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编号:12730387
基于液相蛋白芯片的3种中药有效组分配伍的抗炎作用研究(2)
http://www.100md.com 2015年10月15日 《中国中药杂志》2015年第20期
     2.7BioPlex200液相蛋白芯片分析系统检测细胞因子待检测细胞上清液样品在室温下完全溶解,1万r·min-1高速冷冻离心10min,取上清液用缓冲液1∶10稀释。依据试剂盒说明,每孔加入50μL抗细胞因子抗体检测磁珠,洗涤2次,向相应孔板加入缓冲液、标准曲线样品溶液、待检测细胞上清液样品。室温下避光500r·min-1摇床上孵育30min,洗涤3次。依次分别加入检测抗体25μL和StreptavidinPE荧光色素50μL,操作同上。每孔用125μL缓冲液重悬微珠,放入BioPlex200液相蛋白芯片分析系统读取各孔荧光强度,并根据标准品的荧光强度计算出样品中白介素类因子IL1α,IL1β,IL2,IL3,IL4,IL5,IL6,IL9,IL10,IL12(p40),IL12(p70),IL13,IL17,肿瘤坏死因子α(TNFα),嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin),干扰素γ(IFNγ) ......
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