成人表皮干细胞和汗腺细胞的体外分离和培养(2)

http://www.100md.com 2015年7月15日 中国美容医学2015年第14期

     研究成人表皮干细胞和汗腺细胞(Sweat Gland cells；SGCs)的体外分离培养和增值及鉴定，可为观察ESCs和SGCs共培养前后细胞形态、细胞表型改变；探讨ESCs再生SGCs的可行性提供前提条件并且打下坚实的实验基础。

    1 材料和方法

    1.1 设计与取材

    2014年10月-2015年3月，在解放军总医院第一附属医院实验室进行细胞学的体外观察及鉴定实验。标本选自无损伤全层成人正常皮肤及不同年龄段成人包皮，分别由解放军总医院第304临床部烧伤整形五病区及泌尿外科门诊提供，均取得患者知情同意。

    1.2 主要试剂及材料

    DMEM/F12基础培养基(Gibco公司)，FBS(Gibco公司)，PBS，青霉素/链霉素/俩性霉素B三抗(美国PAA公司)、胰酶-乙二胺四乙酸(EDTA)、K-SFM培养基，重组人表皮生长因子(rh-EGF)、Dispase酶(Gibco公司)，Ⅳ型胶原(美国Sigma公司)；Ⅱ型胶原酶；β1整合素(β1-integrin)受体单克隆抗体(英国Abcam公司) ......