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姜黄素对结肠癌HCT116细胞侵袭和抗失巢凋亡的影响(2)
http://www.100md.com 2006年11月2日 《医药世界》 2006年第1期
姜黄素对结肠癌HCT116细胞侵袭和抗失巢凋亡的影响
姜黄素对结肠癌HCT116细胞侵袭和抗失巢凋亡的影响

     5.2琼脂糖凝胶电泳 将HCT116细胞和MDCK细胞分别用含0.01%EDTA的0.25%胰酶消化,吹打均匀,制成5x105/ml的单细胞悬液。将2 ml细胞接种于多聚- HEMA的培养皿中,同时取2 ml普通培养皿中作为阴性对照。48 h后,收集细胞,采用DNA抽提试剂盒按照说明书操作提取DNA,无水乙醇沉淀。25℃琼脂糖凝胶电泳,电压60V,1.5h。

    5.3 TUNEL检测将MDCK细胞和结肠癌细胞采用胰酶(5 mmol/L EDTA)消化后,重悬于无血清RPMI1640培养液中,吹打均匀,将1x 105个细胞/well种于多聚-HEMA包被的培养皿中,放入培养箱继续培养。将100 μl细胞悬浮液加入覆盖有细胞加样槽的玻片上,4℃,800 r/min离心2min。3.7%甲醛固定30s。余操作同TUNEL试剂盒。凋亡指数(Apoptosis Index,AI)计算:凋亡细胞数/总细胞数 x 100%。

    6.统计学处理 采用SPSS8.0软件对数据进行处理。P

    图1姜黄素对结肠癌HCT116细胞软琼脂集落形成的影响

    图2姜黄素对结肠癌细胞侵袭的影响( ±s,n=3)

    图3琼脂糖凝胶电泳测定(12h)

    参考文献

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