枳椇子的生药鉴定及质量初步研究(2)
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表1 加样回收率测定结果(n =5)
2.2.9 样品的含量测定 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液20 μL,注入高效液相色谱仪,依法测定,结果见表2。经过对3 批枳椇子药材的含量测定,并经统计学处理,规定枳椇子药材中槲皮素含量不得少于0.702 mg/g。
表2 槲皮素含量测定结果(x±s,n =3)
3 讨论
枳椇子中总黄酮常用的提取溶剂有水、不同浓度的乙醇等,提取方法有浸渍法、渗漉法、索氏提取法、回流法等[6],总体分为冷提和热提两种方式。故用不同溶剂、不同方法进行提取,以干浸膏得率和槲皮素含量为指标,并结合药效学实验结果进行了对比实验,结果表明：枳椇子提取方法以75%乙醇为提取溶剂,索氏提取器提取法最佳。
对槲皮素对照品溶液进行紫外可见光全波长扫描,结果在360 nm 和256 nm 处均有较大吸收,比较相同色谱条件下360 nm 和256 nm 波长下的色谱图,检测波长为256 nm 时的色谱图具有分离度好、灵敏度高、杂质干扰少的优点,因此,采用256 nm 为检测波长。
在枳椇子槲皮素含量测定条件中,磷酸的加入作用有二：其一,流动相中加入磷酸,可抑制黄酮苷酚羟基的电离,改善分离效果,防止拖尾,使峰形尖锐、对称,缩短分离时间；其二,流动相的pH 值对测定影响显著,采用磷酸调节一系列不同pH值的缓冲溶液进样检测,结果发现,pH 值偏大或偏小,分离效果不好,拖尾现象较严重,因此,优选pH=4.1,分离效果好。
本实验组研究发现,枳椇子的种子在75%乙醇提取物具有抗脂质过氧化和抗肝纤维化的作用,通过对枳椇子有效部位的初步研究,总黄酮可能是其药效部分,因此,对枳椇子黄酮化合物中槲皮素含量测定的研究具有积极的意义。结果表明,该方法简便可行,准确可靠,重复性好,能有效地控制该药物的质量。
参考文献
[1]嵇扬, 杨平, 李俊. 枳椇子酒与枳子水提取液解酒毒作用比较研究[J]. 时珍国医国药, 2001, 12 (6) : 4812483.
[2] 徐亚军,郭华春. 黄山药的研究进展[J]. 中国农学通报, 2005,21 (2) : 94.
[3] 胡志林,刘文娜,张永军.枳椇子中总黄酮提取工艺研究[J].中成药,2004,26(12)：1065.
[4] 李克明, 任丽娟. 枳椇子化学成分研究. 黄酮类成分的分离与鉴定[J ]. 中草药, 1999, 30 (增刊) : 60260.
[5] 张 洪,叶丽萍,张如洪,等.枳椇子有效部位的初步研究[J].广东药学院学报,2003,19(2)：111 ......
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