青皮饮片HPLC指纹图谱研究(2)
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2.5.5 主成分分析 根据15批青皮样品HPLC指纹图谱，选取峰面积较大的主要共有峰(分别为辛弗林、橙皮苷及2、3、5、6、7、8号峰)作为指标，采用SPSS20.0统计软件对15批青皮样品进行主成分分析。以选取的8个主要成分的峰面积为数据源，所有数据经过标准化处理后，分别求得对应于2个最大特征值的主成分PCA1(橙皮苷)和PCA2(未知7号共有峰)，以PCA1和PCA2建立坐标系，进行投影即可得到所有样本的主成分分析平面图(见图4)。各样本之间的距离越远相似性越差。结果显示，15批样品可分为3类，与聚类分析结果一致。
3 讨论
试验分别以50%、70%、90%甲醇为提取溶剂，结果70%甲醇提取的样品色谱峰型较好，峰个数较多。对同一产地样品分别设置超声时间为20、30、40 min进行考察，结果超声30 min样品液中橙皮苷和辛弗林含量最高。分别比较了加入15、25倍量70%甲醇对样品中橙皮苷和辛弗林提取效率的影响，结果加入25倍量溶剂时提取率达95%。对超声和回流提取方法进行比较，结果2种提取方法无明显差异。
色谱条件分别考察了乙腈-水、乙腈-0.1%磷酸水、乙腈-0.2%磷酸水、乙腈-0.3%磷酸水4个流动相系统，结果表明，采用乙腈-0.3%磷酸水系统，各峰的分离度较好，基线平稳，有利于指纹图谱的建立。比较了样品在230、254、280、360 nm波长的色谱图，结果280 nm波长下的各色谱峰分离度最佳，且各色谱峰均能完好地体现在色谱图上。
由图4可知，S11批次青皮中橙皮苷含量与其他批次样品有显著差异，经过分析，发现S11青皮品种为四花青皮，其他均为个青皮。采用系统聚类分析和主成分分析法对15批青皮样品进行分类，结果一致，说明这2种分析获得的结果是可靠的。综合研究表明，若仅以橙皮苷的含量来评价青皮饮片的质量，指标单一，而采用HPLC建立青皮饮片的指纹图谱，可提供更全面、可靠的评价方法。
参考文献：
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(收稿日期：2014-08-06；编辑：陈静)
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