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编号:11032065
重组BMP7腺病毒的构建及转染兔髓核细胞的表达
http://www.100md.com 2005年8月1日 刘 巍 李 涛 史 勇 唐天驷
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     摘要:目的 构建重组BMP7腺病毒(Ad-BMP7),观察其转染兔髓核细胞后的表达。方法 (1)真核表达载体pcDNA3.1(+)-BMP7经一系列特定的限制性内切酶酶切,重组了BMP7的腺病毒载体,并转染293细胞进行扩增、滴度测定。(2)取20只新西兰大白兔,15只作为实验组,5只作为实验对照组。实验组椎间盘注射Ad-BMP7,实验对照组注射携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的腺病毒(Ad-GFP),另设空白对照组。分别于注射后1周、2周和4周各处死5只实验组兔子,注射后1周处死全部实验对照组兔子。RT-PCR和免疫组织化学染色检测BMP7的表达情况。结果 (1)重组Ad-BMP7经限制性内切酶PI-Sce工和I-CeuⅠ双酶切获得BMP7基因片段,PCR扩增得到特异的扩增片段,表明重组的Ad-BMP7载体构建成功。(2)实验组的髓核细胞显示了BMP7染色阳性结果,1、2和4周组的阳性染色率差异无显著意义(P>0.05)。结论 重组BMP7腺病毒的构建及其在兔髓核细胞的表达,为研究其对体内髓核细胞生物学行为的影响奠定了基础。

    关键词:腺病毒;骨形态发生蛋白7;髓核细胞

    中图分类号:R681.53;R394.8 文献标识码:A 文章编号:1673—0399(2005)04—0559—04

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