应用长链RT-PCR法扩增我国登革2、4型病毒株全长cDNA
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军事医学科学院微生物流行病研究所 100071北京 范宝昌；赵卫；胡志君；陈水平；于曼；秦鄂德；杨佩英
登革病毒|全长cDNA|长链RTPCR
参见附件(57kb)。
军事医学科学院微生物流行病研究所 100071北京 范宝昌；赵卫；胡志君；陈水平；于曼；秦鄂德；杨佩英
关键词：登革病毒；全长cDNA；长链RTPCR
摘要：目的 采用长链RT PCR技术扩增登革 2型及 4型病毒基因组全长cDNA ,为构建登革病毒全长cDNA克隆、表达 ,深入阐明致病机理及探索新型疫苗奠定基础。方法 根据已测定的登革2、4型病毒全基因组序列 ,设计上下游引物。从感染登革病毒的乳鼠脑中提取病毒基因组RNA ,采用长链RT PCR技术进行扩增。为检验扩增产物的特异性 ,以PCR产物为模板扩增覆盖基因组的 10个片段。将含有复杂二级结构的 5′非编码区的扩增片段 ,在 377A型自动测序仪进行序列分析。结果 扩增出登革 2、4型病毒基因组全长近 11kbcDNA分子 ,非编码区测序结果表明扩增产物为登革 2、4型病毒...
军事医学科学院微生物流行病研究所 100071北京 范宝昌；赵卫；胡志君；陈水平；于曼；秦鄂德；杨佩英
关键词：登革病毒；全长cDNA；长链RTPCR
摘要：目的 采用长链RT PCR技术扩增登革 2型及 4型病毒基因组全长cDNA ,为构建登革病毒全长cDNA克隆、表达 ,深入阐明致病机理及探索新型疫苗奠定基础。方法 根据已测定的登革2、4型病毒全基因组序列 ,设计上下游引物。从感染登革病毒的乳鼠脑中提取病毒基因组RNA ,采用长链RT PCR技术进行扩增。为检验扩增产物的特异性 ,以PCR产物为模板扩增覆盖基因组的 10个片段。将含有复杂二级结构的 5′非编码区的扩增片段 ,在 377A型自动测序仪进行序列分析。结果 扩增出登革 2、4型病毒基因组全长近 11kbcDNA分子 ,非编码区测序结果表明扩增产物为登革 2、4型病毒...
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