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编号:12746794
动物药僵蚕高温麸炒的科学合理性(2)
http://www.100md.com 2015年12月1日 中国中药杂志 2015年第23期
     2.4.2样品免疫亲和柱净化 取50 mL黄曲霉毒素提取液上免疫亲和柱进行净化。净化时对柱子加压,保持净化柱流速为2 mL·min-1。用10 mL蒸馏水冲洗进样后的柱子后,除去柱中残余的水,然后柱子用甲醇洗脱,第1次用1 mL甲醇,常压保持5 min,然后加压洗脱,最后再用2 mL甲醇洗脱。

    2.4.3样品衍生化 收集的洗脱液经氮气缓和吹干,残留物中加入200 μL正己烷和100 μL三氟乙酸作为衍生化试剂,涡旋混合30 s,40 ℃水浴避光衍生15 min。衍生液经氮气缓和吹干,残留物中加入200 μL乙腈水(2∶8)溶液,涡旋混合30 s,溶液经0.45 μm滤膜过滤,备用。

    2.4.4样品HPLC分析 精密吸取上述衍生化的供试品溶液20 μL进样分析,外标法计算含量。

    色谱条件:Agilent SBC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈(A)水(B) ......
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