表达HIV-1 gag-gp120嵌合基因酵母工程菌的构建及表达条件的优化
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解放军军需大学基因工程重点实验室；吉林大学第一医院 江文正；金宁一；李子健；韩文瑜
HIV1|gaggp120|毕赤酵母|表达,表达HIV-1gag-gp120嵌合基因酵母工程菌的构建及表达条件的优化
参见附件(36kb)。
解放军军需大学基因工程重点实验室；吉林大学第一医院 江文正；金宁一；李子健；韩文瑜
关键词：HIV1；gaggp120；毕赤酵母；表达
摘要：目的 构建表达HIV 1gag gp12 0嵌合基因的酵母工程菌 ,并优化表达条件。方法 将gag gp12 0嵌合基因插入到酵母表达载体pHILS1中 ,构建了表达质粒pHILGP。线性化质粒电转化毕赤酵母菌GS115后进行整合 ,通过PCR及表达产物的SDS PAGE和ELISA等方法筛选阳性酵母工程菌 ,并优化表达条件。结果 成功构建表达融合蛋白的酵母工程菌 ,表达量为 13%左右。表达蛋白能与HIV 1阳性血清发生反应 ,但其相对分子质量 (Mr)比预计计算的值要小。最佳表达条件为 :BMMY培养基 ,85 %溶解氧 ,培养时间 3d ,1%甲醇诱导浓度。结论 表达的融合蛋白具有很好的抗原特异性 ,存在...
解放军军需大学基因工程重点实验室；吉林大学第一医院 江文正；金宁一；李子健；韩文瑜
关键词：HIV1；gaggp120；毕赤酵母；表达
摘要：目的 构建表达HIV 1gag gp12 0嵌合基因的酵母工程菌 ,并优化表达条件。方法 将gag gp12 0嵌合基因插入到酵母表达载体pHILS1中 ,构建了表达质粒pHILGP。线性化质粒电转化毕赤酵母菌GS115后进行整合 ,通过PCR及表达产物的SDS PAGE和ELISA等方法筛选阳性酵母工程菌 ,并优化表达条件。结果 成功构建表达融合蛋白的酵母工程菌 ,表达量为 13%左右。表达蛋白能与HIV 1阳性血清发生反应 ,但其相对分子质量 (Mr)比预计计算的值要小。最佳表达条件为 :BMMY培养基 ,85 %溶解氧 ,培养时间 3d ,1%甲醇诱导浓度。结论 表达的融合蛋白具有很好的抗原特异性 ,存在...
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