木犀草苷人工抗原合成及免疫原性鉴定(1)

http://www.100md.com 2015年11月15日 《中国中药杂志》2015年第22期

     [摘要]金银花是常用大宗中药材之一，市场流通量大，但存在较多质量问题，建立一种金银花质量快速检测方法具有重要意义。木犀草苷是其质量控制指标之一，目前木犀草苷的含量检测主要以仪器检测为主，无法满足简单、快速、高通量的需求。酶联免疫检测法(ELISA)则具有灵敏度高、操作简单、设备仪器需求少、通量高等优点，是实现中药材有效成分快速检测的有效手段之一。该研究以木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷为原料，通过活泼酯法，分别与牛血清白蛋白(BSA)及鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原及包被抗原；紫外分光光度法检测半抗原与载体蛋白的偶联比，分别为3.7∶1(LG-BSA)和1.0∶1(LG-OVA)；免疫原(LG-BSA)免疫Balb/c雌性小鼠，制备抗血清，ELISA检测抗血清效价并建立血清特异性标线。结果显示血清效价>2000，以抗血清建立特异性标线，IC₅₀=298.7μg·L^-1，标线范围18.4～4852.4μg·L^-1 ......