机采冰冻血小板质量分析
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随着临床医学的不断发展，机采血小板因其疗效高、效果好，使用量在不断加大，但是机采血小板的保存期短(1～5 d)，临床上存在血小板供应不及时的问题，所以保证足够的血小板储备和供应就显的尤为重要[1]。在新鲜机采血小板液中缓慢加入100%的二甲基亚砜(DMSO)使终浓度为5%，放入-80℃冰箱速冻，保存期是1年，融化后血小板的回收率达到95%以上[2]。机采冰冻血小板的质量符合质控要求，此项技术对保证临床及时使用血小板具有非常重要的意义。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 美国百特CS3000plus血细胞分离机，所用的耗材、抗凝剂、盐水、空袋等均为百特配套产品, 血小板震动保存箱，SWCJ2FD百级净化台，MDF382E -80℃超低温冰箱，AntoCounter970血细胞记数仪，HFB热合机，KJXIA循环冰冻血浆解冻箱。100%二甲基亚砜(美国进口)。
1.2 献血员的筛选 体检要严格按照国家规定的献血员的体检标准进行，年龄最好20～35岁，体重50 kg以上，并且献血员在机采的前1周未服用含阿司匹林类化合物，前1 d晚上和当日没饮含酒精类的饮料，不能吃油腻食物，保证无脂血。(1)检验：体检合格的献血员在机采当日进行血小板计数(150～300)×109/L，WBC计数(4～10)×109/L，RBC计数(3.5～5.5)×1012/L，血比积0.35～0.45。(2)机采前准备：做好分离机的预热和初始化工作，以检查机器的运行情况保证采集成功，同时为献血员预防性的服用钙剂和冬天做好盐水的加温工作，以防发生不良反应。(3)标本的收集：将采集后的血小板成品充分混匀，手工摇动5～10 min，保证血小板的充分解聚，热合留样，将成品放入血小板震荡保存箱内震荡1 h，以使成品充分混匀。(4)加冷冻液(DMSO)：将成品在百级净化台内严格无菌操作缓缓加入100% DMSO，加入的量按DMSO在袋内的终浓度达到5%计算，为防止血小板的热灼伤以2 min加1 ml的速度加入，连接管用滚钳处理1～2次，以使管内的液体和袋内的液体混合均匀，热合5 cm的一段留样，包装，放入-86℃的超低温冰箱内速冻。(5)融化：取出冰冻血小板迅速放入循环冰冻血浆解冻箱内进行融化，严格控制温度为37℃，时间14 min。融化后要肉眼观察有无絮状物，剪下留样管进行质控。
2 结果
本组70例(份)均符合PLT与WBC质量标准(PLT<2.5×1011/袋、WBC<8.0×109/袋)，合格率100%，67例符合RBC质量标准(<8.0×109/袋)，合格率为95.7%。
3 讨论
成品中PLT计数均在2.5×1011/袋以上，合格率为100%，说明血小板的纯度高，冰冻后的PLT的数量没有受到影响，回收率达到了95%以上。WBC的混入量合格率也是100%，在保证成品完全混匀的前提下加入100%二甲基亚砜，而且严格控制速度，融化时严格掌握温度和时间，所以我们的样本没有1例产生絮状物。RBC的混入量存在超标现象，原因如下：(1)选择健康合格的献血员，并且献血员手臂血管应充盈，保证穿刺顺利，使血流均匀；采前献血员要进行严格的筛选，保证各项指标符合机采献血员的质量要求，以免反复发生70或151报警，造成收集袋内充红，致使成品中的红细胞混入量超标。(2)机采人员要熟练操作血细胞分离机，并且能及时处理各种报警。如果静脉血流不畅，反复发生70或151报警，处理不及时，也会发生充红，致使成品中的红细胞混入量超标。(3)献血员采集血小板的前1 d晚餐及当日的早餐不要吃油腻食物，要清淡饮食。如果献血员的血液是微脂血，采集时的IDO值就要提高，那么成品中的脂肪微粒和红细胞的混入量也会增加。(4)如果采集过程不顺利，有发生红细胞混入量超标的因素存在，有时甚至是肉眼可见的产品最好不要做冰冻血小板，以免冰冻后红细胞破裂，致使病人输入后发生反应。(5)血细胞计数仪要定期维护和保养，减少人为的误差。
参考文献
1 江朝富，崔徐江，汪全喜.血细胞分离机制备的浓缩血小板与洗涤血小板的体外实验对照.中国输血杂志，2002，15：164.
2 李大鹏，徐学芳，任红.血细胞分离机采集单个供者血小板的临床应用.中国输血杂志，2002，15：37.
作者单位： 753000 宁夏回族自治区石嘴山市中心血站
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