止痛消结丸治疗大鼠乳腺增生病的实验研究(2)
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参见附件。
1 实验材料
1.1实验药物
苯甲酸雌二醇注射液,由上海通用药业股份有限公司生产,批号:070402,规格:1mL∶1mg;黄体酮,上海通用药业股份有限公司生产,批号:0705130,规格:20mg/mL;10%水合氯醛,陕西中医学院附属医院制剂中心,批号:2006080,规格:100mL瓶;乳癖消片,沈阳中药制药有限公司,批准文号:国药准字Z 21020747,生产批号:050507;止痛消结丸,陕西中医学院该课题组提供,人临床用量为1次6g,1日3次,相当于生药量0. 36g生药/kg。
1.2实验动物
SPF级 Wistar雌性大鼠 70只,9周龄,体重(200±20)g,第四军医大学实验动物中心提供,合格证号:SCXK(军)002-005。大鼠常规饲养1周,适应环境后开始实验,用脱毛剂脱去第2、3对乳房周围的体毛进行用药干预。
1.3实验仪器
电子秤,WT11001R型电子天平,普通离心机,BX-60光学显微镜,切片机,LG-R80型血液流变仪,游标卡尺等(陕西中医学院实验中心提供)。
2实验方法
2.1分组造模及给药
将大鼠随机分为 7组,空白对照组、模型对照组、模型证实组、止痛消结丸大、中、小剂量组、阳性对照乳癖消片1.15g/kg组。除空白对照组外,其余各组大鼠大腿肌肉内注射苯甲酸雌二醇0. 5mg/kg,每天1次,连续25天后改用黄体4mg/kg,每天1次,连续5天,复制大鼠乳腺增生模型[3],空白对照组注射等体积生理盐水。造模第21天开始药物治疗,大、中、小剂量止痛消结丸组分别灌胃给予止痛消结丸混悬液4.64,2.32和1.16g生药/kg,相当于成人用量的14,7,3.5倍。阳性对照乳癖消组灌胃乳癖消混悬液1.15 g生药/kg,相当于成人用量的10倍。空白对照组和模型对照组给予等体积蒸馏水,连续给药30天。末次给药24h后进行实验。
2.2观察方法
2.2.1 血液流变性的测定 末次给药24h后,腹腔注射10%水合氯醛(0.4mL/100g)进行麻醉,心脏取血,肝素抗凝,以 LG-R80型血液流变仪测定全血黏度、血浆黏度、血沉、红细胞压积、纤维蛋白原,观察各组动物血液流变性指标。
2.2.2 乳腺组织病理的观察 在造模前、造模第20天及灌胃给药期间每10天测量大鼠第2对乳头的高度,末次给药24h后,取下第2对完整的乳房,用10%的福尔马林固定,石蜡包埋切片,HE染色,在光镜下做病理组织学观察。
2.3统计学处理
数据分析采用SPSS 16.0统计软件,计量数据采用(均数±标准差)表示,组间比较采用单因素方差分析t检验:P<0.01表示组间有显著性差异,P<0.05表示组间有差异。
3结 果
见表1～表 3。
4讨 论
祖国医学认为,乳腺增生病病位在肝、脾、肾,属本虚标实证,肾气不足、冲任失调为发病之本,肝气郁结、痰凝血瘀为发病之标。笔者紧紧抓住这一病机,按照理气止痛,活血化瘀,消癖散结,调摄冲任的法则组成止痛消结丸(柴胡、青陈皮、制香附、莪术、郁金、丹参、当归、元胡、浙贝母、肉苁蓉)。方中柴胡疏肝理气;青陈皮理气健脾消积;郁金、元胡活血行气止痛;制香附疏肝解郁、调经止痛;丹参、当归活血化瘀;莪术破血行气,消积止痛;浙贝化痰散结。现代药
表1 止痛消结丸对实验乳腺增生大鼠第2对乳头高度(mm)的影响(±s)
组别n第1天第20天第30天第40天第50天
空白对照 100.82±0.050.85±0.040.95±0.070.96±0.070.96±0.06
模型对照 80.82±0.032.18±0.12**2.50±0.102.41±0.12 2.32±0.11**
乳癖消组100.81±0.062.20±0.20**2.18±0.202.09±0.181.93±0.14△△止痛消结丸小剂量100.81±0.042.02±0.22**2.02±0.201.95±0.211.87±0.18△△
止痛消结丸中剂量100.82±0.042.16±0.22**2.13±0.222.05±0.221.96±0.20△△
止痛消结丸大剂量100.82±0.052.15±0.30**2.09±0.281.99±0.281.83±0.20△△
注:与空白对照组比较**P<0.01;与模型对照组比较△△P<0.01。
表2 止痛消结丸对实验乳腺增生大鼠乳腺组织病理学改变(±s)
组别n小叶数腺泡数腺泡腔直径
空白对照10 9.84±1.265.1±0.83 6.46±0.65
模型对照815.50±1.5825.2±2.0726.10±1.37
乳癖消组10 13.70±0.54**23.2±1.03**18.90±1.52**
止痛消结丸小剂量10 13.50±0.80**22.6±1.05**16.60±0.84**
止痛消结丸中剂量10 12.80±0.77**19.4±2.28**14.30±1.31**
止痛消结丸大剂量10 12.10±0.84**17.3±1.11**12.60±0.72**
注:与空白对照组比较,**P<0.01。
表3 止痛消结丸对实验乳腺增生大鼠血液流变性的作用(±s)
组别全血黏度(mPa•s)高切低切血浆黏度(mPa•s)红细胞压积(v/v)血沉(mm/h) 纤维蛋白原(g/L)
空白对照4.76±0.19△△30 ......
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