条带 图2 HLA-DRB1*1502的PCR/SSP产物2%琼脂糖电 泳图。1，3，9，10，12，有特异性PCR产物 条带，内对照质控引物扩增人类生长激素基因片段，429 bp。M，HLA-DR2组特异 性扩增产物，261bp 图3 HLA-DR2等位基因第二外显子PCR/SSCP分 析。1，2，3，分别为HLA-DRB1*1502，DRB2*1602及DRB1*1501等位基因；M ：Ф174/HaeⅢ
Fig. 1 Agarose gel eletrophoresis of PCR products of HLA-DRB generic and HLA-DR2 group specific amplifications. A: HLA-DRB generic amplification at 274 bp; B: HLA-DR2 group specific amplificat ion, 261 bp。 Lane 1, positive control (DR15, DR9); lane 2, negative control (DR 8, DR12);lanes 3, 4, 6, 7, HLA-DR2 positive samples; lane 5, 8, HLA-DR2 negative samples; M, Ф174/HaeⅢ Fig. 2 Agarose gel eletrophoresis of PCR /SSP products of HLA-DRB1*1502. M, HLA-DR 2 group specific amplification fragments at 261 bp; lanes 1, 3, 9, 10, 12, speci fic amplification bands. The internal positive control primer pair amplifi es a 429 bp segment of the human growth hormone gene Fig. 3 PCR/SSCP analysis of exon 2 of H LA-DR2 alleles. Lane 1, DRB1*1502; Lane 2, DRB1*1602; Lane 3, DRB1*1501; M , Ф 174/HaeⅢ
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表2 SLE患者与正常对照HLA-DR2 等位基因 频率比较 等位基因
SLE病人组
( 总样本数=58)
对照组
(总样本数=59)
PC
HLA-DR2①
34
20
<0.01
1501
26
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12
<0.05
1502
4
1
>0.05
1602
5
8
>0.05
①在SLE病人组和正常对照组中分别检出1例DRB1*1501/1502和1例DRB1*1501/1602杂 合子3 讨 论
与SLE相关的HLA-DR型别因被调查人群的地域及种族差异有所不同。文献报道欧美高加索人 SLE主要与HLA-DR3相关[5，6]；中国北方地区、江苏地区汉族群体SLE与HLA-D R2相关[7，8]，而中国湖北地区汉族人群SLE与HLA-DRB1*0301相关[9] 。本文对一组诊断明确的湖南籍汉族SLE患者及一组健康对照进行HLA-DR2亚型分析，结 果表明HLA-DR2 与该地区汉族人群SLE发病相关，同时发现HLA-DRB1*1501为疾病 相关等位 基因(PC<0.05)。该群体中检出的另外 两种亚型DRB1*1502,1602在两组间的分布差异无统计学意义。据文献报道，美国黑人SLE也 与HLA-DR2相关。但相关等位基因为HLA-DRB1*1503[5]，这进一步从分子水平说 明了HLA与S LE相关的种族差异。本文结果为进一步通过HLA位点间连锁不平衡分析以确定该地区SLE原发 相关HLA基因提供了线索。
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方法学上，通过样本PCR/SSCP单链构型与已有PCR/SSO或PCR/SSP分型结果之间的比较，可快 捷、有效地在群体中筛查新的序列变异[10]。笔者的调查结果提示，湖南汉族 群体HLA-DR2等位基因在第二外显子内不存在其它序列变异。
作者简介：田伟(1969-)，男，助理研究员
参考文献：
[1]Kimura A, Sasazuki T.Eleventh international histocompatibility wo rkshop reference protocol for the HLA DNA typing technique[M].In: Tsuji K ,Ai zawa M,Sasazuki T eds. HLA 1991. New York: Oxford University Press, 1992: Vol 1, 397-419.
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[2]Marsh SGE, Bodmer JG. HLA class Ⅱ nucleotide sequences,1992[M]. In: Tsuji K, A izawa M, Sasazuki T, eds. HLA 1991. New York: Oxford University Press, 1992: Vol 1,32-62.
[3]薛涛, 祝学光, 王申五, 等. 30例结直肠癌p53基因突变的初步研究[J]. 中华医学遗传学杂志, 1996, 13(1):33-35.
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[6]Ruuska P , Hameenkorpi R, Forsberg S,et al. Differences in HLA antige ns bet ween patients with mixed connective tissue disease and systemic lupus erythemato sus[J].Ann Rheum Dis, 1992, 51:52-55.
[7]金晔, 李哲先, 张志欣, 等. 系统性红斑狼疮患者HLA-DRB1,DQB1易感基因的研究[ J]. 中华皮肤科杂志, 1998, 31(1):12-13.
[8]彭学标, 徐文严, 岳晓玉, 等. 江苏籍汉族系统性红斑狼疮与HLA-DR基因的相关性研究[J]. 中华皮肤科杂志, 1997, 30(1):7-9.
[9]杨颖, 熊平, 魏承洪, 等. HLA -DRB1等位基因与中国湖北汉族人SLE关联的研究[J]. 中华微生物学和免疫学杂志 , 1996, 16(5):340-342.
[10]杨颖, 王树军. 奚宏康, 等. 用PCR单链构像多态性快速判别个体间HLA-DP相容性并检出新等位基因[J]. 中国免疫学杂志, 1994, 10(5):301-306.
收稿日期：1999-01-28, 百拇医药
单位：田伟(免疫研究室 长沙 410078)；李立新(免疫研究室 长沙 410078)；郭实士(免疫研究室 长沙 410078)
关键词：HLA-DR2抗原；红斑狼疮；全身性；聚合酶链式反应；单链构像多态性
湖南医科大学学报000105 摘 要：以HLA-DRB基因类扩增为参照，通过HLA-DR2组特异性扩增确定HLA-DR2携带者，PCR/ SSP作亚型分型，并用银染PCR/SSCP分析HLA-DR2等位基因第二外显子单链构像，调查湖南地区汉族群体SLE(系统性红斑狼疮)患者58例和健康对照59例HLA-DR2等位基因分布。结果示，HLA-DR2与SLE相关(RR=2.71，P<0.01)，HLA-DRB1*1501为疾病相关等位基因(RR=3.10，Pc<0.05)，该群体中检出的另外两种亚型DRB1*1502，1602在两组间频率分布差异无显著性。此外，PCR/SSCP分析表明湖南汉族HLA-DR2等位基因在第二外显子内不存在其他序列变异。
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分类号：R392.2 文献标识码：A
文章编号：1000-5625(2000)01-0015-03
Correlative study on HLA-DR2 allelic polymorphism and systemic lupus
erythematosus in the Han nationality in Hunan province
TIAN Wei, LI Li-xin, GUO Shi-shi
Immunology Research Laboratory, Hunan Medical University(Changsha 41007 8)
Abstract：Fifty-eight systemic lupus erythematosus (SLE) pat ients and 59 normal controls o f the Han nationality in Hunan province were involved in this study to analyze the correlation between HLA-DR2 group specific amplification in combination wit h HLA-DRB generic amplification PCR/SSCP technique to detect the sequence variat i on within exon 2 of HLA-DR2 alleles outside the sequence specific primer matchi n g positions. The results were that HLA-DR2 was strongly correlated with SLE (RR = 2.71, P<0.01); and HLA-DRB1*1501 was the allele correlated with disease (R R = 3.01, Pc<0.05). In addition, PCR/SSCP showed that there was not any nov el sequence variation in exon 2 of HLA-DR2 alleles in the Han nationality in Huna n province.
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Key words：HLA-DR2 antigen;lupus erythematosus,systemic;polymerase chain reaction;single strand comformational polymorphism▲
人类白细胞抗原系统(HLA)是目前所知的人类最复杂的遗传多态性系统。其多态性与某些 疾病(尤其是自身免疫性疾病)的遗传易感性有关。系统红斑狼疮(SLE)属多基因疾病， 其发病被认为与HLA复合体有关。本文调查了湖南汉族群体HLA-DR2等位基因种类、频率分 布及与系统性红斑狼疮的相关性，现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 研究对象 58例诊断明确、无血缘关系的SLE患者由我校湘雅医院皮肤科提供，均符合美国风湿病学会1982年修订的诊断标准。59例健康对照系随机选择我校及附属卫校职工。病人及对照均为连续第三代湖南籍汉族人。
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1.2 主要试剂 蛋白酶K 系E merck公司产品；DNA聚合酶系sango n公司产品；琼脂糖系Promega公司产品；HLA-DR2 组扩增PCR引物和HLA-DRB基因类扩增PCR引物均 由第十一次国际HLA 协作大会(11th IHWC)提供[1]；HLA-DR2基因亚型(sequence-specific prime r/PCR，PCR/SSP)分型引物试剂盒系Dynal公司产品，由12th IHWC大会HLA-DR2协作组提供 。
1.3 外周血白细胞基因组DNA的提取按文献[1]方法。
1.4 HLA-DR2基因扩增定型 待测样本同时作HLA-DRB基因类扩增和HLA- DR2组扩增PCR反应。HLA-DRB基因类扩增体系设20 μl，含1×PCR缓冲液，0.5 U Taq聚合 酶，1.5 mmol. L-1 MgCl2, 200 μmol.L-1dNTP,100 ng基因组DNA，上游引物HLA-DRBAMPA 5 pmol，下游引物DRBAMPB 5 pmol。扩增所有HLA-DRB基因第三外显子2～93密码子区域，长274 bp。HLA-DR2组扩增PCR 以引物DRB-AMP2取代HLA-DRBAMPA，其余 同类扩增，该反应仅特异性扩增HLA-DR2编码基因第二外显子7～93密码子区域，长261 bp [1,2]。PCR扩增参数设退火为61℃，60 s，其余同文献[1]。取PCR 产物5 μl，常规2%琼脂糖电泳。结果判定标准：HLA-DR2阳性样本在HLA-DRB基因类扩增和HLA -DR2组扩增中均有明亮的特异性PCR扩增产物条带，HLA-DR2阴性样本仅在HLA-DRB基因类 扩增有明亮的特异性PCR扩增产物条带。每次筛选同时含HLA-DR2阳性(DR15，DR9)和HLA -DR2阴性(DR8，DR12)标准DNA对照。采用单盲法重复筛选每份样本。
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1.5 PCR/SSP方法作HLA-DR2等位基因分型 操作步骤参照试剂盒所附实验 手册：每份HLA- DR2阳性样本同时作12管PCR扩增反应(编号1～12)。PCR体积为10 μl,含1×PCR缓冲液，0 .5 U Taq聚合酶，1.5 mmol.L-1 MgCl2, 200 μmol.L-1 dNTP,100 ng基 因组DNA，5 μl 引物Mix(含SSP引物及一对内对照引物)。PCR管首先94℃预变性3 min，按94℃变性45 s， 64℃退火及延伸90 s，再按94℃变性45 s，61℃退火60 s，72℃延伸30 s，循环20次。 取全部PCR产物，2% 琼脂糖电泳15 min后置紫外灯下观察并记录。本文所用序列特异性引物可鉴定HLA-DRB1.15 01～DRB1.1504，及HLA-DRB1.1601～HLA-DRB1.1606等10种HLA-DR2等位基因(表1)。
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表1 PCR/SSP 引物扩增HLA-DR2 等位基因 格局表 SSP
引物序号
PCR产物 片
段大小(bp)
扩增的DRB1*15和
DRB1*16等位基因
1
210
1501～1504
2
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200
1501～1503，1605～1606
4
200
1504，1601，1603～1604
5
260
1501，1503～1504
6
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8
220
1604
9
260
1502～15022，1601～1606
10
150
1501～15022
11
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1.6 HLA-DR2等位基因第二外显子PCR/SSCP分析 取HLA-DR2组扩增PCR产物 10 μl，加等 体积载样缓冲液(95%甲酰胺，20 mmol.L-1 EDTA，0.1%溴酚蓝),95℃变性7 min后 迅速置 冰浴骤冷,10 min后备用。12%非变性聚丙烯酰胺胶(Acr：Bis = 29：1)于4℃，60 V恒压 电泳16～20 h。凝胶采用银染方法同文献[3]。
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2 结 果
在59例正常个体中筛选到HLA-DR2携带者20例，检出HLA-DRB1*1501，1502，1602等3种基 因 型各12，1，8例(含一例DRB1*1501/1602杂合子)，等位基因频率分别为0.0980， 0.0085 ， 0.00703(图1，2)。在58例患者中筛选到HLA-DR2携带者34例，与对照组比较差异有显 著性(P<0.01)。显示HLA-DR2 与湖南地区汉族群体SLE相关。等位基因分型 证实HLA-DRB 1*1501是疾病相关基因 (PC<0.05),DRB1*1502，1602在两组间分布差异无显著性( P>0.05)(表2)。PCR/SSCP分析显示，由不同样本(含病人组)携带的、PCR/SSP检定 的同种等位基因具有完全一致的单链构型，提示湖南汉族群体HLA-DR2等位基因在第二外显 子内不存在其它序列变异(图3)。
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图1 HLA-DRB类和HLA-DR2组扩增PCR产物2%琼脂糖电 泳图。 A：HLA-DRB类扩增全部标本(1～8均有HLA-DRB类扩增PCR产物条带，274 bp；M： Ф174/HaeⅢ)。 B：阳性对照HLA-DRB2组扩增(DR15，DR9)及标本。3，4，6 ，7，有HLA-DR2组特异性PCR 产物条带 图2 HLA-DRB1*1502的PCR/SSP产物2%琼脂糖电 泳图。1，3，9，10，12，有特异性PCR产物 条带，内对照质控引物扩增人类生长激素基因片段，429 bp。M，HLA-DR2组特异 性扩增产物，261bp 图3 HLA-DR2等位基因第二外显子PCR/SSCP分 析。1，2，3，分别为HLA-DRB1*1502，DRB2*1602及DRB1*1501等位基因；M ：Ф174/HaeⅢ
Fig. 1 Agarose gel eletrophoresis of PCR products of HLA-DRB generic and HLA-DR2 group specific amplifications. A: HLA-DRB generic amplification at 274 bp; B: HLA-DR2 group specific amplificat ion, 261 bp。 Lane 1, positive control (DR15, DR9); lane 2, negative control (DR 8, DR12);lanes 3, 4, 6, 7, HLA-DR2 positive samples; lane 5, 8, HLA-DR2 negative samples; M, Ф174/HaeⅢ Fig. 2 Agarose gel eletrophoresis of PCR /SSP products of HLA-DRB1*1502. M, HLA-DR 2 group specific amplification fragments at 261 bp; lanes 1, 3, 9, 10, 12, speci fic amplification bands. The internal positive control primer pair amplifi es a 429 bp segment of the human growth hormone gene Fig. 3 PCR/SSCP analysis of exon 2 of H LA-DR2 alleles. Lane 1, DRB1*1502; Lane 2, DRB1*1602; Lane 3, DRB1*1501; M , Ф 174/HaeⅢ
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表2 SLE患者与正常对照HLA-DR2 等位基因 频率比较 等位基因
SLE病人组
( 总样本数=58)
对照组
(总样本数=59)
PC
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>0.05
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①在SLE病人组和正常对照组中分别检出1例DRB1*1501/1502和1例DRB1*1501/1602杂 合子3 讨 论
与SLE相关的HLA-DR型别因被调查人群的地域及种族差异有所不同。文献报道欧美高加索人 SLE主要与HLA-DR3相关[5，6]；中国北方地区、江苏地区汉族群体SLE与HLA-D R2相关[7，8]，而中国湖北地区汉族人群SLE与HLA-DRB1*0301相关[9] 。本文对一组诊断明确的湖南籍汉族SLE患者及一组健康对照进行HLA-DR2亚型分析，结 果表明HLA-DR2 与该地区汉族人群SLE发病相关，同时发现HLA-DRB1*1501为疾病 相关等位 基因(PC<0.05)。该群体中检出的另外 两种亚型DRB1*1502,1602在两组间的分布差异无统计学意义。据文献报道，美国黑人SLE也 与HLA-DR2相关。但相关等位基因为HLA-DRB1*1503[5]，这进一步从分子水平说 明了HLA与S LE相关的种族差异。本文结果为进一步通过HLA位点间连锁不平衡分析以确定该地区SLE原发 相关HLA基因提供了线索。
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方法学上，通过样本PCR/SSCP单链构型与已有PCR/SSO或PCR/SSP分型结果之间的比较，可快 捷、有效地在群体中筛查新的序列变异[10]。笔者的调查结果提示，湖南汉族 群体HLA-DR2等位基因在第二外显子内不存在其它序列变异。
作者简介：田伟(1969-)，男，助理研究员
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收稿日期：1999-01-28, 百拇医药