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编号:12770777
龙胆科藏药“蒂达”类的DNA条形码鉴定研究(2)
http://www.100md.com 2016年2月15日 中国中药杂志2016年第4期
     1 材料

    研究中材料来自龙胆科5个属13个物种,其中獐牙菜属9种、花锚属1种、扁蕾属1种、喉毛花属1种、肋柱花属1种,共151份实验样本。所有样本大部分自采,印度獐牙菜购买于青海、西藏,川西獐牙菜、抱茎獐牙菜各有3个批次购买于青海、西藏。从GenBank下载5条序列(序列号AJ306125,AJ410334,AF255915,EU158832,EU158833)。样品经成都中医药大学民族医药学院张艺研究员和中国科学院西北高原生物研究所卢雪峰研究员共同鉴定。凭证标本保存于成都中医药大学民族医药学院。实验样本信息见表1。

    2 方法

    2.1 DNA提取、PCR扩增和序列测定 对药材及基原植物用75%乙醇擦拭表面,自然干燥后,取药材样本30~50 mg,用高通量组织球磨仪(45 Hz,120 s)研磨后,核分离液(2% PVP,20 mmol·L-1EDTA,100 mmol·L-1pH 8.0 Tris-HCl和0.7 mol·L-1NaCl)洗涤3~5次(750 μL/次)至粉末颜色变浅 ......
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