1.2.5 ELISA检测IL-1β、TNF-α蛋白的表达：按ELISA试剂盒产品说明书步骤操作：使用标准品绘制标准曲线，取反应板加样、并按说明依次加入一抗、酶标抗体及底物工作液，最后加入反应终止液，于酶标仪以波长450nm读取各孔光密度值。通过标准曲线和ELISAcalc软件计算各样本含量。

    1.2.6 qPCR检测IL-1β、TNF-αmRNA的表达：提取的总RNA经浓度测定、纯度鉴定后，逆转录为cDNA，按照反应体系依次添加SYBR Green染料、引物、dNTP、cDNA、Taq酶及去离子水，配制PCR反应溶液。置于Real-time PCR仪上进行PCR扩增反应。反应条件为：95℃3min预变性，然后按照95℃30s变性，58℃1min退火，72℃1min，共40做个循环，最后72℃7min延伸。

    2 结果

    2.1 维生素D对人牙周膜成纤维细胞活性的影响

    如图1所示：与空白对照组相比 ......