不同剂量叶下珠对乙醇所致肝损伤的保护作用
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【摘要】目的 :研究不同剂量叶下珠对乙醇所致肝损伤的保护作用。方法:将60只昆明种小鼠分为正常对照组、乙醇对照组、叶下珠大、中、小剂量组,连续给药14d后,处死小鼠,取小鼠血清和肝脏测定ALT、AST、GST、MDA、SOD和MDA、TG等指标,评价不同剂量叶下珠对肝损伤的保护作用。结果:叶下珠大剂量组能抑制乙醇所致肝损伤引起的ALT、AST、GST、MDA、TG升高和SOD下降,且中剂量组还能抑制ALT、MDA、TG升高和SOD下降。结论:中剂量以上叶下珠对乙醇所致的肝损伤有保护作用,其中大剂量叶下珠的保护作用可能会较好。
【关键词】 叶下珠;乙醇性肝损伤;小鼠
【中图分类号】R969.4【文献标识码】B 【文章编号】1006-1959(2009)10-0055-01
叶下珠Phyllanthus urinaria L.为大戟科油柑属植物,作为一种传统的中草药,常用于抗菌和抗病毒,民间主要用于治疗黄疸、肝炎、肠炎、痢疾、肾炎水肿等症[1]。有研究表明,叶下珠对酒精性肝损伤具有治疗作用[2],不同剂量叶下珠对抗乙肝病毒效果有所不同[3]。本实验旨在研究不同剂量叶下珠对乙醇所致肝损伤的影响。
1 材料与方法
1.1 受试药物与试剂仪器:将新鲜叶下株洗净晒干,全草入药,打碎成粉末,制成不同剂量的浸膏备用;无水乙醇购自山东恒佳药化开发有限公司;甘油三酯(TG)试剂盒,中生北控科技股份有限公司生产;丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷胱甘肽S转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、考马斯亮蓝试剂盒均购自南京建成生物工程研究所产品。722分光光度计为上海精密科学仪器有限公司生产;TDL80-1A型离心机为上海安亭科学仪器厂生产;FSH-2型高速匀浆机为上海民仪电子有限公司。
1.2 动物:健康昆明种小白鼠,体重18～25g,雌雄兼用。
1.3 实验分组和用药:将60只小白鼠随机分为5组,每组12只,分别为:①正常对照组,用生理盐水,剂量为12.0m1/(kg•d);②对照组,用38%乙醇溶液,剂量为14.25m1/(kg•d)(乙醇11.4g/kg可致小鼠肝损伤[4]);③叶下珠小剂量组,剂量为叶下珠1g/(kg•d) +38%乙醇溶液14.25m1/(kg•d);④叶下珠中剂量组,剂量为叶下珠5g/(kg•d)+38%乙醇溶液14.25m1/(kg•d);⑤叶下珠大剂量组,剂量为叶下珠10g/(kg•d)+38%乙醇溶液14.25m1/(kg•d)。各组动物在相同条件下饲养,均在每日清晨空腹灌喂,连续给药14d。末次给药24h后颈动脉取血制备血清,测定血清的ALT、AST、GST、SOD活性。取血后处死,取肝脏制备10%肝匀浆,检测MDA、TG含量。操作按试剂盒说明书进行。
1.4 统计方法:完全随机设计的方差分析及两两比较,使用SPSS13.0统计软件进行。
2 结果
2.1 叶下珠对肝损伤小鼠血清ALT、AST、GST和SOD活性的影响:各组小鼠血清ALT、AST、GST和SOD值的差异均有统计学意义(F=14.75,P<0.001;F=7.17,P<0.001;F=5.42,P<0.001;F=18.98,P<0.001)。乙醇对照组ALT、AST、GST值均高于正常对照组(P<0.01)、SOD值低于正常对照组(P<0.01),而叶下珠大、中剂量组的ALT值均低于乙醇对照组(P<0.01),表明叶下珠大、中剂量能抑制乙醇所致的ALT活性升高;叶下珠大剂量组的AST、GST值均低于乙醇对照组(P<0.05),表明叶下珠大剂量能抑制乙醇所致的AST、GST活性升高;叶下珠大、中剂量组的SOD值均高于乙醇对照组(P<0.01),表明乙醇引起的小鼠血清SOD活性下降,叶下珠大、中剂量能使其活性升高,见表1。
2.2 叶下珠对肝损伤小鼠肝脏MDA和TG含量的影响:各组小鼠肝脏MDA和TG含量的差异均有统计学意义(F=7.96,P<0.001;F=20.82,P<0.001)。乙醇对照组MDA和TG值均高于正常对照组(P<0.01),而叶下珠大、中、小剂量组的MDA值均低于乙醇对照组(P<0.01或0.05),表明叶下珠大、中、小剂量能抑制乙醇所致的MDA值升高;叶下珠大、中剂量组的TG值均低于乙醇对照组(P<0.01),表明叶下珠大、中剂量能抑制乙醇所致的TG值升高,见表2。
3 讨 论
酒精性肝病是由于长期大量饮酒所致的肝脏疾病。现代医学认为其可能的发病机制为机体的免疫反应异常、自由基的产生和脂质过氧化、生物膜的损伤、肝细胞代谢紊乱等[5]。血清ALT、AST、SOD活性和肝脏MDA、TG含量的变化可以反映酒精导致肝损伤的严重程度[6,7], 血清GST也是反映乙醇性肝损害状态的灵敏指标[8]。动物实验证实,叶下珠能明显降低CCl4引起的小鼠血清ALT的升高,抑制肝脏MDA的生成[9];研究也发现叶下珠能够显著降低损伤小鼠血液的ALT、AST,抑制MDA的产生和上调SOD的活性[2]。因此,本实验以叶下珠大、中、小剂量组与乙醇对照组比较,观察不同剂量叶下珠对肝损伤小鼠血清ALT、AST、GST、SOD的活性,以及肝脏MDA和TG含量的影响。结果表明,叶下珠大、中剂量组肝损伤小鼠血清的ALT、AST、GST和肝脏MDA、TG值均较乙醇对照组降低明显,而血清SOD明显升高,提示中剂量以上叶下珠对乙醇所致的肝损伤有保护作用,其中大剂量叶下珠的保护作用可能会较好。
参考文献
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作者单位:255213 山东万杰医学院, 百拇医药(宿连政)