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编号:12746840
基于偏最小二乘法对金银花抗流感病毒谱效相关性模型的探讨(2)
http://www.100md.com 2015年12月1日 中国中药杂志 2015年第23期
     2.1.4指纹图谱的测定

    取 40 批金银花药材作为训练集,分别按2.2.1项下制备供试品溶液,并按2.2.2项下测定指纹图谱。通过“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”软件对各色谱数据进行分析,生成金银花药材指纹图谱的共有模式,确定了14 个共有峰,见图 1。40 批金银花药材共有峰峰面积的变化范围见表1。

    2.2金银花药材抗流感病毒试验

    2.2.1供试品溶液制备

    取2.1.2项下制备溶液,用细胞维持液从原浓度开始分别作1∶1,1∶2,1∶4,1∶8,1∶16,1∶32,1∶64,1∶128,1∶256,1∶512系列稀释,共制备10个供试品溶液,备用。

    2.2.2金银花抗流感病毒试验

    将MDCK细胞按1×105个/mL的浓度接种到96孔细胞培养板上,每孔100 μL,待细胞长成单层后,用移液枪吸取上清液,再加入100 TCID50甲型流感病毒液150 μL,吸附1 h,用PBS洗去未吸附的病毒。加入2.2.1项下系列浓度金银花药液50 μL,每个浓度设3个复孔,同时设细胞空白对照组、病毒对照组及利巴韦林阳性组。37 ℃,5% CO2培养,当病毒对照组的细胞病变(CPE) 达到4+时,每孔加入10 μL CCK8溶液,于37 ℃,5%CO2继续培养2 h,于450 nm波长测定各孔吸光度,按下式计算不同浓度金银花药液对甲型流感病毒的抑制率 ......
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