1.3方法

    1.3.1布鲁氏菌的分离培养 无菌取牛、羊流产胎儿，肝、脾、胃液等组织及胃内容，其中每份牛犊组织病料同时开展需氧和厌氧培养，而羔羊组织病料只进行需氧培养[2]，37℃培养7d，观察菌落生长情况。挑取可疑菌落、用布鲁氏菌阳性、阴性血清进行凝集试验，对在阳性血清中凝集的可疑菌株，进行进一步纯化培养，对纯化可疑菌株、采用分子生物学PCR方法进行分析鉴定。本试验是用PCR鉴定试验代替传统布鲁氏菌病细菌学分离鉴定方法中的生化鉴定试验，即不开展硫化氢产生、染料抑菌、单项特异血清A、M及粗糙R血清凝集、噬菌体裂解试验等生化试验。

    1.3.2 PCR方法 取上述细菌学方法分离的可疑菌株，用布鲁氏菌VirB8-PCR和AMOS-PCR两种方法不同的试剂按说明进行试验。

    2结果

    2.1布鲁氏菌可疑菌株的分离 细菌学分离方法共分离20株可疑菌株，其中从羊流产胎儿中分离到11个株菌，牛流产胎儿中检出9个株菌。

    2.2 VirB8- PCR和AMOS-PCR试验结果 从上述20株可疑菌中 ......