复肝宁对免疫性肝纤维化大鼠HYP SOD MDA的影响(2)
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1.2方法动物适应1周后按体重编号，依据随机数字表法分为6组：正常组、模型组、秋水仙碱治疗组、复肝宁低、中、高剂量治疗组。正常组10只，其余各组均为12只，雌雄各半。实验选用猪血清诱导免疫损伤性HF模型。除正常组外，其余各组均参照于世瀛等[1]的方法制造HF病理模型，采用未灭活猪血清腹腔注射，每周2次，每次0.5mL/只，连续10周。6周后即可形成HF。各治疗组于造模6周后给药，1次/日，每天同一时间灌胃，连续4周，分别根据大鼠具体体重确定药量，每3~4日称体重量后调整剂量1次。用药剂量：复肝宁低、中、高剂量治疗组分别按3.85、7.70、15.40g/kg灌胃治疗；秋水仙碱治疗组按0.1mg/kg体重灌胃给药；模型组和正常组每日予蒸馏水灌胃1次，2mL/次。实验10周后结束，均于末次给药后24h，禁食12h，动物断颈处死。肝组织匀浆制备：取右叶部分肝组织，用冰生理盐水冲洗，冰浴中制成10%肝组织匀浆，离心3000r/min×10min，待测。肝组织制备：光镜：取右侧肝叶，用10%中性福尔马林液固定，石蜡包埋和HE染色。
1.3 观察指标及方法肝组织HYP含量、SOD活力、MDA含量测定：均应用比色法测定，按试剂盒说明书操作，其中HYP含量用μg/g表示，SOD含量用表示U/mg，MDA含量用nmol/mg表示。肝组织形态学：肝组织经梯度酒精系列脱水、浸蜡、石蜡包埋、切片、HE染色、观察肝脏组织学改变并照相。肝纤维化分级参照文献分为4级：“-”汇管区无明显纤维组织；“+”汇管区有较多的纤维组织，局限性；“+ +”汇管区有大量纤维组织增生，呈窄带状 ......
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