siRNA降低肿瘤细胞端粒酶活性的研究
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罗建新 付文金 巢时斌 李登清 陈明 彭剑雄 中南大学湘雅医学院检验系 中南大学湘雅医学院检验系 中南大学湘雅医学院检验系 中南大学湘雅医学院检验系 中南大学湘雅医学院检验系 中南大学湘雅医学院检验系
【摘要】利用T7RNA聚合酶在体外转录合成针对端粒酶模板RNA(hTR)的两条互补单链RNA,经退火形成siRNA.采用TRAP法检测端粒酶活性,分析siRNA在肿瘤细胞裂解液的干扰作用.结果表明:T7RNA聚合酶可以高效地转录出短的单链RNA,制备的siRNA可明显地降低肿瘤端粒酶的活性,其降低肿瘤端粒酶活性的作用强于等量的反义链RNA.该法廉价、高效、简易,有可能为肿瘤的基因治疗提供一种新的探索途径.
【关键词】 TRNA聚合酶 端粒酶 RNA干扰 siRNA 肿瘤细胞
【基金】湖南省科委课题资助项目(98SSY1003)
【分类号】R73-3
在多种生物细胞中,外源或内源性双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)可触发同源m RNA的特异性降解,进而使该基因表达沉默(gene silence),这种现象称为RNA干扰(RNA in-terference,RNAi)[1].其产生机理为在细胞内长链dsRNA被降解产生21～25个核苷酸(nt)dsRNA,即小干扰性RNA(sm a
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摘要：利用T7RNA聚合酶在体外转录合成针对端粒酶模板RNA(hTR)的两条互补单链RNA，经退火形成siRNA。采用TRAP法检测端粒酶活性，分析siRNA在肿瘤细胞裂解液的干扰作用。结果表明：T7RNA聚合酶可以高效地转录出短的单链RNA，制备的siRNA可明显地降低肿瘤端粒酶的活性，其降低肿瘤端粒酶活性的作用强于等量的反义链RNA。该法廉价、高效、简易，有可能为肿瘤的基因治疗提供一种新的探索途径。
关键词：T7RNA聚合酶；端粒酶；RNA干扰；siRNA；肿瘤细胞
中图分类号：R730
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(1006)04-0354-04
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