茵陈与熊去氧胆酸联用对妊娠肝内胆汁淤积症大鼠T辅助细胞因子Th1/Th2平衡状态及妊娠结局的影响(1)
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摘要：目的：探讨菌陈与熊去氧胆酸(UDCA)片联用对妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)大鼠T辅助细胞因子TH1/TH2及妊娠结局的影响。方法：50只孕大鼠中任选40只诱发建立ICP模型，且随机分成4组。茵陈组10只孕鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃，5mL·d，连服10天；UDCA组lO只孕大鼠于妊娠第15天起喂UDcA片。15mg·kg·d，连服10天；联合组10只孕大鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃，5mL·d，同时加用UDCA片灌胃，15mg·kg·d，连服10天；诱发后未治疗10只孕大鼠作为对照组。其余10只孕大鼠为正常组。应用酶联免疫吸附实验(ELSA法)测定50只孕鼠妊娠第15天(治疗前)和第21天血清中IL-2、IFN-γ、IL-4水平。记录各组孕大鼠妊娠天数及仔鼠存活率。结果：(1)ICP孕鼠(对照组)IL-2、IFN-γ水平高于正常组(P0.05)。UDCA组IL-2水平较治疗前、对照组下降(P0.05)。(3)联合组治疗后IL-2、IFN-γ水平较治疗前、对照组下降(P0.05)。(4)对照组孕鼠妊娠天数、仔鼠存活率与正常组比较(P0.05)；仔鼠存活率较对照组均明显提高(P0.05)。结论：IcP孕鼠T辅助细胞功能发生了变化，Th1细胞因子过度表达导致Th1/Th2失衡。茵陈与UDCA联用对ICP孕鼠Th1/Th2平衡状态向Th2细胞因子转化及仔鼠存活率提高作用较单一使用茵陈、UDCA更明显。
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关键词：茵陈；熊去氧胆酸(uDCA)；妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)；1111细胞因子； 1112细胞因子；大鼠
中图分类号：11285.5 文献标识码：A 文章编号：1673—7717(2007)11—2338—03
妊娠肝内胆汁淤积症(intraheptic cholestasis of pregnan-cy，ICP)是以皮肤瘙痒，胆汁酸、肝酶升高为特点的妊娠中晚期并发症，其早产、死胎、死产及围产儿死亡率一直偏高，病因尚不清楚。近年研究显示ICP的发生、发展及转归可能与母体的免疫平衡失调有关。本研究旨在观察茵陈与熊去氧胆酸(UDCA)联用对ICP孕大鼠Th1/Th2平衡状态及妊娠结局的影响，为临床治疗ICP提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料来源
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1.1.1 主要试剂
1000g茵陈浓煎、过滤、提纯成400mL。UDCA片是上海三维长江生化制药厂产品，苯甲酸雌二醇针剂是上海通用药业有限公司产品。IL-2、IFN-γIL-4试剂盒购自深圳科润达生物工程有限公司，批号20050611。
1.1.2 动物选择
实验研究动物SD孕大鼠由浙江省医学科学院动物实验中心提供，无菌饲养，孕大鼠体重200g～250g。
1.2 方法
1.2.1 孕大鼠ICP模型采用葛环等建立的SD孕大鼠ICP模型方式，于孕鼠妊娠第10天(阴栓形成日定为妊娠第1天)开始在大鼠后肢内侧皮下注射苯甲酸雌二醇针剂5mg·kg·d，连续5天，建立孕鼠ICP模型。
, 百拇医药 1.2.2 分组及给药方法SD孕大鼠共50只，其中诱发为ICP模型的孕鼠40只，且随机分成4组。茵陈组10只孕鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃，5mL·d，连服10天；UDCA组10只孕大鼠于妊娠第15天起喂UDCA片，15mg·kg·d，连服10天；联合组10只孕大鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃，5mL·d，同时加用UD-CA片灌胃，15mg·kg·d，连服lO天；诱发后未治疗10只孕大鼠作为对照组。其余10只孕大鼠为正常组。
1.2.3 标本采集
50只孕鼠于妊娠第15天(治疗前)鼠尾采血2-3mL，于妊娠第21天眶静脉采血3mL。分别提取血清，低温保存备用。
1.2.4 检测指标及方法
应用酶联免疫吸附实验(ELISA法)，对各组孕鼠于妊娠第15天和21天所收集的血清稀释100倍后定量测定IL-2 IFN-γIL-4水平，具体操作按试剂盒说明书进行。
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1.2.5 记录各组孕大鼠妊娠天数及仔鼠存活率
1. 3 统计学方法
计量资料比较采用t检验；计数资料比较采用x2检验。
2 结果
2.1 ICP孕鼠与正常孕鼠IL-2 IFN-γIL-4水平比较
ICP孕鼠(对照组)于妊娠第15天和21天检测IL-2水平明显高于正常组(P0.05)。见表1、表2。
2.2 各药物组治疗前后IL-2 IFN-γ IL-4水平变化
治疗后茵陈组IL—2水平较治疗前、对照组明显下降(P0.05)。UDCA组IL-2水平较治疗前、对照组明显下降(P0.05)。联合组治疗后IL-2、IFN-γ水平较治疗前、对照组下降(P0.05)。见表3。
3 各药物组治疗后妊娠天数仔鼠存活率评价
各药物组治疗后妊娠天数与对照组比较明显延长(P0.05)。仔鼠存活率较对照组均明显提高(P0.05)。对照组妊娠天数、仔鼠存活, 百拇医药(胥银宇 顾江红 张信岳)