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编号:11824286
3种精子优化处理方法处理精液效果评价(2)
http://www.100md.com 2009年10月1日 《华夏医学》 2009年第5期
     1.3 实验分组

    对120例标本随机分为4组,每组30例,对照组(不做特殊处理),上游组( 即上游法处理组),Percoll组(即Percoll密度梯度离心法处理组),Isolate组(即Isola te密度梯度离心法处理组)。

    1.4 精子处理方法

    ①上游法:取液化精液2ml与4ml洗精液(ART-1006)混匀,300g离心15min ,留管底精子团,再用2ml洗精液(ART-1006)混匀,300g离心10min,去除上清液后,留底 部沉 淀精子,加入1.0ml平衡液(ART-1020),倾斜45度角,置CO2培养箱孵育45min,待精子充 分上游后, 吸取上层含精子的悬液0.5ml于无菌试管中。②Isolate密度梯度离心法:取2.0ml 40% Is olate(上层)加入锥形离心管内,然后用无菌巴斯德吸管垂直沿管底缓慢加入2.0ml 80% Isol ate(下层),使两液层交界处可见清晰分界面,最上层加入待处理精液2.0ml,离心和精子收集 与上游法相同。③Percoll梯度离心法:离心管底层加含80% Percoll,中层加含40% Percoll, 上层加入2.0ml精液,方法同Isolate法。

    1.5 精液分析方法

    将已处理后的精子悬液(对照组取精子原液)充分混匀,采用WHO推荐的 精液常规分析标准方法[1]进行精液分析,主要观察指标精子密度、a+b级活力、正 常形态率 ......
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