H-2K~b-BSP融合基因在大肠杆菌中的表达与纯化
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上海第二医科大学分子生物学实验中心 上海200025 钱丽；钱书兵；钱关祥
参见附件(1170kb)。
上海第二医科大学分子生物学实验中心 上海200025 钱丽；钱书兵；钱关祥
关键词：H-2Kb；基因表达；纯化；复性
摘要：目的 构建可生物素化H-2K～b- BSP融合基因的表达载体。方法 采用 PCR技术，从 pBkuescript(+) K～b中扩增出H-2K～b基因的胞外区，拼接上依赖 BirA酶的可生物素化序列后，克隆人pET-42b(+)高效表达载体进行诱导表达。并对表达产物进行纯化与复性。结果 成功地构建了融合表达载体pET-H-2K～b-BSP，对表达产物进行纯化与复性，并应用仅识别完整构象的抗K～b分子的单克隆抗体对复性后产物进行了检测。证明表达产物已部分恢复了构象。结论 获得H-2K～b- BSP融合蛋白的高效表达...
上海第二医科大学分子生物学实验中心 上海200025 钱丽；钱书兵；钱关祥
关键词：H-2Kb；基因表达；纯化；复性
摘要：目的 构建可生物素化H-2K～b- BSP融合基因的表达载体。方法 采用 PCR技术，从 pBkuescript(+) K～b中扩增出H-2K～b基因的胞外区，拼接上依赖 BirA酶的可生物素化序列后，克隆人pET-42b(+)高效表达载体进行诱导表达。并对表达产物进行纯化与复性。结果 成功地构建了融合表达载体pET-H-2K～b-BSP，对表达产物进行纯化与复性，并应用仅识别完整构象的抗K～b分子的单克隆抗体对复性后产物进行了检测。证明表达产物已部分恢复了构象。结论 获得H-2K～b- BSP融合蛋白的高效表达...
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