脂肪干细胞成脂分化的研究进展(2)
不同实验小组使用的成脂诱导液成分几乎相同，但浓度有一定差异。有学者分别在Zuk诱导液的基础上添加了问充质细胞生长添加物、L-谷氨酰胺、三碘甲状腺氨酸、生物素和泛酸盐等成分，发现也可诱导ASCs的成脂分化。不同浓度的成分可能影响诱导效率，但目前尚未达成一致。有学者认为高浓度的地塞米松、胰岛素和IBMX可以促进ASCs成脂分化，而另外一些学者认为降低地塞米松、胰岛素和吲哚美辛的浓度，并不影响ASCs的成脂分化。有研究显示大剂量的胰岛素并不影响细胞数量，而是增加了脂肪细胞的脂质含量。目前有多种商业化的成脂分化诱导液，避免了因每次配制诱导液的差异导致实验结果的变异。本实验室体外化学诱导ASCs成脂分化的步骤如下：将第2代的ASCs用PBS漂洗后，用胰蛋白酶+EDTA处理，将细胞悬液1000rpm离心5min后去上清，重悬后细胞计数，以5×103个细胞/cm2的密度种植于12孔板，24h后更换为成脂分化诱导液(StemPro Adipogenesis DifferentiationKit，Gibco，USA)继续培养 ......
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