双糖残基在肺癌组织学的检测
作者：徐明堂 杜传国 朱春贤 张辉
单位：徐明堂(河北省胸科医院病理科，石家庄 050041)；朱春贤(河北省胸科医院病理科，石家庄 050041)；杜传国(河北省胸科医院CT室，石家庄 050041)；张辉(河北省胸科医院检验科，石家庄 050041)
关键词：
一一、材料和方法
1.材料选自我院近年来手术切除的肺大体标本182份，其中肺恶性肿瘤95例(腺癌36例、鳞癌40例、小细胞癌14例、类癌4例、恶性纤维组织细胞瘤1例);其他非肺恶性肿瘤87例，包括肺结核41例，支气管扩张12例，肺脓肿12例，肺曲菌球感染7例，肺囊肿7例，肺其他良性疾病8例。肺癌组年龄30～74岁，平均51.8岁，男女性别比3∶1；非肺癌组年龄7～66岁，平均35.8岁，男女性别比1.5∶1。
, http://www.100md.com
2.标本常规甲醛固定石蜡包埋制片(厚5 μm)，半乳糖氧化酶试剂购自Sigma化学公司(G-7400 10 000 units，Lot85H6847)。染色参照Abulkalam等[1]及Xu等[2]半乳糖化酶-Schiff试剂方法加以改进：(1)石蜡切片脱蜡，置蒸溜水浸洗10 min；(2)0.1 mol/L、pH 7.0的磷酸钾缓冲液浸洗10 min;(3)用上述缓冲液配制的半乳糖氧化酶液(100 U/ml)37℃孵育4～5 h；(4)蒸馏水洗10 min(其中换2次水)；(5)与Schiff试剂反应20～30 min，(6)自来水冲洗10 min；(7)Harris苏木素染色1～2 min；(8)1%盐酸酒精分化数秒，然后自来水冲洗，常规脱水透明中性树胶封片。镜下观察：于胞质、腺腔内出现红色产物者定为阳性。
二、结果
1.95例瘤组织检测为阳性仅见于腺癌，其阳性率为36.11%(13/36)，鳞癌、小细胞癌等均阴性，阳性产物位于腺癌胞质、腺腔缘及腺腔的粘液中。
, 百拇医药
2.肺癌支气管断端检测有意义者(粘膜组织结构完整者)85例，阳性率71.76%(61/85)，阳性产物位于粘膜下腺体的胞质及腺腔粘液中，由数个细胞到数个腺体不等，粘膜上
皮细胞阴性。尽管鳞癌、小细胞癌等瘤组织阴性。但其支气管断端粘膜下腺体为阳性。
3.非肺癌病例87例，检测病变肺支气管断端及病灶阳性率71.26%(62/87)。阳性产物位于病灶中残存的腺体及支气管粘膜下腺体，也由数个细胞到数个腺体不等，而粘膜上皮阴性。
4.肺癌和非肺癌病变肺支气管粘膜下腺体的阳性率经统计学分析结果χ2=0.005 6，P>0.9，差异无显著性。
三、讨论
双糖残基位于末端连接唾液酸的糖链上，当细胞膜上糖基转移酶异常或缺如时暴露，可被半乳糖氧化酶氧化，而与Schiff试剂反应生成红色产物而得以显示。Abulkalam等[1]和Xu等[2]等证明其表达于结直肠癌及癌前病变的粘液中。近年李昕等[3]在肺癌患者的痰液中也检测到双糖残基的表达，建议为人群肺癌普查方法。我们用此方法对肺癌组织进行检测，发现它表达于肺癌的腺癌组织(阳性率36.11%)和不同组织类型的肺癌支气管断端的粘膜下腺体(阳性率71.76%)，而非腺癌的瘤组织和粘膜上皮未见表达。但我们在非肺癌的病变肺支气管断端及病灶中同样发现有表达(阳性率71.26%)，因而我们认为双糖残基作为肺癌的鉴定指标应持谨慎态度。
, http://www.100md.com
参考文献：
[1]Abulkalam M, Shamsuddin MD ,Alaaeldeen M, et al. A Test for Detection of colorectal cancer. Hum Pathol, 1989,19:7-10.
[2]Xu H, Sakamoto K, Shamsuddin AM，et al. Detection of the tumor marker D-galactose-β-(1→3)-N-Acetyl-D-galactosamine in colonic cancer and precancer. Arch pathol Lab Med, 1992,116:1234-1238.
[3]李昕，戴晓淳，何安光，等.痰液T抗原检测——一种肺癌筛选的简易方法. 中华结核与呼吸杂志,1995,18：285-286.
收稿日期：1999-05-30, 百拇医药
单位：徐明堂(河北省胸科医院病理科，石家庄 050041)；朱春贤(河北省胸科医院病理科，石家庄 050041)；杜传国(河北省胸科医院CT室，石家庄 050041)；张辉(河北省胸科医院检验科，石家庄 050041)
关键词：
一一、材料和方法
1.材料选自我院近年来手术切除的肺大体标本182份，其中肺恶性肿瘤95例(腺癌36例、鳞癌40例、小细胞癌14例、类癌4例、恶性纤维组织细胞瘤1例);其他非肺恶性肿瘤87例，包括肺结核41例，支气管扩张12例，肺脓肿12例，肺曲菌球感染7例，肺囊肿7例，肺其他良性疾病8例。肺癌组年龄30～74岁，平均51.8岁，男女性别比3∶1；非肺癌组年龄7～66岁，平均35.8岁，男女性别比1.5∶1。
, http://www.100md.com
2.标本常规甲醛固定石蜡包埋制片(厚5 μm)，半乳糖氧化酶试剂购自Sigma化学公司(G-7400 10 000 units，Lot85H6847)。染色参照Abulkalam等[1]及Xu等[2]半乳糖化酶-Schiff试剂方法加以改进：(1)石蜡切片脱蜡，置蒸溜水浸洗10 min；(2)0.1 mol/L、pH 7.0的磷酸钾缓冲液浸洗10 min;(3)用上述缓冲液配制的半乳糖氧化酶液(100 U/ml)37℃孵育4～5 h；(4)蒸馏水洗10 min(其中换2次水)；(5)与Schiff试剂反应20～30 min，(6)自来水冲洗10 min；(7)Harris苏木素染色1～2 min；(8)1%盐酸酒精分化数秒，然后自来水冲洗，常规脱水透明中性树胶封片。镜下观察：于胞质、腺腔内出现红色产物者定为阳性。
二、结果
1.95例瘤组织检测为阳性仅见于腺癌，其阳性率为36.11%(13/36)，鳞癌、小细胞癌等均阴性，阳性产物位于腺癌胞质、腺腔缘及腺腔的粘液中。
, 百拇医药
2.肺癌支气管断端检测有意义者(粘膜组织结构完整者)85例，阳性率71.76%(61/85)，阳性产物位于粘膜下腺体的胞质及腺腔粘液中，由数个细胞到数个腺体不等，粘膜上
皮细胞阴性。尽管鳞癌、小细胞癌等瘤组织阴性。但其支气管断端粘膜下腺体为阳性。
3.非肺癌病例87例，检测病变肺支气管断端及病灶阳性率71.26%(62/87)。阳性产物位于病灶中残存的腺体及支气管粘膜下腺体，也由数个细胞到数个腺体不等，而粘膜上皮阴性。
4.肺癌和非肺癌病变肺支气管粘膜下腺体的阳性率经统计学分析结果χ2=0.005 6，P>0.9，差异无显著性。
三、讨论
双糖残基位于末端连接唾液酸的糖链上，当细胞膜上糖基转移酶异常或缺如时暴露，可被半乳糖氧化酶氧化，而与Schiff试剂反应生成红色产物而得以显示。Abulkalam等[1]和Xu等[2]等证明其表达于结直肠癌及癌前病变的粘液中。近年李昕等[3]在肺癌患者的痰液中也检测到双糖残基的表达，建议为人群肺癌普查方法。我们用此方法对肺癌组织进行检测，发现它表达于肺癌的腺癌组织(阳性率36.11%)和不同组织类型的肺癌支气管断端的粘膜下腺体(阳性率71.76%)，而非腺癌的瘤组织和粘膜上皮未见表达。但我们在非肺癌的病变肺支气管断端及病灶中同样发现有表达(阳性率71.26%)，因而我们认为双糖残基作为肺癌的鉴定指标应持谨慎态度。
, http://www.100md.com
参考文献：
[1]Abulkalam M, Shamsuddin MD ,Alaaeldeen M, et al. A Test for Detection of colorectal cancer. Hum Pathol, 1989,19:7-10.
[2]Xu H, Sakamoto K, Shamsuddin AM，et al. Detection of the tumor marker D-galactose-β-(1→3)-N-Acetyl-D-galactosamine in colonic cancer and precancer. Arch pathol Lab Med, 1992,116:1234-1238.
[3]李昕，戴晓淳，何安光，等.痰液T抗原检测——一种肺癌筛选的简易方法. 中华结核与呼吸杂志,1995,18：285-286.
收稿日期：1999-05-30, 百拇医药