茉莉酸甲酯对曼陀罗毛状根中主要莨菪烷类生物碱成分积累和释放的影响(2)
1.3 茉莉酸甲酯溶液的配制茉莉酸甲酯购自上海三踏生物技术有限公司(批号20073-13-6),以无水乙醇为助溶剂,配置母液,过0.22 μm滤膜除菌,加入100 mL 1/2 MS液体培养基中,使MJ终浓度分别为100,150,200,250,300 μmol·L-1[4]。
2 方法
2.1 诱导试验
2.1.1浓度梯度试验 向继代培养18 d的曼陀罗毛状根液体培养基中添加浓度分别为100,150,200,250,300 μmol·L-1的MJ进行诱导处理,设置3个重复,每天观察毛状根的生长状况,每隔3 d收获1次,测定毛状根鲜重、干重和东莨菪碱、莨菪碱含量。
2.1.2 时间梯度试验 向继代培养18 d的曼陀罗毛状根液体培养基中添加MJ(MJ所用浓度由浓度梯度试验决定)进行诱导处理,设置3个重复,分别于处理0,3,6,9,12 d后收获,测定毛状根鲜重、干重和东莨菪碱、莨菪碱含量。
2.2 曼陀罗毛状根鲜重、干重的测定
选取生长旺盛的曼陀罗毛状根 ......
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