CD137(人4-1BB)在dhfr-CHO中的表达及活性研究
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山东大学医学院免疫学研究所 济南250012 万兵；张利宁；马春红；宋静；曹英林；李长菲；孙汶生
共刺激分子|CD137|真核表达系统|dhfr-CHO
参见附件(69kb)。
山东大学医学院免疫学研究所 济南250012 万兵；张利宁；马春红；宋静；曹英林；李长菲；孙汶生
关键词：共刺激分子；CD137；真核表达系统；dhfr-CHO
摘要：目的 :构建CD137真核高效表达系统 ,深入研究CD137及其配体在细胞信号转导中的作用。方法 :将构建有CD137全长cDNA序列的pCDNA3质粒 (CMV ILA SEN ,CIS)及pSV2 dhfr(含二氢叶酸还原酶基因 ) ,运用脂质体介导法共转染二氢叶酸还原酶缺陷的CHO细胞 (dhfr CHO) ;用G4 18筛选出阳性克隆 ;MTX压力选择系统诱导CD137在dhfr CHO细胞的高效表达 ;RT PCR、免疫细胞化学法及流式细胞术测定CD137的表达情况 ;3H TdR掺入法进行活性研究。结果 :CD137为膜型表达 ,CIS转化dhfr CHO细胞CD137表达率为 96 0 7% ;活性研究显示CD137膜蛋白轻度促进抗CD3单抗诱导的PBMC增...
山东大学医学院免疫学研究所 济南250012 万兵；张利宁；马春红；宋静；曹英林；李长菲；孙汶生
关键词：共刺激分子；CD137；真核表达系统；dhfr-CHO
摘要：目的 :构建CD137真核高效表达系统 ,深入研究CD137及其配体在细胞信号转导中的作用。方法 :将构建有CD137全长cDNA序列的pCDNA3质粒 (CMV ILA SEN ,CIS)及pSV2 dhfr(含二氢叶酸还原酶基因 ) ,运用脂质体介导法共转染二氢叶酸还原酶缺陷的CHO细胞 (dhfr CHO) ;用G4 18筛选出阳性克隆 ;MTX压力选择系统诱导CD137在dhfr CHO细胞的高效表达 ;RT PCR、免疫细胞化学法及流式细胞术测定CD137的表达情况 ;3H TdR掺入法进行活性研究。结果 :CD137为膜型表达 ,CIS转化dhfr CHO细胞CD137表达率为 96 0 7% ;活性研究显示CD137膜蛋白轻度促进抗CD3单抗诱导的PBMC增...
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