5种分离纯化粪便中隐孢子虫卵囊方法的比较
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朱民 何艳燕 上海市疾病预防控制中心 上海市疾病预防控制中心
【摘要】[目的]比较5种分离纯化粪便中隐孢子虫卵囊的方法。[方法]分别用饱和氯化钠漂浮法、Sheather's蔗糖漂浮法、甲醛-乙醚沉淀法、不连续蔗糖密度梯度离心法和Percoll密度梯度离心法对感染小鼠粪样中的隐孢子虫卵囊进行分离纯化,浓集回收的卵囊利用鼠抗隐孢子虫卵囊壁单克隆抗体间接免疫荧光法检测卵囊数,作定量比较,同时定性比较回收卵囊液的纯度。[结果]Percoll密度梯度回收的卵囊数量最多,而且杂质少;不连续蔗糖密度梯度离心法和Sheather's蔗糖漂浮法次之,但前者回收的卵囊液中杂质较少;饱和氯化钠漂浮法获得的卵囊液中杂质也较少,但卵囊数次之;甲醛-乙醚沉淀法获得的卵囊液中检出的数量最少,且杂质最多。[结论]不连续蔗糖密度梯度离心法是一种经济、有效的卵囊分离纯化方法。
【关键词】 隐孢子虫 卵囊 分离
【分类号】R383
隐孢子虫(Cryptosporid ium)是一种能广泛感染脊椎动物的寄生原虫,是引起人和多种动物腹泻的重要病原体[1-4]。隐孢子虫主要寄生于宿主胃肠道,卵囊随粪便排出体外。能否从粪便中分离出纯净卵囊,直接影响到对隐孢子虫的深入研究。本研究将几种用于粪便中分离纯化隐孢子虫卵囊
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摘要：[目的]比较5种分离纯化粪便中隐孢子虫卵囊的方法。[方法]分别用饱和氯化钠漂浮法、Sheather's蔗糖漂浮法、甲醛-乙醚沉淀法、不连续蔗糖密度梯度离心法和Percoll密度梯度离心法对感染小鼠粪样中的隐孢子虫卵囊进行分离纯化，浓集回收的卵囊利用鼠抗隐孢子虫卵囊壁单克隆抗体间接免疫荧光法检测卵囊数，作定量比较，同时定性比较回收卵囊液的纯度。[结果]Percoll密度梯度回收的卵囊数量最多，而且杂质少；不连续蔗糖密度梯度离心法和Sheather's蔗糖漂浮法次之，但前者回收的卵囊液中杂质较少；饱和氯化钠漂浮法获得的卵囊液中杂质也较少，但卵囊数次之；甲醛-乙醚沉淀法获得的卵囊液中检出的数量最少，且杂质最多。[结论]不连续蔗糖密度梯度离心法是一种经济、有效的卵囊分离纯化方法。
关键词： 隐孢子虫；卵囊；分离
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