重组干扰素αlb注射后中和抗体产生的研究
作者：李定坤 江裔发 熊诗松
单位：李定坤(南京市第二医院 210003)；江裔发 熊诗松(上海生物制品研究所)
关键词：
江苏医药000746 据AntonelliG等报道，患者使用大剂量重组干扰素制剂治疗时，其血清可能产生干扰素中和抗体。目前至少有三种测定法可用于检测干扰素抗体，其中中和测定法是WHO推荐用于测定循环抗体的方法，它能测定具有生物活性的表位抗体。本文报告用这一方法检测患者注射重组干扰素αlb后血清中的中和抗体的产生。
一、资料与方法
1.临床资料：全部病例均符合1995年第5次全国传染病与寄生虫病学术会议修定的诊断标准。慢性乙肝133例，慢性丙肝34例。年龄18～60岁。治疗前均已排除重型肝炎、心、肾、内分泌及造血系统疾患。
, http://www.100md.com
2.用药方法及采血时间：重组干扰素αlb由卫生部上海生物制品研究所提供。乙肝组，每日注射干扰素αlb40μg(相当于MBDK细胞测定400万IU，下同)，连续3个月或第2～3个月隔日注射。累积剂量2400～3600 μg(即240-360 MU)；丙肝组，每日注射干扰素αlb30 μg(即300万IU)，连续4个月，累积剂量为1800-2400 μg(即180-240 MU)。所有患者治疗前及治疗结束第3、第6个月分别采血分离血清保存。
3.中和抗体测定：待测抗体，即病人血清；免疫血清、标准抗类淋巴细胞干扰素羊血清，由美国NIH提供。对照血清，为正常羊血清。抗原为重组干扰素αlb冻干制剂。细胞为WISH细胞。病毒为VSA病毒。步骤：将对照血清、免疫血清、待测抗体分别稀释成不同浓度并与抗原等量混合，中和一小时，然后加入WISH细胞，置于CO2温箱37℃培养过夜，次日加入VSA病毒过夜，第3日判定结果。第3、第6个月复测。
二、结果
, 百拇医药
患者治疗结束后，重组干扰素αlb的累积剂量为180～360 MU，其血清中和抗体阳性率为7.18%(12/167)。第3个月复测，阳性率4.19%(7/167)，第6个月复测为2.99%(5/167)。抗体滴度较低，为1∶22.13+1.51(见表1)。
表1 治疗组中和抗体阳性率 组别
累积剂量(MU)
阳性数/测定数(0%)
滴定数
乙肝组
240～360
11/133(8.27)
1∶10～60
, 百拇医药
丙肝组
180～210
1/34(3.33)
1∶20
三、讨论
据国外报道，重组干扰素α2b和重组干扰素α2a在人体长期使用过程中可产生血清干扰素中和抗体，阳性率为2%～20%。重组αlb是我国学者从健康人白细胞中获取干扰素αlb基因组建杂交质粒，转染大肠杆菌后，在大肠杆菌中表达干扰素蛋白精制而成，人体使用后是否会产生中和抗体尚未见报道。本文结果表明重组干扰素αlb的中和抗体的阳性率较低，消失快，不影响治疗效果。乙肝组干扰素αlb累积剂量为240～360 MU，中和抗体阳性率为8.3%(11/133)，而丙肝组累积剂量为180～210 MU，中和抗体阳性率为3.3%，两组差别无显著意义(P>0.05)；比较乙肝组两种剂量，每日用药(累积剂量为360 MU)与隔日用药(累积剂量240 MU)其中和抗体阳性率分别为5.8%和10%，无显著差别(P>0.05)，提示中和抗体阳性率与干扰素剂量不相关。
与重组干扰素α2a和α2b相比，本研究表明重组干扰素αlb抗体阳性率为7.18%，抗体滴度较低，为1∶22.13±1.51，多为1∶10～20，提示重组干扰素αlb免疫原性可能低于干扰素α2a，而与干扰素α2b相近。
本文乙肝组11例中和抗体阳性者，7例系治疗后HBeAg仍有阳性或转阴后又反跳。丙肝组1例阳性者，亦属治疗无效。提示疗效及预后确与中和抗体的存在有关。对治疗失败患者，临床可考虑使用天然干扰素或其它亚型干扰素。, 百拇医药
单位：李定坤(南京市第二医院 210003)；江裔发 熊诗松(上海生物制品研究所)
关键词：
江苏医药000746 据AntonelliG等报道，患者使用大剂量重组干扰素制剂治疗时，其血清可能产生干扰素中和抗体。目前至少有三种测定法可用于检测干扰素抗体，其中中和测定法是WHO推荐用于测定循环抗体的方法，它能测定具有生物活性的表位抗体。本文报告用这一方法检测患者注射重组干扰素αlb后血清中的中和抗体的产生。
一、资料与方法
1.临床资料：全部病例均符合1995年第5次全国传染病与寄生虫病学术会议修定的诊断标准。慢性乙肝133例，慢性丙肝34例。年龄18～60岁。治疗前均已排除重型肝炎、心、肾、内分泌及造血系统疾患。
, http://www.100md.com
2.用药方法及采血时间：重组干扰素αlb由卫生部上海生物制品研究所提供。乙肝组，每日注射干扰素αlb40μg(相当于MBDK细胞测定400万IU，下同)，连续3个月或第2～3个月隔日注射。累积剂量2400～3600 μg(即240-360 MU)；丙肝组，每日注射干扰素αlb30 μg(即300万IU)，连续4个月，累积剂量为1800-2400 μg(即180-240 MU)。所有患者治疗前及治疗结束第3、第6个月分别采血分离血清保存。
3.中和抗体测定：待测抗体，即病人血清；免疫血清、标准抗类淋巴细胞干扰素羊血清，由美国NIH提供。对照血清，为正常羊血清。抗原为重组干扰素αlb冻干制剂。细胞为WISH细胞。病毒为VSA病毒。步骤：将对照血清、免疫血清、待测抗体分别稀释成不同浓度并与抗原等量混合，中和一小时，然后加入WISH细胞，置于CO2温箱37℃培养过夜，次日加入VSA病毒过夜，第3日判定结果。第3、第6个月复测。
二、结果
, 百拇医药
患者治疗结束后，重组干扰素αlb的累积剂量为180～360 MU，其血清中和抗体阳性率为7.18%(12/167)。第3个月复测，阳性率4.19%(7/167)，第6个月复测为2.99%(5/167)。抗体滴度较低，为1∶22.13+1.51(见表1)。
表1 治疗组中和抗体阳性率 组别
累积剂量(MU)
阳性数/测定数(0%)
滴定数
乙肝组
240～360
11/133(8.27)
1∶10～60
, 百拇医药
丙肝组
180～210
1/34(3.33)
1∶20
三、讨论
据国外报道，重组干扰素α2b和重组干扰素α2a在人体长期使用过程中可产生血清干扰素中和抗体，阳性率为2%～20%。重组αlb是我国学者从健康人白细胞中获取干扰素αlb基因组建杂交质粒，转染大肠杆菌后，在大肠杆菌中表达干扰素蛋白精制而成，人体使用后是否会产生中和抗体尚未见报道。本文结果表明重组干扰素αlb的中和抗体的阳性率较低，消失快，不影响治疗效果。乙肝组干扰素αlb累积剂量为240～360 MU，中和抗体阳性率为8.3%(11/133)，而丙肝组累积剂量为180～210 MU，中和抗体阳性率为3.3%，两组差别无显著意义(P>0.05)；比较乙肝组两种剂量，每日用药(累积剂量为360 MU)与隔日用药(累积剂量240 MU)其中和抗体阳性率分别为5.8%和10%，无显著差别(P>0.05)，提示中和抗体阳性率与干扰素剂量不相关。
与重组干扰素α2a和α2b相比，本研究表明重组干扰素αlb抗体阳性率为7.18%，抗体滴度较低，为1∶22.13±1.51，多为1∶10～20，提示重组干扰素αlb免疫原性可能低于干扰素α2a，而与干扰素α2b相近。
本文乙肝组11例中和抗体阳性者，7例系治疗后HBeAg仍有阳性或转阴后又反跳。丙肝组1例阳性者，亦属治疗无效。提示疗效及预后确与中和抗体的存在有关。对治疗失败患者，临床可考虑使用天然干扰素或其它亚型干扰素。, 百拇医药