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编号:12095974
大鼠牙髓干细胞与骨髓间充质干细胞分化成骨样细胞能力对比研究(2)
http://www.100md.com 2011年4月1日 《中国美容医学》 2011年第4期
     2.4 成骨分化诱导:将P2代BMSCs和DPSCs分别接种至六孔板,加入含10%FBS,10nm/L地塞米松,50μg/L抗坏血酸,10mmol/Lβ-甘油磷酸钠的成骨诱导培养基进行诱导培养。两周后细胞爬片进行免疫荧光染色,观察经诱导后细胞OCN与DSP的表达情况。

    3结果

    3.1 光镜下观察:光镜下可见大鼠BMSCs呈梭形生长,核圆位于细胞中间,形态狭长的细胞彼此连接,胞浆透亮,可见散在成集落生长的细胞群(见图1A)。DPSCs光镜下形态呈多角形,细胞成簇生长,内部紧密处细胞较多,且排列较为集中,形态已多边形为主,边缘处细胞生长较为稀疏,细胞形态狭长类梭形,胞质丰富,细胞核圆,居中(见图1B)。

    3.2 细胞生长曲线:P1代细胞传代后经过1天培养大部分细胞贴壁,换液后将无法贴壁的细胞清除,以后隔日换液一次,每日分别测量96板中3孔的吸光值取平均值,连续检测10天。通过吸光值的变化绘制生长曲线。可见,加入的细胞在前3天变化相对较小,在第4天进入生长的对数期,生长随度增快,并在第7天左右进入生长平台期(见图2),DPSCs的增殖分裂的速度相对BMSCs相比更为旺盛,并且通过光镜观察在96孔底部牙髓干细胞排列更为紧密。

    3.3流式细胞表面标志物检测:通过流式细胞标志物检测发现,经过传代培养,接受检测的P2代BMSCs细胞形态大小相对集中,由造血干细胞表面表达的标志物CD45为阴性 ......
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