尿单核细胞计数在肾小球疾病鉴别诊断中的意义
作者：梁馨苓 史 伟 刘双信 梁永正
单位：广东省人民医院肾内科 510080
关键词：尿巨噬细胞计数；肾小球肾炎；肾炎细胞增生
广东医学000111
【摘要】 目的 探讨尿单核细胞计数作为一种非创伤性检查手段判断肾炎细胞增生程度的临床价值。方法 利用流式细胞仪测定27例肾性血尿患者尿巨噬细胞计数及尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值，并与肾活检结果进行对照。结果 27例肾性血尿患者经肾活检分为不同类型的增生性肾炎组(19例)和非增生性肾炎组(8例)，发现尿巨噬细胞计数在增生性肾炎组明显高于非增生性肾炎组(P<0.001)，并且尿巨噬细胞计数随着肾炎增生程度的加重而明显升高(P<0.05)；同时观察到增生明显的血尿患者，尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值升高；非增生性肾炎组尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值无明显改变。结论 尿巨噬细胞计数及尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值可作为临床判断肾炎细胞增生程度和肾性血尿预后的一种非创伤性诊断指标。
, 百拇医药
The clinical value for differential diagnosis of glomerular isease by testing urinary mononuclear cells in patients with hematuria
Liang Xinling Shi Wei Liu Shuangxin et al
(Department of Nephrology, Guangdong Provincial People's Hospital, Guangzhou 510080)
【Abstract】 Objective To evaluate the clinical significance of urinary mononuclear cells as a noninvasive differential diagnosis means of glomerular disease.Methods The number of urinary macrophages and T-lymphocytes in fresh urine samples from 27 patients with hematuria were measured by flow cytometry, and compared with the results of renal biopsy.Results Urinary macrophage counts and the ratio of urinary macrophage counts to T lymphocyte counts increased significantly in proliferative glomerular disease but not in patients with non-proliferative glomerular disease.Conclusion Urinary macrophage counts and macrophage T lymphocyte ratio may provide useful information in evaluating the degree of renal cell proliferation and the prognosis of disease.
, 百拇医药
【Key words】 Urinary macrophage count Glomerular disease Renal cell proliferation
目前对于肾性血尿的患者，临床上除了肾活检，尚无一种方法能较好的判断肾脏细胞增殖的情况。本文对27例肾性血尿患者，利用流式细胞仪检测尿巨噬细胞计数及尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值，与肾活检结果对照，发现可较好的反映出肾脏细胞增殖的程度，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 27例血尿患者(畸形红细胞尿)，均选自我院肾内科住院的患者，其中男9例，女18例，平均年龄32岁，尿蛋白定性检查(±)～(+)。按肾活检结果分为增生性肾炎19例，其中IgA肾病13例，膜增生性肾小球肾炎MPGN 2例，狼疮性肾炎(LN)伴细胞新月体3例，急性感染后肾小球肾炎(PIGN)1例，非增生性肾炎8例、其中局灶性节段性硬化性肾炎(FSGS)7例，薄基底膜肾病1例。
, 百拇医药
1.2 检测指标 每位患者均留取晨尿标本，采用流式细胞仪检测尿巨噬细胞数量和尿T淋巴细胞数量，同时计算尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值；均进行肾活检，并将病理结果与流式细胞仪检测结果进行对照。
1.3 检测方法 收集27例血尿患者新鲜晨尿标本100 ml， 1500 r/min离心10 min，沉渣用PBS洗涤3次后再悬浮，用台盼蓝染色，取混悬液50 μl至小试管，每个试管中加入10 μl绿荧光标记FITC或红荧光标记PE的单抗，充分混匀在4℃孵育30 min，再用PBS洗涤1次，每管加入1 ml工作溶液FL及150 μl的固定液，用流式细胞仪测定出每毫升试管样本中的CD+3，CD+14细胞数，然后由标本的尿量计算出每毫升尿标本的巨噬细胞计数和T淋巴细胞计数。所采用的单抗由Pharmingen公司提供，流式细胞仪计数结果由cell quest软件分析。流式细胞仪型号为FACSCALIBUR。
, 百拇医药
1.4 统计学处理 两均数比较采用t检验，所有数据均采用SPSS统计软件处理。
2 结果
2.1 不同肾小球疾病中尿巨噬细胞计算(CD14细胞/ml尿)及尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值 见表1。
2.2 IgA肾病中增生程度与尿巨噬细胞计数比较 见表2。
表1 不同肾小球疾病中尿巨噬细胞计数及尿巨噬
细胞/T淋巴细胞比值 肾小球
疾病
例数
尿巨噬细胞
, 百拇医药 计数
尿巨噬细胞/T
淋巴细胞
增生性肾炎
IgAN
13
554.7±297.6*
4.58±1.56*
MPGN
2
346±60.8*
3.02±0.36*
, http://www.100md.com
PIGN
1
185.5*
3.55*
LN
3
851.3±55.9*
5.33±0.74*
非增生性肾炎
FSGS
7
47.1±18.8
, 百拇医药
0.97±0.14
IBMD
1
7.3
0.73
*与非增生性肾炎组比较，P<0.01表2 IgA肾病中增生程度与尿巨噬细胞计数比较
±s IgA肾病病理类型
例数
尿巨噬细胞计数
重度系膜细胞增生
6
, 百拇医药 846.6±126.7*
轻度系膜细胞增生
7
346.1±173.3
*两组比较，P<0.053 讨论
本实验观察到肾活检肾脏病理呈细胞增生的血尿患者尿巨噬细胞计数升高，且尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值明显升高；与非增殖性肾炎病人尿巨噬细胞及尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值相比较差异有显著性意义(P<0.01)。提示尿巨噬细胞计数及尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值的检测可以对临床上肾性血尿的病人进行一定的鉴别诊断以判断肾脏细胞增生情况[1]。现已知巨噬细胞在细胞免疫过程中起重要作用。在肾小球肾炎的发病过程中，动物模型及人体肾活检标本均发现巨噬细胞在肾组织中的明显渗出[2]，提示巨噬细胞在肾炎发病过程中可能起重要作用[3]。在肾小球肾炎的发病过程中，是巨噬细胞的过度渗出诱发了肾脏细胞的增生，还是肾脏的增殖性病变，导致了巨噬细胞的过度渗出?目前尚不甚了解。推测可能是由于肾脏较重的免疫损伤，在产生增殖性病变过程中，产生的细胞炎症因子，对巨噬细胞的趋化作用，导致了巨噬细胞的过度渗出。在各种肾炎的病理切片上均发现有巨噬细胞数量的增多，特别在增殖程度高的肾炎病变中巨噬细胞数量显著增加[4]。动物模型的检测也证实在新月体性肾炎的病理切片上巨噬细胞数量明显增加。在我们的实验中，观察到在13例IgA患者中，肾脏系膜细胞增生程度重的患者尿中巨噬细胞计数明显高于系膜细胞增生程度轻的患者(P<0.05)，说明巨噬细胞浸润的程度与肾脏增殖的程度呈正相关关系[5]。在增殖性肾炎的患者中尿巨噬细胞计数明显升高，提示尿巨噬细胞数量间接反映了肾组织中巨噬细胞的渗出程度及肾脏的细胞增殖程度。在非增殖性肾炎患者中尽管有明显血尿，但是尿巨噬细胞计数并无明显升高，提示巨噬细胞数量增加与红细胞的漏出无相关，而主要与肾脏炎症反应的程度相关[6]。同样，在增殖性肾炎病例中尿巨噬细胞计数远远高于尿淋巴细胞计数，而在非增殖性肾炎病中尿巨噬细胞计数低于尿淋巴细胞计数。在本实验中，我们观察到，通过检测尿巨噬细胞计数及巨噬细胞/T淋巴细胞比值，可反映出肾脏的增生程度，协助临床鉴别增殖性肾炎和非增殖性肾炎。由于临床上判断肾脏细胞的增生情况，对于指导治疗及判断预后均具有重要意义，对于临床上无法进行肾活检的患者，这种非创伤性检测指标是具有一定诊断价值的手段。尤其当患者肾活检病理提示局灶性增殖病变，而尿巨噬细胞计数进行性升高者，提示患者肾脏有严重的增殖情况[7]，可考虑给予患者更积极的治疗，而避免重复肾穿刺的风险。
, http://www.100md.com
参考文献
1，Hotta O, Yusa N, Ooyama M. Urinary macrophage counts and ratio to T lymphocytes: possible use in differential diagnosis and management of glomerular disease. J of Clin Lab Analysis, 1996, 10:205
2，Fillit HM, Zabriskie JB. Cellular immunity in glomerulonephritis. Am J Pathol, 1982, 109:227
3，Hotta O, Taguma Y, Yusa N, et al. Analysis of CD14 cells and CD56 cells in urine using flow cytometry: a useful tool for monitoring disease activity of IgA nephropathy. Clin Nephrol, 1993,39:289
, 百拇医药
4，Hotta O, Taguma Y, Yusa N. Analysis of mononuclear cells in urine using flow cytometry in glomerular disease. Kidney Int, 1994, 46(Suppl 47):S117
5，McClusky RT, Bhan AK. Cell-mediated immunity in renal disease. Hum Pathol, 1986,17:146
6，Abe T, Kida H， Yoshimura H, et al. Particpation of extracapillary lesions in progression of IgA nephropathy. Clin Nephrol,1986, 25:37
7，Hotta O, Taguma Y, Sudo K. Limitation of kindney biopsy in detecting crescentic lesions in IgA nephropathy. Nephron, 1993,65:472
(收稿日期：1999-09-27), http://www.100md.com
单位：广东省人民医院肾内科 510080
关键词：尿巨噬细胞计数；肾小球肾炎；肾炎细胞增生
广东医学000111
【摘要】 目的 探讨尿单核细胞计数作为一种非创伤性检查手段判断肾炎细胞增生程度的临床价值。方法 利用流式细胞仪测定27例肾性血尿患者尿巨噬细胞计数及尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值，并与肾活检结果进行对照。结果 27例肾性血尿患者经肾活检分为不同类型的增生性肾炎组(19例)和非增生性肾炎组(8例)，发现尿巨噬细胞计数在增生性肾炎组明显高于非增生性肾炎组(P<0.001)，并且尿巨噬细胞计数随着肾炎增生程度的加重而明显升高(P<0.05)；同时观察到增生明显的血尿患者，尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值升高；非增生性肾炎组尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值无明显改变。结论 尿巨噬细胞计数及尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值可作为临床判断肾炎细胞增生程度和肾性血尿预后的一种非创伤性诊断指标。
, 百拇医药
The clinical value for differential diagnosis of glomerular isease by testing urinary mononuclear cells in patients with hematuria
Liang Xinling Shi Wei Liu Shuangxin et al
(Department of Nephrology, Guangdong Provincial People's Hospital, Guangzhou 510080)
【Abstract】 Objective To evaluate the clinical significance of urinary mononuclear cells as a noninvasive differential diagnosis means of glomerular disease.Methods The number of urinary macrophages and T-lymphocytes in fresh urine samples from 27 patients with hematuria were measured by flow cytometry, and compared with the results of renal biopsy.Results Urinary macrophage counts and the ratio of urinary macrophage counts to T lymphocyte counts increased significantly in proliferative glomerular disease but not in patients with non-proliferative glomerular disease.Conclusion Urinary macrophage counts and macrophage T lymphocyte ratio may provide useful information in evaluating the degree of renal cell proliferation and the prognosis of disease.
, 百拇医药
【Key words】 Urinary macrophage count Glomerular disease Renal cell proliferation
目前对于肾性血尿的患者，临床上除了肾活检，尚无一种方法能较好的判断肾脏细胞增殖的情况。本文对27例肾性血尿患者，利用流式细胞仪检测尿巨噬细胞计数及尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值，与肾活检结果对照，发现可较好的反映出肾脏细胞增殖的程度，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 27例血尿患者(畸形红细胞尿)，均选自我院肾内科住院的患者，其中男9例，女18例，平均年龄32岁，尿蛋白定性检查(±)～(+)。按肾活检结果分为增生性肾炎19例，其中IgA肾病13例，膜增生性肾小球肾炎MPGN 2例，狼疮性肾炎(LN)伴细胞新月体3例，急性感染后肾小球肾炎(PIGN)1例，非增生性肾炎8例、其中局灶性节段性硬化性肾炎(FSGS)7例，薄基底膜肾病1例。
, 百拇医药
1.2 检测指标 每位患者均留取晨尿标本，采用流式细胞仪检测尿巨噬细胞数量和尿T淋巴细胞数量，同时计算尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值；均进行肾活检，并将病理结果与流式细胞仪检测结果进行对照。
1.3 检测方法 收集27例血尿患者新鲜晨尿标本100 ml， 1500 r/min离心10 min，沉渣用PBS洗涤3次后再悬浮，用台盼蓝染色，取混悬液50 μl至小试管，每个试管中加入10 μl绿荧光标记FITC或红荧光标记PE的单抗，充分混匀在4℃孵育30 min，再用PBS洗涤1次，每管加入1 ml工作溶液FL及150 μl的固定液，用流式细胞仪测定出每毫升试管样本中的CD+3，CD+14细胞数，然后由标本的尿量计算出每毫升尿标本的巨噬细胞计数和T淋巴细胞计数。所采用的单抗由Pharmingen公司提供，流式细胞仪计数结果由cell quest软件分析。流式细胞仪型号为FACSCALIBUR。
, 百拇医药
1.4 统计学处理 两均数比较采用t检验，所有数据均采用SPSS统计软件处理。
2 结果
2.1 不同肾小球疾病中尿巨噬细胞计算(CD14细胞/ml尿)及尿巨噬细胞/T淋巴细胞比值 见表1。
2.2 IgA肾病中增生程度与尿巨噬细胞计数比较 见表2。
表1 不同肾小球疾病中尿巨噬细胞计数及尿巨噬
细胞/T淋巴细胞比值 肾小球
疾病
例数
尿巨噬细胞
, 百拇医药 计数
尿巨噬细胞/T
淋巴细胞
增生性肾炎
IgAN
13
554.7±297.6*
4.58±1.56*
MPGN
2
346±60.8*
3.02±0.36*
, http://www.100md.com
PIGN
1
185.5*
3.55*
LN
3
851.3±55.9*
5.33±0.74*
非增生性肾炎
FSGS
7
47.1±18.8
, 百拇医药
0.97±0.14
IBMD
1
7.3
0.73
*与非增生性肾炎组比较，P<0.01表2 IgA肾病中增生程度与尿巨噬细胞计数比较
±s IgA肾病病理类型例数
尿巨噬细胞计数
重度系膜细胞增生
6
, 百拇医药 846.6±126.7*
轻度系膜细胞增生
7
346.1±173.3
*两组比较，P<0.053 讨论
本实验观察到肾活检肾脏病理呈细胞增生的血尿患者尿巨噬细胞计数升高，且尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值明显升高；与非增殖性肾炎病人尿巨噬细胞及尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值相比较差异有显著性意义(P<0.01)。提示尿巨噬细胞计数及尿巨噬细胞计数/T淋巴细胞计数比值的检测可以对临床上肾性血尿的病人进行一定的鉴别诊断以判断肾脏细胞增生情况[1]。现已知巨噬细胞在细胞免疫过程中起重要作用。在肾小球肾炎的发病过程中，动物模型及人体肾活检标本均发现巨噬细胞在肾组织中的明显渗出[2]，提示巨噬细胞在肾炎发病过程中可能起重要作用[3]。在肾小球肾炎的发病过程中，是巨噬细胞的过度渗出诱发了肾脏细胞的增生，还是肾脏的增殖性病变，导致了巨噬细胞的过度渗出?目前尚不甚了解。推测可能是由于肾脏较重的免疫损伤，在产生增殖性病变过程中，产生的细胞炎症因子，对巨噬细胞的趋化作用，导致了巨噬细胞的过度渗出。在各种肾炎的病理切片上均发现有巨噬细胞数量的增多，特别在增殖程度高的肾炎病变中巨噬细胞数量显著增加[4]。动物模型的检测也证实在新月体性肾炎的病理切片上巨噬细胞数量明显增加。在我们的实验中，观察到在13例IgA患者中，肾脏系膜细胞增生程度重的患者尿中巨噬细胞计数明显高于系膜细胞增生程度轻的患者(P<0.05)，说明巨噬细胞浸润的程度与肾脏增殖的程度呈正相关关系[5]。在增殖性肾炎的患者中尿巨噬细胞计数明显升高，提示尿巨噬细胞数量间接反映了肾组织中巨噬细胞的渗出程度及肾脏的细胞增殖程度。在非增殖性肾炎患者中尽管有明显血尿，但是尿巨噬细胞计数并无明显升高，提示巨噬细胞数量增加与红细胞的漏出无相关，而主要与肾脏炎症反应的程度相关[6]。同样，在增殖性肾炎病例中尿巨噬细胞计数远远高于尿淋巴细胞计数，而在非增殖性肾炎病中尿巨噬细胞计数低于尿淋巴细胞计数。在本实验中，我们观察到，通过检测尿巨噬细胞计数及巨噬细胞/T淋巴细胞比值，可反映出肾脏的增生程度，协助临床鉴别增殖性肾炎和非增殖性肾炎。由于临床上判断肾脏细胞的增生情况，对于指导治疗及判断预后均具有重要意义，对于临床上无法进行肾活检的患者，这种非创伤性检测指标是具有一定诊断价值的手段。尤其当患者肾活检病理提示局灶性增殖病变，而尿巨噬细胞计数进行性升高者，提示患者肾脏有严重的增殖情况[7]，可考虑给予患者更积极的治疗，而避免重复肾穿刺的风险。
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参考文献
1，Hotta O, Yusa N, Ooyama M. Urinary macrophage counts and ratio to T lymphocytes: possible use in differential diagnosis and management of glomerular disease. J of Clin Lab Analysis, 1996, 10:205
2，Fillit HM, Zabriskie JB. Cellular immunity in glomerulonephritis. Am J Pathol, 1982, 109:227
3，Hotta O, Taguma Y, Yusa N, et al. Analysis of CD14 cells and CD56 cells in urine using flow cytometry: a useful tool for monitoring disease activity of IgA nephropathy. Clin Nephrol, 1993,39:289
, 百拇医药
4，Hotta O, Taguma Y, Yusa N. Analysis of mononuclear cells in urine using flow cytometry in glomerular disease. Kidney Int, 1994, 46(Suppl 47):S117
5，McClusky RT, Bhan AK. Cell-mediated immunity in renal disease. Hum Pathol, 1986,17:146
6，Abe T, Kida H， Yoshimura H, et al. Particpation of extracapillary lesions in progression of IgA nephropathy. Clin Nephrol,1986, 25:37
7，Hotta O, Taguma Y, Sudo K. Limitation of kindney biopsy in detecting crescentic lesions in IgA nephropathy. Nephron, 1993,65:472
(收稿日期：1999-09-27), http://www.100md.com