南葶苈子饮片中多糖的提取及含量测定(2)
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注:C为样品溶液的葡萄糖浓度(μg/mL);D为样品溶液的稀释倍数;W为样品的重量(g);f为换算因子。
2.6重复性试验
取同一样品粉末1g,6份,按样品测定方法操作平行测定,计算多糖含量,求得RSD=0.73%。表明方法的重现性良好。
2.7加样回收率试验
取样品(已知多糖含量10.40%)粉末1g,6份,精密称定,精密加入无水葡萄糖对照品39.4mg,按样品测定方法制备溶液并测定吸光度值。按下式通过换算因子折算多糖的回收率。结果见表2。
3讨 论
(1)硫酸蒽酮法测定多糖含量的原理是根据多糖在强酸性条件下,被浓硫酸水合产生的高温迅速水解,产生单糖,单糖进一步脱水形成糠醛衍生物,糠醛衍生物在强酸性条件下,与一些具有活性亚甲基并有共轭未饱和系统的化合物,如苯酚、蒽酮、苯胺等缩合生成有色物质,该有色物质在特定波长处和一定浓度范围内,吸光度与浓度呈线性关系,从而可用比色法测定其单糖含量,再根据单糖与多糖之间的换算因子,计算多糖的含量。
(2)实验过程中需要注意的是:①蒽酮试剂不稳定,需用时新配;②显色反应过程中 ......
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