【摘要】通过分析ELISA试验常见技术偏差原因，针对具体操作过程中常见问题提出相关对策。

    【关键词】ELISA 偏差 解决方法

    中图分类号：R373 文献标识码：B 文章编号：1005-0515(2011)5-048-02

    ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。业已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定， ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点[1]。不仅适用于临床标本的检查，也适合于血清流行病学调查，可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法[2]。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中很高的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时会出现试验偏差，本文就一些在ELISA操作过程中常见的试验偏差原因进行分析并提出解决方法：

    1 样品稀释ELISA反应是一种具有很高敏感性的反应，血清稀释不精确，就会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。很多试验人员在进行稀释的过程中，吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。

    2 试剂盒平衡及加样 试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃)，一般需在室温放置20～30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够 ......