热毒宁注射液对大鼠肝脏CYP450酶的影响(3)
2.2.3液质联用检测条件色谱条件：以流动相A(含0.1%甲酸和5 mmol·L-1甲酸铵的纯水)和B(含0.1%甲酸的乙腈)梯度洗脱：30%B(0～1.5 min)，95%B(1.5～3.5 min)，30%B(3.5～3.6 min)，柱温25 ℃，流速0.45 mL·min-1，运行时间4.5 min;进样体积10 μL。内标为普奈洛尔(100 μg·L-1)。质谱条件：以 ESI源正离子MRM方式检测，毛细管温度320 ℃，毛细管电压+4 000 V，雾化电压25 psi，干燥气流速10 L·min-1，其他质谱分析参数见表1。
2.3荧光定量PCR技术测定热毒宁注射液对大鼠肝脏CYP450酶mRNA水平的影响
2.3.1大鼠肝组织总RNA的提取大鼠禁食12 h，脱臼处死，迅速取出肝脏，置于液氮中保存。按博迈徳公司RNA提取试剂盒说明书提取肝脏总RNA。用紫外分光光度计测定A260/A280，在1.7～1.9可用于下一步的实验。
2.3.2逆转录及实时定量聚合酶链式反应(Q-PCR)按TransGen公司逆转录及Q-PCR试剂盒说明书进行。取总RNA 1 μg，分别加入2×TS Reaction Mix 10 μL ......
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2.3荧光定量PCR技术测定热毒宁注射液对大鼠肝脏CYP450酶mRNA水平的影响
2.3.1大鼠肝组织总RNA的提取大鼠禁食12 h，脱臼处死，迅速取出肝脏，置于液氮中保存。按博迈徳公司RNA提取试剂盒说明书提取肝脏总RNA。用紫外分光光度计测定A260/A280，在1.7～1.9可用于下一步的实验。
2.3.2逆转录及实时定量聚合酶链式反应(Q-PCR)按TransGen公司逆转录及Q-PCR试剂盒说明书进行。取总RNA 1 μg，分别加入2×TS Reaction Mix 10 μL ......
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