康复训练对脑梗死患者血清中血管内皮生长因子表达的影响(2)
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Keywords:Vascular endothelial growth factor Cerebral Infarction;Neuroprotective effect Rehabilitative training
【中图分类号】R49【文献标识码】A 【文章编号】1008-1879(2010)11-0001-02
血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)又叫血管调理素(vasculotropin)是新近发现的一种生长因子[3]，具有促内皮细胞分裂的作用，可以促进血管的生长和侧支循环的建立。最近VEGF基因已克隆出来，有人应用重组VEGF给冠状动脉[4]和下肢动脉闭塞的动物血管内持续灌注14天，证明可以促进血管的新生和侧支循环的建立，有效地防治心肌梗塞和闭塞性血管病[5，6]。在脑缺血发生时，VEGF对神经系统具有多重保护作用，涉及血管形成、促进神经发生、直接的神经营养和神经保护作用等多种机制。康复功能训练可增加大脑的血液循环、改善脑缺血、促进脑组织的代偿、恢复，同时可使VEGF表达上调，而促进微血管新生。
本实验通过对23例脑梗死患者进行康复训练后测定VEGF，并和26例非康复训练脑梗死患者的血清作对照，初步探讨康复训练对脑梗死患者血清中血管内皮生长因子表达的影响。并对55例脑梗死患者在不同时间进行神经功能评分及测定血清中血管内皮生长因子的含量，比较轻、中、重度3组之间差异，以此说明VEGF的含量与脑缺血损伤程度关系。
1 材料与方法
1.1 研究对象。为本院神经内科2007年6月～2007年10月收治的脑梗死患者75名，其中男45名，女30名，年龄40～65岁，平均(58.33±7.66)岁。
1.2 纳入标准：①发病在24 h以内；②诊断符合1995年中华医学会第4届全国脑血管病学术会议修订的《各类脑血管病的诊断要点》中脑梗死的诊断标准[1]。③经颅脑CT或MRI扫描确诊。排除标准：①以前发生过脑卒中的患者；②3个月内有脑部外伤史的患者；③有心肌梗死、肾脏及肝脏疾病的患者；④有肿瘤疾病的患者。健康体检者(正常组)：26名，其中男16名，女10名，年龄40～62岁，平均(56.43±6.56)岁，并且符合排除标准除外影响VEGF的相关因素。
1.3 主要试剂。
血管内皮生长因子(VEGF)测试盒：美国ADL公司生产
南京建成生物工程研究所提供。
1.4 主要实验仪器。
酶标仪：芬兰 Denley Dragon公司生产，MK2型。
高速离心机：德国Heraeus公司生产,PTCO型。
超低温冰箱：北京三洋公司生产，MPF-2AT型。
1.5 方法。
1.5.1 研究对象分组。
将23名药物治疗的同时进行功能康复训练的(被动运动)脑梗死患者分为康复组，而26名只进行药物治疗的脑梗死患者分为治疗组。康复患者均由康复医师进行被动训练，每天30-40分钟。55名未进行康复训练的脑梗死患者分为ACI组，给予神经功能评分。
1.5.2 康复训练。
从早期开始进行关节活动的训练，不仅可以维持关节正常的活动范围，还可以有效的防止肌肉废用性萎缩的发生，并可以达到促进全身机体恢复的作用。在急性期可做比最大活动范围略小的被动运动，具体的被动活动范围可参考下列标准：
肩关节：屈曲：0°～ 90°；
外展：0°～ 90°；
外旋：0°～ 30°。
肘关节：屈曲：20°～ 120°。
前臂：90°旋后位 ～ 中立位。
下列一些关节和肢体比较容易引起变形和挛缩，必须特别加以注意。
上肢——肩关节：内收、外旋。下肢——髋关节：屈曲、内收、外旋。
肘关节：屈曲。膝关节：屈曲。
腕关节：屈曲。踝关节：伸展。
指关节：屈曲(有时伸展)。
1.5.3 神经功能评分：改良爱丁堡+斯堪的那维亚卒中量表。
1.5.4 标本采集。
住院后第1天采清晨空腹肘静脉血2～3 mL，并于住院第7、15 d各采血1次；正常组采血1次。标本应清澈透明，悬浮物应离心去除，避免溶血和高血脂标本；所有样本以无菌试管留取，不抗凝，室温放置待凝固后，用离心机以3 000 r•min 离心10 min，分离血清，置于(-80℃)超低温冰柜内保存待测。
1.5.5 标本检测。
血清VEGF的测定采用双抗体夹心酶联免疫分析(ELISA)法检测，试剂盒由美国 Adlitteram Diagnostic Laboratories (ADL)有限公司生产，南京建成生物工程研究所提供。操作步骤严格按照说明书上要求操作，最后在酶标仪上进行测定A450值。绘制标准曲线，以标准品浓度作横坐标，A值作纵坐标，以平滑线连接，各标准品的坐标点。通过标本的A值可在标准曲线上查出其浓度。同时行入院的常规检查：血生化、血常规、纤维蛋白原等项目。
1.6 统计分析。
所有数据应用spss11.5软件进行统计分析，数据均采用X±S.E.M 表示，两样本之间比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。多组间比较应用单因素的定量资料的方差分析，P<0.05差异均有统计学意义。
2 结果
2.1 同一组间不同时间点的比较。急性脑梗死患者第一天时VEGF开始表达，第7天时其含量达到一定高峰，之后表达开始下降。康复组在第1天、第7天、第15天VEGF的浓度不同时间点比较(P < 0.05)说明有明显差别。治疗组在第1天、第7天、第15天VEGF的浓度不同时间点比较(P < 0.05)亦说明有明显差别。见表1。
2.2 同一时间点不同组间的比较。急性期脑梗死患者与正常人比较血清中VEGF(P > 0.05)无明显差别。在第7天，康复组与治疗组患者血清中VEGF含量均升高到一定浓度，经单因素的方差分析(P > 0.05)说明亦无明显差别。在第15天所有脑梗死患者的血清中VEGF含量明显下降，而康复组患者经14天的康复训练，虽然VEGF含量下降但仍高于未经康复训练的治疗组(*P < 0.05),两组间有显著差异，有统计学意义。见表2、图2。
2.3 血清VEGF的含量与ACI组神经功能评分的关系 血清VEGF在神经功能评分轻、中、重度3组之间差异有显著统计学意义 ......
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