活血利水法对兔外伤性玻璃体视网膜病变增殖膜上整合素β1表达的影响(3)
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2.3 整合素-β1的测定
2.3.1 免疫组化染色观察结果 空白组标本染色弱阳性“+”,说明整合素β1在正常视网膜组织上有表达;模型组PVR增生膜标本染色强阳性“3+”,整合素-β1表达明显增强;活血利水组PVR增生膜标本染色呈阳性“2+”,也有整合素-β1的表达,但阳性染色程度较模型组弱,表达水平较低;活血化瘀组和利水明目组均阳性“2+”,阳性染色程度较活血利水法组强,表达水平较高。见图1。2.3.2 给药30天后ERM中整合素-β1的表达 见表6。
如表6所示,A组、E组与B组比较,阳性区AG和AOD均存在显著性差异(P<0.01)。C组、D组与B组比较,阳性区AG和AOD也存在差异(P<0.05)。AOD越强,阳性细胞面积越大,AG值越小,表示阳性产物整合素-β1的表达越强烈。E组能明显下调整合素-β1的表达,与C、D组相比较,也具有显著性差异(P<0.05)。
3 讨 论
3.1 中医学对本病的认识
外伤性PVR 属祖国医学外不见证的瞳神疾病,可归属
表6 各组ERM中整合素-β1的
表达阳性指标测定(±s)
注:与正常组相比,△P<0.01;与模型组相比,*P<0.05; 与利水明目组相比,#P<0.05;与活血化瘀组相比,εP<0.05。
于中医暴盲、云雾移睛或视瞻昏渺等范畴,认为津液化其精微,上输于肺,若雾露之溉,受气取汁,变化而赤,方始为血,再经肺朝百脉之功上输于目。津液和调,则脉道通利,瞳神不为所犯。肝肾同源,若肾阴虚,虚火上炎,灼伤脉络,血溢脉外;或肝气郁结,气滞血瘀,脉络阻滞,血行不畅;或肝郁日久化热,或外邪入里化热,迫血妄行;或肾水不足,水不涵木,肝阳上亢,血不循经;或外伤后损及脉络致血不循经,溢于脉外,出血日久不散变生膜状物而发本病。血不利则为水。脾虚气血不足,目失所养或水湿上泛,痰湿凝结亦可导致视网膜增殖物形成。上述理论充分说明了生理上水血同源,病理上水血互累,故而提出“水血互结”之病机。《血证论》:“血积既久,其水乃成”,水病而累及血,瘀血化水”。根据水血互结之病机,治疗上主张用活血利水法以活其血、利其水、散其结,组方散血明目片,以奏活血通脉、利水明目之功。散血明目片以三七、白茅根为君药,蒲黄、益母草、猪苓、泽泻为臣药,酒大黄、地龙、防己等为佐药。方中三七化瘀止血,活血通脉;白茅根止血利水,凉血清热;蒲黄生用利水、止血化瘀;益母草活血利水,《本草汇言》:“行血养血,行血而不伤新血,养血而不滞新血,诚为血家之圣药也”;猪苓、泽泻利水且明目;大黄通行十二经,清热泻火,擅通瘀滞,酒炒可减其苦寒泄下之弊,增其通滞化瘀之功;防己利水,《银海精微》云:“惟血雍上,宜用大黄、防已坠下之剂”;地龙清热通络利水,《本草纲目》云:地龙“性寒而下行……能解诸热疾……而通经络”。诸药合用,共奏活血、通脉、利水、明目之功。
3.2 活血利水之散血明目片对ERM中整合素-β1的表达的影响
近年来的研究结果显示【sup】[8]【/sup】,PVR的启动和发展表现为过度的创伤愈合过程,大致分为三个阶段,即炎症反应期、增殖期及瘢痕重塑期。其中包括血一视网膜屏障破坏、炎症反应、细胞移行、增生和分泌细胞外基质、瘢痕收缩等。其基本的病理过程是视网膜色素上皮细胞(RPEc)的移行增生,在视网膜前和视网膜后及玻璃体腔内形成膜,属于细胞增生性疾病,其发生、发展必然与细胞增生的调控失常有关。有文献报道, PVR的发生有很多危险因素,包括视网膜巨大裂孔、多发裂孔、无晶状体眼、脉络膜脱离、伴有葡萄膜炎等【sup】[9]【/sup】。在PVR的发生发展中,细胞外间质(extracellular matrix,ECM)成分也起了极重要的作用。PVR膜中ECM的主要成分有纤维连接蛋白、胶原纤维、层粘连蛋白等等【sup】[10]【/sup】。整合素(integrin)大多为亲异性细胞粘附分子,其作用依赖于Ca【sup】2+【/sup】,介导细胞与细胞间的相互作用及细胞与细胞外基质间的相互作用。含β1亚单位的整合素主要介导细胞与细胞外基质成分之间的黏附。目前的研究表明,在增殖的纤维膜边缘上有整合素β1 的表达,并认为来源于成纤维细胞。整合素β1作为细胞膜上的细胞外基质结合受体,是细胞与基质胶原、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白的主要联系桥梁。有研究显示【sup】[11]【/sup】,整合素β1 在脱离的视网膜各层广泛表达,说明在视网膜脱离后的确存在细胞与细胞间质的信号的变化。在玻璃体视网膜增殖性病变发生过程中,胶原、纤维粘连蛋白等细胞外基质成分发生沉积,色素上皮细胞、成纤维细胞可以通过整合素β1 可以与这些细胞外基质结合,为细胞的游走和增殖提供了条件。视网膜复位后整合素β1 核酸表达较视网膜脱离状态下核酸表达明显低,说明视网膜复位对导致细胞游走、增殖的整合素β1 的表达有抑制作用,从而减少了细胞迁移的条件,在一定程度上可以抑制增殖性玻璃体视网膜病变的进一步进展。
本实验结果表明,模型组ERM中整合素β1阳性程度明显增高,说明整合素β1参与了PVR的形成。活血利水组、活血化瘀组、利水明目组中整合素β1的阳性表达均较模型组明显减少,其中活血利水组的整合素β1的表达又低于活血化瘀组和利水明目组,说明活血利水法、活血化瘀法、利水明目法对抑制外伤性PVR的形成均起一定作用,而且活血利水法疗效优于单纯活血化瘀法或利水明目法。活血利水之散血明目片由三七、酒大黄、蒲黄、猪苓、防己、地龙、白茅根、泽泻、益母草等药物组成,方中所用的药物,据现代药理研究表明,大部分具有抑制血小板聚集和黏附、改善血液流变性、降低血管的通透性、改善血管的脆性、扩血管、加速止血、防止血栓形成的作用,因此能加速消除玻璃体混浊,减少积血对视网膜的毒性损伤,减少巨噬细胞的浸润及炎性因子的释放,从而降低外伤性PVR中视网膜上整合素β1的高表达,因而减少了细胞直接接触,也因此减少视网膜色素上皮细胞、成纤维细胞、巨噬细胞、神经胶质细胞等迁移与增殖,进而抑制PVR的形成和发展。
参考文献
[1] Chen YZ,Gu XF,Caen JP,et al.Interleukin-3 is an autocrine growth factor of human megakaryoblasts,the DAM and MEG-01cells[J].Br J Haematol,1994,88(3):481-487.
[2] 彭清华,李建超,张琳. 散血明目片对兔玻璃体积血白细胞介素-6表达的影响[J].中国中医眼科杂志,2002, 12(2):84-87.
[3] 张琳,彭清华,张琳. 散血明目片治疗玻璃体积血的实验研究[J].中国中医眼科杂志,2002,12(2):63-66.
[4] 李建超,彭清华,张琳.散血明目片对兔视网膜的保护性作用[J].中国中医眼科杂志,2002,12(4):195-197.
[5] 汪谦.现代医学实验技术[M].北京:人民卫生出版社,1997.
[6] 万光明.一种新的PVR模型的制作与评价[J] ......
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