缺血后处理对高血脂大鼠缺血/再灌注心肌MPO的影响
[摘要]目的:研究缺血后处理对高血脂大鼠缺血/再灌注心肌MPO及sICAM的影响。方法:选择高血脂SD大鼠36只,随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组(对照组)和缺血后处理组,每组12只。制备大鼠心肌缺血再灌注模型。结果:①血清中肌酸激酶活性的测定:再灌注结束后缺血后处理组和缺血再灌注组肌酸激酶活性明显高于假手术组分别为(270±34),(967±57),(726±38)U/L,P<0.01,缺血后处理组明显低于对照组(P<0.01)。②心肌MPO活性:缺血后处理组和对照组心肌髓过氧化物活性均高于假手术组(P<0.01),缺血后处理组与对照组相比心肌MPO活性降低(P<0.01)。结论:缺血后处理可减轻高血脂大鼠缺血再灌注损伤,其机制可能与减轻氧化损伤有关。
[关键词]心肌再灌注损伤;缺血后处理;髓过氧化物酶
[中图分类号]R589
[文献标识码]A
, 百拇医药
[文章编号]1006-1959(2009)07-0288-01
研究表明缺血后处理可以缩小心肌梗死面积,减少再灌注心律失常,具有心肌保护作用[1-3]。髓过氧化物酶(MPO)的活性可以反应心肌组织中中性粒细胞的浸润程度,本文旨在探讨缺血后处理对高血脂大鼠缺血再灌注心肌MPO的影响。
1材料和方法
1.1实验动物:健康清洁级SD大鼠36只,喂养高血脂造模饲料。
1.2动物模型制备及分组
1.2.1动物模型制备:实验大鼠以30g/L戊巴比妥钠(45mg/kg)腹腔注射麻醉,仰卧固定于鼠台,行气管切开,用呼吸机进行机械通气,取左胸第3肋间进胸,5-0丝线(结扎线)穿过心肌表层在肺动脉圆锥处稍下方穿线,线两端各穿一小缝合垫片后再并线一起经内径约2mm的聚乙烯管中穿出,用血管钳推压小管压迫左冠状动脉前降支造成缺血,放松即可恢复血流形成再灌注。
, 百拇医药
1.2.2动物分组:随机分为3组:①假手术组(sham),开胸后穿线做套环,但不收紧结扎线;②缺血再灌注组(control),收紧结扎线缺血40min,放松结扎线再灌注240min;③缺血后处理组(IP),缺血40min后,再灌注10s,缺血10s,连续3个循环,然后再灌注240min。
1.3检测指标
1.3.1CK的检测:再灌注结束后自右颈动脉分别采血2mL,3000r/min离心10min,-70℃冰箱保存待测。采用7180型全自动生化分析仪(日本日立公司)检测CK的含量,参照试剂盒(北京中山生物技术有限公司)说明书操作;
1.3.2心肌MPO活性检测:实验完毕后取缺血区心肌制备成组织匀浆,4℃离心30min,取上清液70℃冰箱保存,按MPO试剂盒(购于南京建成生物公司)说明操作,在460nm处测对照管和实验管的光密度值:D(460),计算MPO活力。MPO活性以37℃的反应体系中H2O2被分解1μmol为1个酶活力单位。
, http://www.100md.com
1.4统计学分析:采用SPSS11.5进行数据处理,计量数据以(x±s)表示,采用方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
再灌注结束后缺血后处理组和缺血再灌注组CK及心肌MPO活性明显高于假手术组,缺血后处理组明显低于缺血再灌注组(P<0.01),见表1。
3讨论
缺血后处理的保护机制可能与氧自由基的生成减少、内源性活性物质的释放、膜通道功能状态的变化和蛋白激酶的活化有关。
MPO是中性粒细胞中特异性酶,能催化产生多种活性氧化物质,导致氧化应激和氧化性组织损伤,其激活程度与中性粒细胞的浸润程度密切相关,其活性的测定可以反映中性粒细胞浸润情况,本研究发现缺血后处理组心肌组织MPO明显减低,提示缺血后处理减少了中性粒细胞的浸润。
4结论
缺血后处理可以减轻再灌注损伤,其机制可能与减少中性粒细胞粒细胞的浸润有关。, 百拇医药
[关键词]心肌再灌注损伤;缺血后处理;髓过氧化物酶
[中图分类号]R589
[文献标识码]A
, 百拇医药
[文章编号]1006-1959(2009)07-0288-01
研究表明缺血后处理可以缩小心肌梗死面积,减少再灌注心律失常,具有心肌保护作用[1-3]。髓过氧化物酶(MPO)的活性可以反应心肌组织中中性粒细胞的浸润程度,本文旨在探讨缺血后处理对高血脂大鼠缺血再灌注心肌MPO的影响。
1材料和方法
1.1实验动物:健康清洁级SD大鼠36只,喂养高血脂造模饲料。
1.2动物模型制备及分组
1.2.1动物模型制备:实验大鼠以30g/L戊巴比妥钠(45mg/kg)腹腔注射麻醉,仰卧固定于鼠台,行气管切开,用呼吸机进行机械通气,取左胸第3肋间进胸,5-0丝线(结扎线)穿过心肌表层在肺动脉圆锥处稍下方穿线,线两端各穿一小缝合垫片后再并线一起经内径约2mm的聚乙烯管中穿出,用血管钳推压小管压迫左冠状动脉前降支造成缺血,放松即可恢复血流形成再灌注。
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1.2.2动物分组:随机分为3组:①假手术组(sham),开胸后穿线做套环,但不收紧结扎线;②缺血再灌注组(control),收紧结扎线缺血40min,放松结扎线再灌注240min;③缺血后处理组(IP),缺血40min后,再灌注10s,缺血10s,连续3个循环,然后再灌注240min。
1.3检测指标
1.3.1CK的检测:再灌注结束后自右颈动脉分别采血2mL,3000r/min离心10min,-70℃冰箱保存待测。采用7180型全自动生化分析仪(日本日立公司)检测CK的含量,参照试剂盒(北京中山生物技术有限公司)说明书操作;
1.3.2心肌MPO活性检测:实验完毕后取缺血区心肌制备成组织匀浆,4℃离心30min,取上清液70℃冰箱保存,按MPO试剂盒(购于南京建成生物公司)说明操作,在460nm处测对照管和实验管的光密度值:D(460),计算MPO活力。MPO活性以37℃的反应体系中H2O2被分解1μmol为1个酶活力单位。
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1.4统计学分析:采用SPSS11.5进行数据处理,计量数据以(x±s)表示,采用方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
再灌注结束后缺血后处理组和缺血再灌注组CK及心肌MPO活性明显高于假手术组,缺血后处理组明显低于缺血再灌注组(P<0.01),见表1。
3讨论
缺血后处理的保护机制可能与氧自由基的生成减少、内源性活性物质的释放、膜通道功能状态的变化和蛋白激酶的活化有关。
MPO是中性粒细胞中特异性酶,能催化产生多种活性氧化物质,导致氧化应激和氧化性组织损伤,其激活程度与中性粒细胞的浸润程度密切相关,其活性的测定可以反映中性粒细胞浸润情况,本研究发现缺血后处理组心肌组织MPO明显减低,提示缺血后处理减少了中性粒细胞的浸润。
4结论
缺血后处理可以减轻再灌注损伤,其机制可能与减少中性粒细胞粒细胞的浸润有关。, 百拇医药