富血小板血浆对人脂肪来源干细胞增殖率的影响(2)

http://www.100md.com 2016年2月1日 《中国美容医学》2016年第3期

     1.7 MTT法测细胞活力

    将细胞以1×10⁶/ml密度接种于96孔培养板，200μ1/孔，每组36孔，分别加入不同体积的PRP孵育，同时设空白对照组，分12h、24h、36h、48h、60h、72h六个时段观测；

    到达观测时段时，每组取6孔，每孔加入MTT液20μl，37℃、5%CO₂培养箱培养4h；弃培养液，各孔加200μl二甲基亚砜，振荡10min；用酶联仪在490nm波长下检测每孔的吸光值(OD)，测定细胞活力，并计算细胞增殖率。细胞增殖率的计算公式为：细胞增殖率(%)=OD_PRP组/OD_对照×100%。

    1.8 Westernb lot法检测Cyclin D₁蛋白的表达

    用细胞裂解液提取细胞总蛋白 ......