心、肝、肾等实体器官移植的有关研究结果表明,移植器官体外灌注腺病毒载体可以在不影响其他器官及组织的情况下,获得高浓度的区域性免疫抑制效果,延长移植物存活时间,但实体脏器对热缺血耐受时间较短,其体外灌注多在4℃的冷保存下进行,且时间多在1h左右[9-10]。 有研究表明,移植物局部灌注病毒载体,在37℃下的转染效率明显高于4℃下的转染效率,如果提高体外孵育温度、延长灌注时间,则能提高局部转染效率[8]。但时间越长,移植物活力下降越多,吻合血管后缺血再灌注损伤必然也越大。与实体器官不同,包含皮肤的复合组织在生理温度(37℃)下的耐缺血能力明显优于心、肝、肾等实体器官。因此可考虑在体外37℃下进行较长时间的药物灌注孵育,转染效果可以明显增强,从而获得更好的移植物局部免疫抑制效果,延长移植物存活。

    本实验利用复合组织皮瓣移植物的这一特点,采用近交系大鼠下腹部游离皮瓣移植模型,将CTLA-4Ig基因重组腺病毒经皮瓣供养动脉灌注,并夹闭皮瓣静脉、动脉,在37℃下进行较长时间孵育,从而提高转染效率,并能减轻腺病毒全身转染可能带来的风险[11] ......